王立峰
- 作品数：8 被引量：22H指数：3
- 供职机构：大连医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 姜黄素通过抑制炎症反应和GPX4介导的铁死亡减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤
- 2023年
- 目的基于姜黄素(curcumin,Cur)对炎症反应和铁死亡的调控作用,探讨Cur保护脑缺血-再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)机制。方法采用改良式线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artey occlusion,MCAO)模型。将SD大鼠随机分成:假手术(Sham)组、CIRI组、Cur组。采用Longa法对大鼠神经行为学评分;苏木精-伊红染色观察脑组织形态学变化;经试剂盒检测缺血侧大脑皮层组织中谷胱甘肽、丙二醛、Fe^(2+)含量以及炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6水平;Western blot检测脑皮层组织中铁死亡关键调控蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达;通过TUNEL法检测脑神经细胞凋亡情况;透射电镜下观察脑皮层神经细胞超微结构改变。结果与CIRI组比较,Cur组大鼠神经行为学评分降低,脑皮层中丙二醛、Fe^(2+)和TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著降低(均P<0.05),而谷胱甘肽含量和GPX4蛋白表达显著升高(均P<0.05)。病理学检查可见CIRI组神经细胞水肿、破裂和坏死,Cur组仅有轻度水肿,少量坏死细胞。TUNEL染色可见Cur组神经细胞凋亡低于CIRI组[(23.6±3.5)%vs.(36.8±4.2)%,P<0.05]。透射电镜下CIRI组线粒体体积缩小、双层膜结构增厚、嵴减少或断裂,Cur组细胞核染色质部分边集,线粒体破坏减少。结论Cur可以减轻CIRI,其机制与抑制炎症反应和GPX4介导的铁死亡有关。
- 蒯鑫王立峰李永宁李青松
- 关键词：姜黄素脑缺血-再灌注损伤
- 乌司他丁对脓毒症大鼠肠屏障保护抗凋亡机制研究被引量：6
- 2017年
- 目的:探讨乌司他丁对脓毒症大鼠受损肠屏障的保护作用及其可能机制。方法:采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制作脓毒症模型,36只雄性SD大鼠随机分为对照组、脓毒症组和乌司他丁组,每组各12只大鼠。乌司他丁组实验前15min大鼠尾静脉注射乌司他丁(20万U/kg),12h后重复给药,对照组、脓毒症组于上述时间点注射等量生理盐水,建模后6、12、24、48h大鼠尾静脉采血测定TNF-α、IL-6的质量浓度;留取肠组织行石蜡包埋,苏木精-伊红染色及Bax、Caspase-3凋亡蛋白检测;透射电镜下观察肠黏膜内部超微结构改变。结果:脓毒症组大鼠血清中TNF-α、IL-6质量浓度明显升高(与对照组比较,P<0.01;与乌司他丁组比较,P<0.05),而乌司他丁组较对照组高,但明显低于脓毒症组(P<0.05);苏木精-伊红染色可见脓毒症组肠黏膜水肿、充血,炎症细胞浸润,而乌司他丁组较脓毒症组明显减轻;凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达较乌司他丁组明显减少(P<0.05);通过透射电镜观察脓毒症组肠上皮及毛细血管基底膜肿胀、细胞间紧密连接明显开放增宽,中性粒细胞侵润,肠黏膜细胞绒毛倒伏及脱落、线粒体肿胀及空化,而乌司他丁组明显减轻。结论:乌司他丁改善脓毒症大鼠肠黏膜高炎症状态,减少促炎因子的释放,降低凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达,减少肠黏膜上皮细胞凋亡,对肠屏障有保护作用。
- 王立峰王磊陈俊杰李永宁康健
- 关键词：脓毒症肠黏膜屏障凋亡乌司他丁
- 课程思政在急诊住院医师规范化培训中的构建与探索
- 2023年
- 急诊医学是以急危重症救治为先导,在临床工作中占据着重要的位置。随着我国人口老龄化日益凸显,急症患者也随之增加,为快速推动急诊医学发展,建设一支高素质的急诊医学师资队伍势在必行。文章着重从急诊医学课程特点、开展思政课程的必要性、如何构建思政课程以及教学方法等多维度进行设计,将“思政元素”融入急诊医学课程之中,在课程中挖掘“思政元素”,发挥二者之间协同育人作用,全面落实高等医学院校立德树人的根本任务,提升住院医师规范化培训学员的家国情怀、科学精神和人文素养,为培养合格的急诊医学人才进行有益的探索与实践。
- 王磊王立峰蒯鑫李永宁
- 关键词：急诊医学住院医师规范化培训教学改革立德树人
- 乌司他丁对脓毒症大鼠肝脏保护作用及其抗肝细胞凋亡机制的研究被引量：3
- 2017年
- 目的探讨乌司他丁对脓毒症大鼠肝脏保护作用及其抗凋亡机制。方法 30只雄性大鼠分成假手术组、脓毒症组及乌司他丁组,每组各10只。以盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型,假手术组除不结扎和穿刺盲肠外,其余手术步骤相同。建模成功后15 min乌司他丁组大鼠尾静脉注射乌司他丁(200 000 U/kg),假手术组和脓毒症组注射等量生理盐水。分别于术后6、12、24 h尾静脉采血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。于术后24 h取大鼠肝组织通过苏木素-伊红(HE)染色检测组织病理变化。同时,采用免疫组化法检测Bax、Bcl-2和Caspase-3在肝组织内的表达情况。结果术后6、12、24 h乌司他丁组及脓毒症组大鼠IL-1β(F=5.723,P=0.018;F=12.969,P<0.001;F=4.956,P=0.027)、TNF-α(F=5.618,P=0.020;F=20.002,P<0.001;F=17.869,P<0.001)水平明显高于假手术组,且脓毒症组更高(P均<0.05)。HE染色发现脓毒症组大鼠肝细胞肿胀明显,汇管区可见炎症细胞浸润,而乌司他丁组大鼠肝细胞及肝小叶仅结构出现轻度破坏现象。同时,乌司他丁组及脓毒症组Bax[(17.6±2.2)、(30.2±4.2)、(1.5±0.8)]、Caspase-3蛋白[(10.54±1.44)、(22.60±1.86)、(0.86±0.24)]表达显著高于假手术组,抗凋亡蛋白Bcl-2[(21.6±1.6)、(10.2±1.5)、(42.4±2.9)]表达均低于假手术组,且脓毒症组Bax、Caspase-3表达更高,Bcl-2表达更低(P均<0.05)。结论乌司他丁具有抑制炎症因子释放与抗凋亡双重功效,对脓毒症大鼠的肝脏细胞具有保护作用。
- 李雪娇陈俊杰王磊王立峰康健李永宁
- 关键词：脓毒症乌司他丁肝细胞
- 姜黄素抑制NLRP3炎症小体减轻早期脓毒症大鼠心肌细胞损伤的机制研究被引量：6
- 2022年
- 目的探讨姜黄素对早期脓毒症大鼠心肌细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP3)炎性小体的作用及其机制。方法24只雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为3组:假手术组(Sham组,n=8)、脓毒症组(Sepsis组,n=8)、姜黄素干预组(Cur组,n=8)。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备大鼠脓毒症模型,造模后腹腔注射姜黄素100 mg/kg,24 h后重复给药,Sepsis组注射生理盐水。于6、24、48 h通过ELISA法检测大鼠血浆中心肌损伤特异性肌钙蛋白T(cTnT)水平;取48 h大鼠心肌组织经苏木精-伊红(HE)染色观察心肌病理损伤情况;通过TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;Western-blot法检测Cleaved caspase-1、NLRP3、IL-1β蛋白的表达情况;透射电镜下观察心肌细胞内部超微结构改变。结果Cur组6、24、48 h大鼠血浆cTnT水平明显低于Sepsis组,差异有统计学意义(P<0.05);HE染色可见Sepsis组心肌炎性细胞浸润,细胞水肿、坏死,而Cur组仅见部分细胞水肿和坏死现象;TUNEL染色可见Cur组心肌细胞凋亡(28.4±2.3)%低于Sepsis组(43.6±3.8)%,P<0.05;Western-blot检测Cur组Cleaved caspase-1、NLRP3、IL-1β蛋白表达低于Sepsis组,高于Sham组,P<0.05。透射电镜下Sham组细胞核膜完整、染色质分布均匀;Sepsis组细胞核染色质边集、体积固缩,线粒体嵴断裂、空化现象,肌小节部分断裂;Cur组细胞核染色质部分边集,线粒体轻度水肿扩张,形态基本完整。结论姜黄素抑制脓毒症大鼠NLRP3介导的急性心肌损伤,其机制可能与下调Cleaved caspase-1、IL-1β蛋白表达引起的细胞焦亡有关。
- 李青松陈俊杰李永宁王立峰
- 关键词：脓毒症急性心肌损伤姜黄素
- 姜黄素对心脏停搏/心肺复苏大鼠肠黏膜损伤的抑制作用被引量：2
- 2020年
- 目的·观察姜黄素对心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation,CPR)后大鼠肠缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的影响,并初步探讨其作用机制。方法·24只健康雄性SD大鼠随机分为4组,每组6只,即对照组(Sham组)、姜黄素组(Cur组)、CPR后肠I/R损伤组(I/R组)和姜黄素+CPR后肠I/R损伤组(Cur+I/R组)。4个组均行麻醉后气管插管,股动、静脉置管;I/R组和Cur+I/R组通过窒息法建立心脏停搏/CPR模型,Sham组和Cur组不进行该操作;Cur+I/R组于CPR开始前1 min腹腔注射姜黄素100 mg/kg,同一时间Cur组腹腔注射等量姜黄素,Sham组、I/R组注射同等体积二甲基亚砜。自主循环恢复后6、12、24 h静脉采血检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素6(interleukin-6,IL-6)的浓度;自主循环恢复后24 h处死大鼠,检测肠组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)浓度和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,苏木精-伊红染色观察肠组织病理学变化,TUNEL法检测肠黏膜上皮细胞凋亡情况,Western blotting法检测肠组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达情况,透射电子显微镜下观察肠组织超微结构改变。结果·Cur+I/R组3个时间点的TNF-α、IL-6的浓度均低于I/R组(均P<0.05),高于Sham组(均P<0.05)。Cur+I/R组的MDA含量低于I/R组(P<0.01),高于Sham组(P<0.01);Cur+I/R组的SOD活力和GSH浓度高于I/R组(均P<0.05),低于Sham组(均P<0.01)。Cur+I/R组的HIF-1α蛋白表达水平显著高于I/R组(P<0.01),低于Sham组(P<0.01);而Cur+I/R组caspase-3蛋白表达水平显著低于I/R组(P<0.01),高于Sham组(P<0.01)。病理学观察发现,I/R组可见回肠黏膜水肿,炎症细胞浸润,绒毛顶端上皮脱落、粘连,固有层裸露、破溃,而Cur+I/R组肠黏膜损伤较I/R组明显减轻。TUNEL法检测显示,Cur+I/R组凋亡指数较I/R组显著降低(P<0.01),但较Sham组升高(P<0.01)。电子�
- 王立峰陈俊杰李永宁王玲王磊李雪娇
- 关键词：心肺复苏姜黄素肠黏膜
- 乌司他丁对脓毒症大鼠肺损伤抑炎及抗凋亡信号机制的研究被引量：5
- 2018年
- 目的 探讨乌司他丁（UTI）对脓毒症（sepsis）大鼠肺脏保护作用及其抗凋亡机制的研究。方法 SD雄性大鼠随机分三组：Sham组（n=10）仅行开关腹手术，Sepsis组（n=10）和UTI组（n=10）行盲肠结扎穿孔术（CLP），UTI组建模前1 h大鼠尾静脉注射乌司他丁20万U/kg，24 h后重复给药，Sepsis组注射等量生理盐水。于6、12、24、36、48 h尾静脉采血测定TNF-α、IL-6、IL-10浓度，48 h留取肺脏标本行苏木素-伊红（HE）染色和免疫组化检测Bax/Bcl-2、TUNEL表达及Western-blot检测，caspase-3蛋白表达，透射电镜下观察肺组织超微结构变化。结果 UTI组炎症因子TNF-α、IL-6表达高于Sham组而低于Sepsis组（P〈0.05），UTI组抑炎因子IL-10高于Sepsis组而低于Sham组（P〈0.05）。HE染色Sepsis组肺泡水肿、充血，炎细胞侵润，而UTI组较Sepsis组明显减轻；在Sepsis组凋亡蛋白Bax表达高于UTI组，而抗凋亡蛋白Bcl-2表达低于UTI组；TUNEL检测肺泡上皮细胞凋亡率UTI组明显低于Sepsis组（P〈0.05）；透射电镜观察，Sepsis组肺泡壁及毛细血管基底膜肿胀、肺泡腔变小，腔内大量炎性渗出、肺泡Ⅱ型上皮细胞内线粒体空化等，而UTI组明显减轻；通过Western-blot检测，caspase-3蛋白在UTI组表达高于Sham组而低于Sepsis组（P〈0.05）。结论 乌司他丁抑制脓毒症大鼠血清中促炎介质的释放，抗血管内皮细胞及肺泡上皮细胞凋亡，降低caspase-3蛋白表达，对脓毒症大鼠急性肺损伤（ALI）起到保护作用。
- 李永宁王磊陈俊杰李雪娇王立峰康健
- 关键词：乌司他丁脓毒症凋亡
- 乌司他丁抑制脓毒症大鼠肾脏细胞凋亡Caspase信号机制研究被引量：1
- 2017年
- 目的:讨论乌司他丁对脓毒症大鼠肾脏细胞凋亡机制研究。方法:健康30只雄性SD大鼠随机分成3组:正常组(Sham组,10只)、脓毒症组(Sepsis组,10只)、乌司他丁组(UTI组,10只)。Sham组仅行开腹、关腹手术,Sepsis组和UTI组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制作脓毒症大鼠模型,建模成功后15min在UTI组大鼠尾静脉注射乌司他丁(20万U/kg),12h后重复给药,Sham组与Sepsis组则在相同的时间点注射等量的生理盐水。于6、12、24、36、48h尾静脉采血应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的质量浓度,留取肾脏标本行苏木精-伊红染色观察组织病理变化;通过免疫组织化学法检测凋亡蛋白Bax和Caspase-3在肾组织内表达情况。结果:在Sepsis组中炎性因子TNF-α和IL-6均在12h达到峰值,相对于UTI组TNF-α和IL-6差异明显。在UTI组6、12、24、36、48h炎性因子IL-6和TNF-α表达均明显低于Sepsis组(P<0.05)。在苏木精-伊红染色中发现UTI组较Sepsis组肾脏细胞肿胀及出血明显减轻、炎性细胞浸润减少;免疫组织化学检测发现UTI组中Bax蛋白表达明显低于Sepsis组,UTI组中Caspase-3蛋白表达明显低于Sepsis组(P<0.05)。结论:乌司他丁抑制脓毒症大鼠炎症反应同时抑制肾脏以线粒体途径的Caspase通路细胞凋亡,对肾脏有一定保护作用。
- 王磊王立峰康健张彧李永宁
- 关键词：乌司他丁脓毒症肾细胞
