刘凯
- 作品数：5 被引量：22H指数：2
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：新世纪广东省高等教育教学改革工程项目国家自然科学基金更多>>
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- 人脐带间充质干细胞的异质性探讨及基于单细胞RNA测序结果的亚群分析
- 2024年
- 目的探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的异质性,并基于单细胞RNA测序结果进行亚群分析。方法选择两株由郑州奥博细胞医学实验室有限公司提供的hUCMSCs(分别命名为hUCMSCs-1和hUCMSCs-2),通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)进行干性基因[性别决定区Y-box 2(Sox2)、Nanog]检测。对hUCMSCs进行成骨诱导,3 d后检测成骨基因碱性磷酸酶(Alp)的表达,7 d后进行碱性磷酸酶染色,14 d后进行茜素红染色。对两株hUCMSCs进行成软骨诱导,21 d后检测成软骨基因二型胶原(COL2A1)的表达。用10 ng/mL白细胞介素-1β(IL-1β)刺激大鼠软骨细胞24 h,与hUCMSCs-1和hUCMSCs-2共培养后,检测软骨细胞合成代谢基因蛋白聚糖(ACAN)和分解代谢基因基质金属蛋白酶3(MMP3)的表达。对hUCMSCs-1进行单细胞RNA测序,并根据功能进行亚群分组,通过生物信息学分析方法描绘各个亚群标志基因热图、富集的信号通路。结果两株hUCMSCs的Sox2、Nanog、Alp、COL2A1表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。在成骨诱导7 d后,hUCMSCs-1的碱性磷酸酶染色程度深于hUCMSCs-2。在成骨诱导14 d后,茜素红染色结果显示,hUCMSCs-1钙结节数量多于hUCMSCs-2。经IL-1β干预后,软骨细胞与两株hUCMSCs共培养后的MMP3表达水平差异有统计学意义(P<0.05),但ACAN表达水平差异不显著(P>0.05)。基于单细胞RNA测序结果,hUCMSCs-1可分为C1、C2、C3三个功能亚群。C1亚群的信号通路在细胞外基质受体相互作用上富集,与软骨细胞合成代谢相关;C2亚群信号通路在细胞衰老和凋亡上富集,与细胞的自我更新相关;C3亚群信号通路在DNA复制和减数分裂上富集,与细胞周期相关。结论不同个体来源的hUCMSCs存在异质性,其在成骨、成软骨和抗分解代谢能力方面可能存在差异。通过单细胞RNA测序可较好地根据hUCMSCs的功能特性对其进行分群,有助于提高间充质干细胞治疗的临床疗效。
- 刘凯祁雨心毕艺飞张秉君戴黎鸣张晓玲
- 关键词：人脐带间充质干细胞功能亚群
- miRNA调控内皮祖细胞Wnt信号通路参与牵张成骨血管发生机制的初步研究
- 目的:牵张成骨具有骨折愈合不可比拟的成骨速率,但至今其成骨机制尚未明了。课题组在前期研究中发现内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)表面标记物CD133在牵张成骨新骨区域具有较高...
- 刘凯
- 关键词：牵张成骨血管发生MIRNA内皮祖细胞WNT信号通路
- 文献传递
- 浅析^(99m)Tc-DTPA肾动态显像联合CT尿路造影评价重度肾积水患肾功能的临床价值被引量：19
- 2017年
- 目的:探讨^(99m)Tc-DTPA肾动态显像(ECT)联合CT尿路造影(CTU)评价重度肾积水患肾功能的临床价值。方法:选取2013年5月至2015年5月广西医科大学附属民族医院收治的因肾结石导致重度肾积水患者54例(共70个肾),行ECT检查评价患肾的功能,获取血流灌注和功能显像图像,测定患肾的肾小球滤过率(GFR),并与CTU结果进行比较,分析两种方法评价患肾残余功能的差异。结果:CTU显示:70个重度积水的患肾中,有功能患肾45个,无功能患肾25个(CTU始终不显影);全部病例的结石位置、大小及肾积水程度均能较好的显示。ECT显示:0级患肾2个,1级受损16个,2级受损13个,3级受损34个,4级(无功能)5个;ECT对结石无法显示。结论:ECT结果显示有残余功能患肾较CTU更为灵敏,且能定量分析肾小球滤过功能,CTU对结石的显示明显优于ECT,两种检查方法相结合对患肾功能损害程度提供更客观的临床依据。
- 黄迪开覃荣誉蒙福卿刘凯赵梅新黄爱园李党生李宁廖光星
- 关键词：肾积水肾动态显像CTU
- 间充质干细胞治疗骨关节炎的微环境调控作用及机制被引量：1
- 2023年
- 骨关节炎是一种常见的致残性疾病,目前药物治疗只能暂时控制炎症和减轻疼痛,但不能防止骨关节炎中的软骨破坏。间充质干细胞在治疗骨关节炎方面具有巨大潜力。间充质干细胞及其分泌的外泌体可通过调控骨关节炎微环境及(或)参与软骨再生修复防治骨关节炎,但其中的机制尚有许多未明之处,且间充质干细胞的异质性及其细胞亚群的特性、功能也是间充质干细胞作为治疗药物亟需解答的关键科学问题。本文将对间充质干细胞治疗骨关节炎的微环境调控作用研究进展作一综述,提出间充质干细胞治疗骨关节炎中尚存在的科学问题及研究策略。
- 刘凯肖政昊张晓玲
- 关键词：骨关节炎间充质干细胞微环境
- 高浓度地塞米松对骨髓间充质干细胞小分子非编码RNA表达的调控机制研究
- 2022年
- 目的探讨高浓度地塞米松对骨髓间充质干细胞(BMSCs)小分子非编码RNA(sncRNA)表达的调控机制。方法体外分离并培养小鼠BMSCs,阴性对照组(NC组)与地塞米松组(DEX组)分别使用含0.1μmol/L、10μmol/L地塞米松的诱导液进行诱导。通过茜素红染色分析BMSCs的成骨分化情况。运用Illumina Hiseq 2500平台进行高通量small RNA测序,筛选NC组与DEX组差异表达的sncRNAs,并进行生物信息学分析。结果茜素红染色结果显示,与NC组相比,DEX组茜素红染色变浅,半定量检测结果显示DEX组钙结节含量显著降低。DEX组与NC组的差异基因中,|log2Fold Change|≥1的微小RNA(miRNA)有25个,其中DEX组的6个miRNAs表达上调,19个miRNAs表达下调(均P<0.05)。基因本体论(GO)分析结果显示,上调的差异miRNAs的靶基因主要参与蛋白质磷酸化、肌肉和器官发育、细胞黏附等生物过程,下调的差异miRNAs的靶基因主要参与蛋白质自磷酸化、蛋白质泛素化、细胞内雌激素受体信号通路、细胞增殖等生物过程。京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析显示,上调的差异miRNAs主要富集在脂肪合成相关信号通路、Ras信号通路、钙信号通路等,下调的差异miRNAs主要富集在Wnt信号通路、Hippo信号通路等。DEX组与NC组的差异基因中,|log2Fold Change|≥1的PIWI相互作用RNA(piRNA)有3个,其中DEX组的1个piRNA表达上调,2个piRNAs表达下调;|log2Fold Change|≥1的重复相关小于扰RNA(rasiRNA)有2个,两者在DEX组中的表达均上调;|log2Fold Change|≥1的核仁小(snoRNA)有8个,其中DEX组有6个snoRNAs表达上调,2个snoRNAs表达下调;|log2Fold Change|≥1的核小RNA(snRNA)仅有1个,该基因在DEX组中表达下调(均P<0.05)。结论高通量small RNA测序技术能够有效检测到经高浓度地塞米松处理后小鼠BMSCs中差异表达的sncRNAs,且信号通路分析提示差异表达的miRNAs可能参与脂肪代谢和成骨代谢等多个生物学过程。
- 周兴刘凯彭建平彭建平张晓玲
- 关键词：地塞米松骨髓间充质干细胞成骨分化
