任乐乐
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：山西医科大学更多>>
- 发文基金：山西省回国留学人员科研经费资助项目国家自然科学基金山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠未羧化骨钙素融合蛋白的表达纯化及活性鉴定被引量：2
- 2017年
- 目的研究表达和纯化大鼠未羧化骨钙素融合蛋白并鉴定其活性。方法将大鼠的骨钙素(BGLAP)基因克隆到p Sumo-Mut表达载体中,构建小泛素相关修饰物-骨钙素质粒(p Sumo-BGLAP)并进行质粒酶切及测序鉴定。质粒在大肠杆菌的表达系统中转化后,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),11℃低温诱导方法,表达出小泛素相关修饰物-骨钙素(Sumo-BGLAP)融合蛋白。融合蛋白通过Ni亲和纯化方法被纯化,通过胰岛素分泌实验被鉴定生物活性。结果质粒的酶切及测序结果显示与目的基因的序列和蛋白分子量吻合,表明质粒p Sumo-BGLAP构建成功。经转化、诱导和纯化后较高纯度的Sumo-BGLAP融合蛋白被获得。胰岛素分泌实验结果显示,16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖下,胰岛素分泌为(37.64±3.80)μU·L^(-1),16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.03 ng·m L^(-1)Sumo-BGLAP融合蛋白作用时,胰岛素分泌为(63.91±4.67)μU·L^(-1),16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.3 ng·m L^(-1)Sumo-BGLAP融合蛋白作用时,胰岛素分泌为(68.47±5.83)μU·L^(-1)(均P<0.01)。结论大鼠未羧化骨钙素的融合蛋白被成功表达和纯化,并且有生物活性,能用于进一步研究其对葡萄糖代谢的调节作用。
- 高璟英任乐乐丁亚琴钟向琴白涛刘云峰章毅
- 关键词：骨钙素原核表达胰岛素分泌
- 多巴胺对大鼠胰岛素分泌的影响及机制研究被引量：1
- 2017年
- 目的研究多巴胺(dopamine,DA)对大鼠胰岛素分泌的影响及可能机制。方法♂SD大鼠的胰腺经过胶原酶P消化、Histopaque 1077梯度离心后得到纯化的胰岛,DispaseⅡ将胰岛消化为单个细胞。应用胰岛素分泌实验来验证DA对胰岛素分泌的作用,通过膜片钳技术和钙成像技术记录β细胞内向性钙电流、动作电位时程和细胞内Ca^(2+)浓度,研究DA对大鼠胰岛素分泌的作用机制。结果在2.8 mmol·L^(-1)的葡萄糖中,DA对胰岛素的分泌没有产生明显的影响;在16.7 mmol·L^(-1)的葡萄糖中,DA呈浓度依赖性抑制胰岛素的分泌。DA干预后,抑制了胰岛β细胞上内向性钙电流,缩短动作电位时程,减少了细胞内Ca^(2+)浓度。结论 DA通过抑制β细胞上内向性钙电流,进而缩短了动作电位的时程,降低细胞内Ca^(2+)浓度,最终抑制胰岛素的分泌。
- 钟向琴丁亚琴任乐乐白涛刘萌萌刘云峰章毅
- 关键词：多巴胺胰岛Β细胞胰岛素分泌动作电位
- 京尼平苷调控大鼠胰岛素分泌的机制研究
- 2017年
- 目的探讨京尼平苷在大鼠胰岛素分泌中的作用及其机制,为糖尿病的治疗提供依据。方法将胶原酶P经胆总管注入雄性Wistar大鼠的胰腺,消化11 min,histopaque 1077梯度离心得到分离纯化的胰岛。用放射免疫分析法检测胰岛素分泌功能,采用ELISA方法检测环鳞酸腺苷(cAMP)含量,通过膜片钳技术记录电压依赖性钾通道(Kv)电流和Ca^(2+)电流。结果在8.3 mmol/L的葡萄糖下,京尼平苷可促进胰岛素分泌,给予exendin(9-39)、SQ22536和H89,可明显减弱京尼平苷的胰岛素分泌量以及环磷酸腺苷的含量,且在电压依赖性钾电流中也有相同的抑制作用。此外,京尼平苷调控胰岛素分泌作用还受到钙电流的影响。结论京尼平苷通过、c AMP信号通路及其下游受体PKA来发挥调控胰岛素分泌的作用。
- 刘云峰丁亚琴钟向琴任乐乐白涛刘萌萌章毅
- 关键词：京尼平苷胰岛素分泌胰高血糖素样肽-1环磷酸腺苷电压依赖性钾通道
- 电压依赖性钾通道在京尼平苷调控大鼠胰岛素分泌中的作用
- 2016年
- 目的研究电压依赖性钾（Kv）通道在京尼平苷调控大鼠胰岛素分泌机制中的作用。方法采用放免法检测大鼠胰岛组织的胰岛素分泌情况,膜片钳技术记录胰岛β细胞Kv电流和动作电位时程（APD）。结果在8.3 mmol/L葡萄糖条件下,京尼平苷（0-100μmol/L）可剂量依赖性地增加胰岛素分泌含量,在10μmol/L时基本达最大促分泌效应,低糖（2.8 mmol/L）情况下则没有作用。膜片钳实验数据表明,京尼平苷剂量依赖性地（0-100μmol/L）降低Kv通道电流密度,并在10μmol/L的浓度下发挥最大抑制作用,并明显延长了动作电位时程。结论京尼平苷在胰岛β细胞中通过抑制Kv、延长APD发挥促胰岛素分泌作用。
- 刘云峰丁亚琴钟向琴任乐乐白涛刘萌萌章毅
- 关键词：京尼平苷胰岛素分泌电压依赖性钾通道动作电位
- 京尼平苷对INS-1细胞增殖与凋亡的影响
- 2018年
- 目的观察京尼平苷对大鼠胰岛β细胞系(INS-1)增殖及凋亡的影响。方法用CCK-8法测定细胞增殖,用毒胡萝卜素处理细胞后,用流式细胞仪测定细胞凋亡率,并用CCK-8法测定细胞活力。结果京尼平苷同胰高血糖素样肽1(GLP-1)一样能促进INS-1的增殖,并有浓度依赖性;京尼平苷同GLP-1一样能抑制毒胡萝卜素处理后的细胞凋亡,并有浓度依赖性;同时京尼平苷能抑制毒胡萝卜素对细胞的毒性作用。结论京尼平苷能促进INS-1细胞增殖,抑制INS-1细胞凋亡。
- 白涛任乐乐任乐乐刘萌萌高璟英任毅刘云峰章毅
- 关键词：京尼平苷胰高血糖素样肽1毒胡萝卜素
