- LPS诱导小鼠中性粒细胞mGluR5的表达及mGluR5在炎症中的作用被引量：1
- 2018年
- 目的探讨脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）诱导小鼠中性粒细胞代谢型谷氨酸受体5（metabotropic glutamate receptor 5，mGluR5）表达的机制及其在炎症中发挥的作用。方法以原代培养mGluR5全身敲除和野生型C57BL／6J小鼠中性粒细胞为研究对象，采用ELISA及realtime-PCR检测mGluR5激动剂和拮抗剂对LPS诱导的炎症反应的影响。Western blot检测LPS处理后原代小鼠中性粒细胞mGluR5蛋白及其相应下游分子表达变化情况，并用特异性拮抗剂观察能否阻断LPS诱导的生物学效应。结果特异性mGluR5的激动剂CHPG明显促进了LPS诱导的炎症反应，并且可以被mGluR5拮抗剂MPEP抑制，mGluR5基因敲除的中性粒细胞与野生型相比炎症因子水平也明显降低（P〈0．01）；LPS处理后的中性粒细胞mGluR5的表达明显上调，且伴随着ERK、AKT及P65的磷酸化水平明显升高（P〈0．05）；用特异性AKT抑制剂（LY294002）及P65抑制剂（JSH23）可以显著抑制LPS诱导mGluR5的表达及炎症反应（P〈0．05）。结论LPS可通过AKT及P65通路诱导中性粒细胞mGluR5的表达，mGluR5的激活可以进一步促进炎症反应。拮抗mGluR5可以显著抑制LPS诱导的炎症反应。
- 杨亭刘阳珷玥赵力杨腾戴双双何凤田
- 关键词：代谢型谷氨酸受体5脂多糖中性粒细胞炎症因子
- miR-134通过下调叉头盒蛋白M1抑制肝细胞癌细胞增殖
- 2017年
- 目的探讨miR-134下调叉头盒蛋白M1(forkhead box M1,FOXM1)的机制及其影响肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖的作用。方法应用CCK-8法检测miR-134对HCC细胞增殖的作用;经Western blot和Real-time PCR检测人正常肝细胞L02和5种HCC细胞系中FOXM1和miR-134的表达;用miR-134模拟物(miR-134 mimic)或miR-134抑制剂(miR-134 inhibitor)转染HCC细胞后,经Western blot和Real-time PCR检测FOXM1及其下游靶基因Cyclin D1的表达;应用生物信息学分析miR-134在人FOXM1 3'-UTR的可能结合位点,通过报告基因检测实验分析miR-134与FOXM1的3'-UTR的特异性结合;将miR-134 mimic和FOXM1表达质粒(无3'-UTR)共转染于HCC细胞后,经CCK-8法检测细胞的增殖情况。结果 miR-134可显著抑制HCC细胞增殖(P<0.05);与人正常肝细胞L02相比,miR-134在HCC细胞中的表达明显降低(P<0.05),而FOXM1蛋白表达明显增强,二者存在负相关(R2=0.705,P<0.05);miR-134可显著下调FOXM1蛋白及其下游靶基因Cyclin D1的表达(P<0.05);报告基因检测实验证实miR-134可特异性结合于FOXM1 mRNA的3'-UTR(P<0.01);细胞增殖实验检测结果显示,过表达缺失3'-UTR的FOXM1可显著减弱miR-134对HCC细胞增殖的抑制效应(P<0.05)。结论 miR-134通过靶向结合于FOXM1的3'-UTR而下调FOXM1蛋白的表达,从而抑制HCC细胞的增殖。
- 姜珊熊浩君何家琳李波杨帆杨腾张艳何凤田
- 关键词：癌细胞增殖肝细胞癌CYCLIND1CARCINOMA人正常肝细胞
