胡春兰
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：上海海洋大学水产与生命学院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 自噬在细胞冷应激中的作用研究被引量：5
- 2016年
- 有研究证明,自噬在生物应对多种不良环境过程中发挥着重要作用,但是自噬在细胞应对低温环境过程中的功能研究却甚少。该研究给予He La细胞（人子宫颈癌细胞）不同程度的急性冷刺激,探讨此过程中自噬的发生和功能。将He La细胞培养于37°C（对照组）或经不同程度的低温（10、18、28°C）处理,观察对照组与低温处理组细胞表达自噬标志物EGFP-LC3（enhanced green fluorescent protein-microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3）的变化,以监测自噬小体形成。结果显示,低温处理诱导He La细胞发生不同程度的自噬现象：10°C处理3~6 h的细胞内的自噬小体增多且体积增大,18°C处理的细胞内的自噬小体在3 d时最明显,28°C处理的细胞始终维持在较低水平。研究还发现,He La细胞在自噬减弱消失的同时发生细胞死亡,自噬特异性的化学抑制剂Bafilomycin A1处理可以进一步降低不同程度的低温胁迫下He La细胞的存活率,表明自噬在细胞低温应激过程中发挥着保护作用。Bafilomycin A1处理伴随有细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平增高,提示低温胁迫下自噬可能通过调控细胞内ROS水平来保护细胞。该研究结果表明,自噬在真核细胞冷应激中具有重要作用。
- 胡春兰陈良标胡成枫韩兵社
- 关键词：自噬冷应激活性氧HELA细胞
- 寒冷刺激下鱼类细胞驯化适应机制研究
- 在常年寒冷的环境下,南极鱼类逐步适应并形成了一系列抗寒抗冻的机制。为了研究南极鱼的抗寒抗冻机制,我们将斑马鱼胚胎成纤维样细胞(ZF4细胞)于28℃野生型(对照组)或18℃培养驯化。两种细胞传代15代以上后放入10℃进行处...
- 胡春兰韩兵社胡成枫陈良标
- 关键词：低温驯化线粒体
- 文献传递
- dusp1敲降对低温诱导斑马鱼ZF4细胞凋亡的作用被引量：4
- 2017年
- 为了研究双特异性磷酸酶(dual-specificity phosphatase 1,dusp1)基因与鱼类低温诱导的细胞凋亡之间的关系,本研究经Eco RI和Age1酶切构建plko.1-dusp1-sh RNA1,plko.1-dusp1-shRNA2,plko.1-negative control(nc),plko.1-EGFP的重组质粒,并分别与慢病毒包装质粒pCMV-DR8.9.1、pCMV-VSVG共同转染至293T细胞中,经293T细胞包装的病毒,感染斑马鱼(Danio rerio)胚胎成纤维样细胞(zebrafish embryos fibroblast like cell line,ZF4),RT-PCR检测表明dusp1成功被敲降。经嘌呤霉素筛选获得稳定表达细胞系,将细胞于28℃培养(正常对照组)或经10℃低温处理10 d,使用annexin V-FITC/Propidium lodide(PI)双色标记流式细胞术检测ZF4细胞凋亡情况。结果显示:低温胁迫下dusp1敲降的细胞凋亡(dusp1-shRNA1敲降,dusp1-kd1;dusp1-shRNA2敲降,dusp1-kd2)比例较nc组显著上调,其中早期凋亡和晚期凋亡细胞比例dusp1-kd1显著高于nc组,并且dusp1-kd1活细胞数显著低于nc组(P<0.05),进一步证明dusp1参与鱼类冷应激过程,并在低温情况下保护细胞。该研究为后期对斑马鱼细胞低温胁迫实验奠定了基础,其中dusp1基因沉默型斑马鱼细胞在10℃低温处理10 d凋亡数显著大于对照组,证明dusp1在细胞凋亡信号通路中起到重要调控作用,为低温下研究斑马鱼基因的分子机制提供新的思路。
- 牛虹博胡鹏程鹏丽储旭胡春兰陈良标
- 关键词：慢病毒SHRNA低温胁迫
- 自噬在斑马鱼细胞冷应激过程中的作用机制探究
- 自噬(Autophagy)是指吞噬细胞内蛋白或细胞器并进行降解的过程。当生物应对不良环境时,可以通过分解细胞内一些非重要的蛋白及细胞器来维持细胞的存活。本研究通过在细胞中过表达自噬特异性标志物GFP-LC3(微管相关蛋白...
- 胡成枫胡春兰陈良标
- 关键词：自噬ROS
- 文献传递
- 自噬在鱼类细胞寒冷适应过程中的功能研究
- 研究证明,自噬在生物应对环境压力方面发挥着重要作用,但是自噬在鱼类抗寒抗冻方面的研究却甚少。本研究给予ZF4(斑马鱼胚胎成纤维样细胞)不同程度的低温处理(10℃、18℃),观察对照组与低温处理组细胞表达自噬标志物EGFP...
- 胡春兰陈良标胡成枫韩兵社
- 关键词：自噬冷应激
- 文献传递
