胡鹏
- 作品数：13 被引量：23H指数：3
- 供职机构：上海海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 低温胁迫对鱼类PI3K/AKT/GSK-3β信号通路的影响被引量：9
- 2016年
- 为探讨PI3K/AKT/GSK-3β信号通路在鱼类低温胁迫中的分子机制,利用3种抗寒能力不同的鱼类:斑马鱼(Danio rerio)、罗非鱼(Oreochromis niloticus)和草鱼(Ctenopharyngodon idellus),对其进行低温胁迫(8℃),监测这3种鱼鱼鳃中PI3K/AKT/GSK-3β信号通路中蛋白表达情况。结果表明:1)在相同低温胁迫下,3种鱼运动能力为:草鱼>斑马鱼>罗非鱼;2)Western blot结果表明:在罗非鱼中,低温抑制了p-PTEN蛋白的表达;诱导了AKT、p-AKT(Ser 473)和p-GSK-3β(Ser 9)蛋白的表达。在斑马鱼和草鱼中,低温都抑制了AKT和p-AKT(Ser473)蛋白的表达;诱导了p-GSK-3β(Ser 9)蛋白的表达。尽管低温一致性诱导p-GSK-3β(Ser 9)在3种鱼中的表达,但其呈现不同的变化倍数:罗非鱼中p-GSK-3β蛋白的上升倍数显著高于其他两种鱼。低温诱导了PI3K/AKT/GSK-3β信号通路,在不同低温耐受能力的鱼中呈现出不同的表达模式,这些物种特异性的表达模式可能会影响鱼类低温下不同的耐受能力。
- 王金凤胡鹏牛虹博陈良标
- 关键词：低温胁迫AKTGSK-3Β信号通路
- dusp1敲降对低温诱导斑马鱼ZF4细胞凋亡的作用被引量：4
- 2017年
- 为了研究双特异性磷酸酶(dual-specificity phosphatase 1,dusp1)基因与鱼类低温诱导的细胞凋亡之间的关系,本研究经Eco RI和Age1酶切构建plko.1-dusp1-sh RNA1,plko.1-dusp1-shRNA2,plko.1-negative control(nc),plko.1-EGFP的重组质粒,并分别与慢病毒包装质粒pCMV-DR8.9.1、pCMV-VSVG共同转染至293T细胞中,经293T细胞包装的病毒,感染斑马鱼(Danio rerio)胚胎成纤维样细胞(zebrafish embryos fibroblast like cell line,ZF4),RT-PCR检测表明dusp1成功被敲降。经嘌呤霉素筛选获得稳定表达细胞系,将细胞于28℃培养(正常对照组)或经10℃低温处理10 d,使用annexin V-FITC/Propidium lodide(PI)双色标记流式细胞术检测ZF4细胞凋亡情况。结果显示:低温胁迫下dusp1敲降的细胞凋亡(dusp1-shRNA1敲降,dusp1-kd1;dusp1-shRNA2敲降,dusp1-kd2)比例较nc组显著上调,其中早期凋亡和晚期凋亡细胞比例dusp1-kd1显著高于nc组,并且dusp1-kd1活细胞数显著低于nc组(P<0.05),进一步证明dusp1参与鱼类冷应激过程,并在低温情况下保护细胞。该研究为后期对斑马鱼细胞低温胁迫实验奠定了基础,其中dusp1基因沉默型斑马鱼细胞在10℃低温处理10 d凋亡数显著大于对照组,证明dusp1在细胞凋亡信号通路中起到重要调控作用,为低温下研究斑马鱼基因的分子机制提供新的思路。
- 牛虹博胡鹏程鹏丽储旭胡春兰陈良标
- 关键词：慢病毒SHRNA低温胁迫
- 一种快速分离鱼类脑组织单细胞核的方法
- 本发明属于生物技术应用领域，具体公开了一种快速分离鱼类脑组织单细胞核的方法。该方法通过蔗糖密度离心和低浓度BSA洗涤，能够分离出数量较多、形态完整、背景杂质较少的高质量单细胞核，且制样简单、实验高效、具有稳定的提核效率和...
- 胡鹏黄松钱焦荷徐元吴智超
- Asb15b基因和Asb14a基因的应用及减少鱼类肌间骨的方法
- 本发明属于基因工程技术领域，利用CRISPR/Cas9技术分别敲除了Asb15b、Asb14a基因，结果显示Asb15b基因或Asb14a基因敲除的斑马鱼较野生WT斑马鱼肌间骨减少约40％和约35％，证明Asb15b基因...
- 陈良标王化敏牛明慧胡瑞芹胡鹏吴智超
- 斑马鱼ciarta基因启动子低温诱导核心区域的鉴定
- 2016年
- 之前研究表明在低温胁迫下斑马鱼多个组织中,circadian associated repressor of transcription a(ciarta,也称为c1orf51)基因被广泛诱导表达。为了鉴定ciarta启动子中受低温响应的最敏调控区域,克隆5个不同长度的截短片段(-1 992^+100 bp,-1 354^+100 bp,-881^+100 bp,-634^+100 bp和-247^+100 bp),插入到荧光素酶报告载体p GL4.10中,随后将载体转染到斑马鱼来源的ZF4细胞中,研究这5个截短片段低温诱导基因表达的能力。结果表明,低温条件下,5个截短片段都能显著诱导下游基因的表达,其中-881^+100 bp截短片段表现出最高的启动子活性(达5.61±0.53倍)。通过对启动子中转录因子结合位点的预测结果进行分析发现,与-634^+100 bp截短片段相比,-881^+100 bp截短片段含有一个已知的低温调控元件(BCL6的结合位点),进一步证实BCL6的结合位点具有低温诱导基因表达的能力。实验鉴定出的ciarta启动子低温诱导核心区域可以作为一个工具来诱导基因在低温下的表达,为相关研究提供帮助。
- 张东胡鹏陈良标
- 关键词：斑马鱼启动子BCL6基因表达
- 一种适用于鱼类不同组织单细胞悬液制备的方法
- 本发明属于生物技术运用领域，具体公开了一种适用于鱼类不同组织单细胞悬液制备的方法。该方法基于胶原酶II和胶原酶IV组合酶解，通过目标组织取样、解离消化、清洗重悬步骤制得单细胞悬液，并针对脂肪含量高或者组织结构较为致密的情...
- 胡鹏黄松钱徐元焦荷吴智超
- 裂腹鱼类转录组比较分析揭示青藏高原鱼类的适应性进化
- 裂腹鱼是一类分布在青藏高原的鲤科鱼类,为了研究裂腹鱼类对青藏高原的适应性进化,我们对两个高海拔和两个亚高海拔的裂腹鱼多个组织进行了转录组测序,并通过和两种平原鲤科鱼类比较分析鲤科鱼类的基因进化模式。进化树重建和分歧时间估...
- 俞梦超张东升胡鹏陈良标
- 关键词：适应性进化造血作用裂腹鱼
- 文献传递
- 一种适用于鱼类组织和细胞的染色质可及性分析方法
- 本发明属于生物技术应用领域，具体公开了一种适用于鱼类组织和细胞的染色质可及性分析方法。本发明适用于鱼类组织和细胞的染色质可及性分析方法，通过取样、研磨匀浆、密度梯度离心、确定核层步骤进行单细胞核的提取，提取的细胞核经过转...
- 胡鹏李新闻占思瑶黄松钱吴智超张钧睿
- 低温调节鱼类发育的几个例子及其分子机制研究
- 陈良标许强华胡鹏李文豪
- Asb14a 基因在斑马鱼肌间骨发育中的作用
- 2024年
- 为进一步研究肌间骨(intermuscular bone)发育的分子机制,利用CRISPR/Cas9打靶技术、茜素红染色及实时荧光定量PCR方法,研究了斑马鱼(Danio rerio)Asb14a基因敲除后肌间骨的发育情况。结果表明:本研究中成功构建了插入2 bp和缺失50 bp的Asb14a基因敲除纯合斑马鱼品系;茜素红染色显示,成年Asb14a^(-/-)突变体与野生斑马鱼相比,肌间骨数量显著减少了35%(P<0.0001),说明敲除Asb14a基因会减少斑马鱼肌间骨的数量;实时荧光定量PCR结果显示,骨骼发育相关基因(bmp6、sp7、sox6、alpl、collala、sox6和smad1)在Asb14a^(-/-)突变体中的表达水平发生了显著性变化,从分子角度验证了Asb14a基因与肌间骨发育间的关联性。研究表明,Asb14a基因参与了斑马鱼肌间骨发育,敲除该基因会影响斑马鱼肌间骨的生成,这一发现为进一步研究肌间骨发育的分子机制提供了重要线索。
- 牛明慧王化敏胡瑞芹胡鹏胡鹏陈良标
- 关键词：斑马鱼
