万松
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金吴阶平医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HBV临床分离株复制型质粒的构建与鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的克隆HBV临床分离株全长基因组,构建真核表达复制载体,为研究HBV的耐药机制提供基础。方法从乙型肝炎患者血清中提取HBV DNA,PCR扩增HBV全长基因组,经SapI酶切后,克隆入pHY106载体,测序分析序列,然后用lipofectamine 2000将重组载体转染Huh7细胞,3 d后收集培养上清液,ELISA检测HBsAg、HBeAg水平;Real-time PCR检测细胞培养上清液中HBV含量;Southern印迹检测细胞内HBV复制中间体。结果获得5株HBV临床分离株均为野生型,其中基因B型3株,基因C型2株。成功构建5株HBV临床分离株的复制型质粒,在转染Huh7细胞的上清液中检测到HBsAg、HBeAg及HBV DNA,细胞内检测到HBV复制中间体。结论成功克隆并构建了HBV临床分离株复制型质粒,这种复制型质粒将在HBV临床分离株的耐药机制和药物敏感性等方面研究中发挥重要作用。
- 李瑞明杨燕刘莉万松贺昱霖孟忠吉
- 关键词：乙型肝炎病毒临床分离株重组体
- HLA-A* 0201限制性GPC3表位肽的初步预测与筛选被引量：1
- 2016年
- 目的:筛选HLA-A*0201限制性GPC3优势表位肽,为肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)特异性的免疫细胞治疗提供新的靶标。方法:通过表位预测网站初步筛选HLA-A*0201限制性GPC3表位肽,T2细胞结合实验筛选优势表位肽。结果:通过三大常用的表位预测网站,共筛选了13个评分较高的表位肽,化学合成表位肽,采用T2细胞结合实验显示,有4个表位肽与HLA-A2呈现较高亲和力。结论:抗原表位预测网站结合T2细胞结合实验能初步筛选亲和力较高的HLA-A*0201限制性GPC3表位肽,可能用于HCC特异性CTL治疗的候选标靶。
- 胡培刘莉万松孟忠吉
- 关键词：肝癌GPC3表位肽肿瘤特异性抗原
