王思淼
- 作品数：12 被引量：62H指数：4
- 供职机构：中国人民解放军总医院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 双向电泳结合质谱分析长双歧杆菌XY01分泌蛋白质图谱被引量：2
- 2013年
- 菌体的分泌蛋白质在宿主和菌体的相互作用之间起着重要的作用.本研究采用双向凝胶电泳的方法建立了长双歧杆菌XY01分泌蛋白质图谱,通过MALDI-TOF/TOF质谱鉴定和数据库搜索,对鉴定到的分泌蛋白进行了分析.共检测到21个蛋白质点,成功鉴定18个蛋白质点,分别代表14个不同的蛋白质,等电点分布在4.5～7.0之间,分子质量分布在20～65 kD之间;通过COGs分类和功能分析,信号肽和细胞定位及KEGG代谢通路分析.结果表明,这些蛋白质对菌体细胞壁/膜的形成、生物信号传导和物质代谢等起着重要作用.研究结果为长双歧杆菌蛋白质组学和基因组学的研究提供了参考.
- 尚伟邹大阳王思淼袁静廖祥儒
- 关键词：双向凝胶电泳蛋白质图谱
- 基于颜色判定的DNA环介导恒温扩增法快速检测金黄色葡萄球菌被引量：4
- 2013年
- 目的建立基于颜色判定的DNA环介导恒温核酸扩增法(loop-mediated isothermal amplification of DNA,LAMP)快速检测金黄色葡萄球菌(SAU)技术。方法利用LAMP法针对SAU特异基因nuc基因设计7套引物,通过对7套引物扩增效率进行比较得到最佳引物组合来快速检测SAU,采用两种结果判断方法在50 min内完成反应。结果 LAMP方法检测核酸的最低浓度为7.16 pg/μl,灵敏度为PCR法的10倍(PCR法为71.6 pg/μl),同时采用22种同源或相似菌种进行特异性检测,结果表明具有良好的特异性。结论 LAMP方法检测过程简单,实验装置简便,反应结果肉眼可视化辨别,灵敏度高,特异性强,特别适合基层防疫与检疫部门对SAU的快速检测。
- 李环刘威邹大阳杨展赵向娜李雪莲崔茜王思淼魏晓王雪松黄留玉袁静
- 关键词：金黄色葡萄球菌
- 2014年某三级甲等军队医院感染现患率调查分析被引量：3
- 2016年
- 目的了解医院感染的分布、发生和相关危险因素,为研究和制定针对性医院感染预防控制措施提供科学依据。方法采用横断面调查方法,对2014年11月24日0:00-24:00的住院患者进行床旁调查和病历调查相结合的医院感染现患率调查;采用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析。结果调查日住院患者共1 930人,医院感染125例、134例次,医院感染率为6.4%;例次感染率为6.9%,社区感染208例、216例次,感染率为10.7%、例次感染率为11.2%。医院感染部位列前4位的是下呼吸道感染52.0%、上呼吸道感染13.6%,泌尿道感染8.0%、腹腔感染7.2%;发生医院感染患者的标本送检率为76.0%,检出的病原菌以革兰氏阴性菌为主;调查日抗菌药物使用率为46.61%,治疗前病原学送检率为45.81%。多因素分析表明,使用呼吸机、泌尿道插管、气管切开、动静脉导管为医院感染的高危险因素。结论医院感染现患率调查对医院感染管理具有指导意义,感染管理科应与多部门沟通合作,加强重点科室的目标性监测,提高抗菌药物治疗前微生物送检率,及时进行风险评估,降低医院感染发生率。
- 王思淼李佳佳金鑫蒋伟
- 关键词：现患率医院感染病原菌
- 肝硬化患者肠道微生物代谢功能的宏基因组学研究被引量：4
- 2013年
- 目的分析肝硬化患者远端肠道微生态菌群代谢功能的变化。方法选取16例肝硬化患者及20例正常人,提取其肠道微生物宏基因组DNA进行高通量Solexa测序,对测序基因进行代谢功能的注释,比较肝硬化患者与正常人之间的差异,找出疾病相关的肠道微生物代谢功能的变化。结果肝硬化患者肠道菌群功能多样性降低,对药物、必需氨基酸、丙酸盐等的代谢能力以及炎性反应显著增强,而对丁酸盐、胆汁酸的代谢能力以及细胞周期相关的功能显著降低。结论在肝硬化的影响下,肠道微生物的生长环境被破坏,肠道菌群为了适应环境,在功能和代谢方面表现出一定程度的代偿。
- 魏晓邹大阳闫夏贝杨展崔茜王思淼黄留玉袁静
- 关键词：宏基因组学谷胱甘肽必需氨基酸胆汁酸
- 烧伤创面猪链球菌感染的病原学检测与临床分析被引量：1
- 2016年
- 人类猪链球菌感染是一种急性人畜共患传染病,主要通过破损的皮肤或黏膜接触病猪、死猪而感染。四川暴发人感染猪链球菌疫情引起临床及各界高度关注,国内外不断有散发及不同程度暴发的报道。本院发现1例因大面积烧伤行创面猪链球菌感染病例,为北京地区散发罕见病例,本文就其病原学检测结果与临床分析报道如下。
- 蒋伟王思淼
- 关键词：猪链球菌病原学
- 肝硬化小鼠肠道菌群结构及血清炎性因子的变化被引量：4
- 2014年
- 目的:观察肝硬化小鼠肠道菌群结构及血清炎性因子水平的变化。方法:通过CCl4灌胃构建小鼠的肝硬化模型;采用酶联免疫吸附法检测肝硬化进程中血清内毒素及炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α水平的变化;采集肝硬化小鼠新鲜粪便,通过荧光定量PCR实验检测肠道目的菌群的改变。结果:肝硬化小鼠肠道中拟杆菌属和梭菌属细菌显著减少,韦荣球菌属、肠杆菌属和肠球菌属细菌显著增加;随着肝硬化进程的加重,小鼠血液中内毒素及炎性因子水平显著提高。结论:肝硬化导致小鼠肠道菌群失调,促进了血液中内毒素及炎性因子水平的提高,形成恶性循环。
- 魏晓杨展崔茜邹大阳闫夏贝王思淼黄留玉袁静
- 关键词：菌群结构肝硬化小鼠肠道血清酶联免疫吸附法荧光定量PCR
- 碳青霉烯类抗生素不敏感的肠杆菌科细菌的耐药性与分子特征分析
- 目的 了解我院对碳青霉烯类抗生素不敏感的肠杆菌科细菌的发生及耐药情况，探讨耐药与产酶的关系。方法 选取2011 年-2012 年我院亚胺培南或美罗培南不敏感的肠杆菌科细菌，用琼脂稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)，改良Ho...
- 蒋伟王思淼金鑫
- 关键词：碳青霉烯酶MLST
- 志贺菌属逃避宿主固有免疫系统的机制研究进展
- 2013年
- 肠黏膜上有多重先天免疫防御系统,当发生细菌感染时,可以向免疫系统传递信号,抵御细菌的入侵,而且使被破坏或衰老的上皮细胞再生;然而肠黏膜致病菌具有的多重致病机制可以适应宿主的炎性反应和免疫反应,能使宿主细胞死亡并操控宿主细胞存留的信号通路。这些特性使致病菌能够适应肠黏膜环境,破坏细胞功能和免疫功能,从而使致病菌对宿主的感染更易发生。本文综述了宿主对细菌感染的抵抗机制和志贺菌属逃避宿主固有免疫系统的机制。
- 杨展王思淼崔茜刘威王雪松邹大阳李雪莲李环王玉飞黄留玉袁静
- 关键词：志贺菌属宿主免疫系统细菌感染
- 用环介导等温扩增技术快速检测粪便样本中的沙门菌被引量：7
- 2014年
- 目的：建立快速检测粪便样本中的沙门菌的环介导等温扩增技术（LAMP），并着重在灵敏度和特异性方面对此方法进行评价。方法：利用LAMP针对沙门菌特定基因invA（靶基因）设计的6条特异引物，通过引物特异性识别特定基因invA上的8个独立区域来快速检测沙门菌；LAMP反应过程中会产生白色沉淀焦磷酸镁，故可以通过监测浊度来判定反应结果。结果：实时浊度仪监测反应结果表明，LAMP反应在60～65℃等温条件下50min内完成；如果在反应前添加羟基萘酚兰，蓝色阳性结果很明显区别于紫色阴性结果；LAMP的最低检出限为6．97pg/μL，PCR为69．7pg/μL，LAMP方法的检测灵敏度是PCR的10倍，且具有良好的特异性。结论：LAMP方法用于快速检测沙门菌，具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果肉眼可辨、灵敏度高、特异性强的特点，对非沙门菌菌株的结果呈阴性，表明引物设计有很好的特异性。对粪便样本进行检测，发现具有同样的敏感性和特异性。这表明LAMP法是潜在的和有价值的在粪便样本中直接检测沙门菌的方法，具有快速、简便、低成本的特点。LAMP法适用于快速临床诊断。
- 刘威李环邹大阳杨展赵向娜李雪莲崔茜王思淼黄思妺闫夏贝魏晓王雪松尹志涛黄留玉袁静
- 关键词：沙门菌环介导等温扩增技术
- 长双歧杆菌NCC2705纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白的黏附作用研究被引量：2
- 2014年
- 目的验证功能蛋白烯醇化酶(enolase)和Tuf蛋白是否为长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)NCC2705的黏附因子。方法将长双歧杆菌NCC2705与Caco-2细胞共培养,显微镜观察加入纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白前后细胞黏附细菌数的变化并进行统计学分析。将Caco-2细胞、长双歧杆菌NCC2705、致病菌(弗氏志贺菌或伤寒沙门菌)共培养,检测加入纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白前后上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果加入纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白之后,Caco-2细胞黏附细菌数显著降低(P<0.05)。Caco-2细胞与致病菌共培养时,LDH和TNF-α的水平显著增高(P<0.05);Caco-2细胞与长双歧杆菌NCC2705和致病菌共培养时,LDH和TNF-α的水平显著降低(P<0.05),然而加入纯化蛋白烯醇化酶和Tuf蛋白后,LDH和TNF-α的水平又出现显著增高(P<0.05)。结论长双歧杆菌NCC2705可竞争性抑制致病菌对肠上皮细胞的黏附,而烯醇化酶和Tuf蛋白可竞争性抑制长双歧杆菌对肠上皮细胞黏附作用,是双歧杆菌的黏附因子。
- 王思淼魏晓赵向娜李环王雪松袁静
- 关键词：长双歧杆菌NCC2705乳酸脱氢酶肿瘤坏死因子-ΑCACO-2细胞
