邹大阳
- 作品数：20 被引量：67H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院疾病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝硬化患者肠道微生物代谢功能的宏基因组学研究被引量：4
- 2013年
- 目的分析肝硬化患者远端肠道微生态菌群代谢功能的变化。方法选取16例肝硬化患者及20例正常人,提取其肠道微生物宏基因组DNA进行高通量Solexa测序,对测序基因进行代谢功能的注释,比较肝硬化患者与正常人之间的差异,找出疾病相关的肠道微生物代谢功能的变化。结果肝硬化患者肠道菌群功能多样性降低,对药物、必需氨基酸、丙酸盐等的代谢能力以及炎性反应显著增强,而对丁酸盐、胆汁酸的代谢能力以及细胞周期相关的功能显著降低。结论在肝硬化的影响下,肠道微生物的生长环境被破坏,肠道菌群为了适应环境,在功能和代谢方面表现出一定程度的代偿。
- 魏晓邹大阳闫夏贝杨展崔茜王思淼黄留玉袁静
- 关键词：宏基因组学谷胱甘肽必需氨基酸胆汁酸
- 双向电泳结合质谱分析长双歧杆菌XY01分泌蛋白质图谱被引量：2
- 2013年
- 菌体的分泌蛋白质在宿主和菌体的相互作用之间起着重要的作用.本研究采用双向凝胶电泳的方法建立了长双歧杆菌XY01分泌蛋白质图谱,通过MALDI-TOF/TOF质谱鉴定和数据库搜索,对鉴定到的分泌蛋白进行了分析.共检测到21个蛋白质点,成功鉴定18个蛋白质点,分别代表14个不同的蛋白质,等电点分布在4.5～7.0之间,分子质量分布在20～65 kD之间;通过COGs分类和功能分析,信号肽和细胞定位及KEGG代谢通路分析.结果表明,这些蛋白质对菌体细胞壁/膜的形成、生物信号传导和物质代谢等起着重要作用.研究结果为长双歧杆菌蛋白质组学和基因组学的研究提供了参考.
- 尚伟邹大阳王思淼袁静廖祥儒
- 关键词：双向凝胶电泳蛋白质图谱
- 基于颜色判定的DNA环介导恒温扩增法快速检测金黄色葡萄球菌被引量：4
- 2013年
- 目的建立基于颜色判定的DNA环介导恒温核酸扩增法(loop-mediated isothermal amplification of DNA,LAMP)快速检测金黄色葡萄球菌(SAU)技术。方法利用LAMP法针对SAU特异基因nuc基因设计7套引物,通过对7套引物扩增效率进行比较得到最佳引物组合来快速检测SAU,采用两种结果判断方法在50 min内完成反应。结果 LAMP方法检测核酸的最低浓度为7.16 pg/μl,灵敏度为PCR法的10倍(PCR法为71.6 pg/μl),同时采用22种同源或相似菌种进行特异性检测,结果表明具有良好的特异性。结论 LAMP方法检测过程简单,实验装置简便,反应结果肉眼可视化辨别,灵敏度高,特异性强,特别适合基层防疫与检疫部门对SAU的快速检测。
- 李环刘威邹大阳杨展赵向娜李雪莲崔茜王思淼魏晓王雪松黄留玉袁静
- 关键词：金黄色葡萄球菌
- 泛耐药基因NDM-1在大肠杆菌中的克隆表达及耐药性检测
- 2012年
- 目的:构建bla(NDM-1)基因重组质粒,表达新德里金属β内酰胺酶1(NDM-1),并检测携带bla(NDM-1)基因重组质粒的大肠杆菌的耐药状况。方法:PCR扩增编码NDM-1的基因bla(NDM-1),构建表达载体pGEX4T-1-NDM-1,并转化至大肠杆菌,转化子经PCR后测序,以确认构建和转化成功;用Western印迹验证重组蛋白的表达;用药敏纸片法检测含重组质粒pGEX4T-1-NDM-1的大肠杆菌的耐药谱;用E-test法测定其最低抑菌浓度(MIC)。结果:PCR及测序结果显示载体构建和转化成功;含重组质粒pGEX4T-1-NDM-1的大肠杆菌在37℃时,经1 mmol/LIPTG诱导5 h后,SDS-PAGE可见目的条带;除对替加环素和粘菌素敏感外,该重组子对多种碳青霉烯类抗生素耐药,E-test检测其对亚胺培南的MIC为64μg/mL。结论:构建了含泛耐药基因bla(NDM-1)的重组质粒,转入大肠杆菌后表达了融合蛋白,并对多种碳青霉烯类抗生素耐药。为进一步研究bla(NDM-1)基因和蛋白的功能奠定了基础。
- 邹大阳刘威尚伟魏晓李雪莲王雪松尹志涛袁静黄留玉
- 关键词：克隆表达耐药性
- 肝硬化小鼠肠道菌群结构及血清炎性因子的变化被引量：4
- 2014年
- 目的:观察肝硬化小鼠肠道菌群结构及血清炎性因子水平的变化。方法:通过CCl4灌胃构建小鼠的肝硬化模型;采用酶联免疫吸附法检测肝硬化进程中血清内毒素及炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α水平的变化;采集肝硬化小鼠新鲜粪便,通过荧光定量PCR实验检测肠道目的菌群的改变。结果:肝硬化小鼠肠道中拟杆菌属和梭菌属细菌显著减少,韦荣球菌属、肠杆菌属和肠球菌属细菌显著增加;随着肝硬化进程的加重,小鼠血液中内毒素及炎性因子水平显著提高。结论:肝硬化导致小鼠肠道菌群失调,促进了血液中内毒素及炎性因子水平的提高,形成恶性循环。
- 魏晓杨展崔茜邹大阳闫夏贝王思淼黄留玉袁静
- 关键词：菌群结构肝硬化小鼠肠道血清酶联免疫吸附法荧光定量PCR
- PinX1的原核表达、纯化及其与hTERT的相互作用被引量：2
- 2014年
- 目的:原核表达人Pin2/TRF1结合蛋白X1(PinX1),确定该蛋白与人端粒酶逆转录酶(hTERT)催化亚基的相互作用。方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增PinX1基因的编码序列,克隆至pET-32a载体构建重组质粒pHisPinX1,经双酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21并进行诱导表达,SDS-PAGE和Western印迹检测His-PinX1的表达;用His磁珠纯化His-PinX1,在人肾胚细胞293T内检测His-PinX1与hTERT的相互作用。结果:扩增得到980 bp的PinX1基因;Western印迹检测表明,相对分子质量约57×103的His-PinX1获得表达,且纯化的His-PinX1与hTERT具有相互作用。结论:表达并纯化得到了与hTERT相互作用的His-PinX1,为深入研究PinX1的功能奠定了基础。
- 廉攀峰程龙关鑫邹大阳梅玲李俊杰张菊会王恩群叶棋浓
- 关键词：原核表达人端粒酶逆转录酶
- E4F1真核表达载体的构建及与p53的相互作用
- 2014年
- 目的：构建E4 F1野生型及缺失32～81位氨基酸的真核表达载体，检测其与p53的相互作用及对下游基因p53的调节。方法分别用普通PCR和重组PCR方法从乳腺文库中扩增E4F1野生型编码序列及缺失32～81位氨基酸的突变型序列，分别将其以正确相位构建到pXJ40-MYC载体中，得到重组质粒MYC-E4F1和MYC-E4F1（Δ32-81），分别转化大肠杆菌DH5α，重组质粒经酶切鉴定并转染293 T细胞， Western印迹检测蛋白的表达。将MYC-E4F1和MYC-E4F1（Δ32-81）质粒与FLAG-p53质粒共转染293T 细胞，免疫共沉淀实验检测其相互作用，野生型及缺失突变型表达载体共转染骨肉瘤细胞U2OS，检测其对下游基因p53的调节。结果 E4F1重组质粒及其突变型构建成功，在293 T细胞中鉴定表达正确，野生型及突变型E4 F1均与p53存在相互作用，突变型的结合能力增强，野生型E4F1升高p21蛋白表达水平，而突变型不改变p21蛋白水平。结论成功构建E4F1野生型及缺失32～81位氨基酸的突变型真核表达载体，二者都能与p53相互作用且突变型结合能力更强，野生型E4F1升高基因p53的靶基因p21的蛋白表达水平，而突变型不改变靶基因p21的蛋白水平。该研究为进一步研究E4 F1对p53的调节及其机制奠定了基础。
- 廉攀峰程龙关鑫邹大阳梅玲沈媛任伟张菊会叶棋浓王恩群
- 关键词：P53蛋白相互作用
- 聚合酶螺旋反应快速检测甲型H1N1流感病毒被引量：6
- 2017年
- 目的建立利用聚合酶螺旋反应(PSR)快速检测甲型H1N1流感病毒的方法。方法针对甲型H1N1流感病毒的特异性HA基因设计了6套引物,通过实时浊度法和显色法两种方法判断结果。结果与结论从6套引物中筛选出了最佳引物,并确定最佳温度为65℃;进一步实验表明最佳引物能特异性地检测H1N1病毒,与14种其他呼吸道病原核酸无交叉反应,敏感性达到100拷贝,与PCR敏感性一致。所建立的方法简单快速、特异性强、敏感性高,适合现场和基层单位应用推广。
- 马文董德荣邹大阳刘宁伟贺晓明敖大杨展黄思妺徐雅晴刘威黄留玉
- 关键词：甲型H1N1流感病毒
- 基于颜色判定的环介导恒温扩增法快速检测副溶血性弧菌被引量：5
- 2011年
- 利用DNA环介导恒温核酸扩增法(LAMP)针对副溶血性弧菌特异基因tlh基因设计4条引物,通过引物特异性识别tlh基因上的6个独立区域来快速检测副溶血性弧菌.LAMP反应的过程中会产生白色沉淀焦磷酸镁,故可以通过监测浊度来判定反应结果.实时浊度仪监测反应结果表明,LAMP反应在60～65℃恒温条件下50min内完成;如果在反应前添加羟基萘酚兰(HNB),蓝色的阳性结果很明显区别于紫色阴性结果;LAMP方法的最低检出限为9.74pg/μL,PCR方法最低检出限为97.4pg/μL,LAMP方法检测灵敏度是PCR方法检测灵敏度的10倍,且具有良好的特异性.LAMP方法用于快速检测副溶血性弧菌具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果肉眼可辨别、灵敏度高和特异性强的特点,所以LAMP方法检测副溶血性弧菌特别适合用于现场和基层检疫及医疗单位的快速诊断.
- 刘威邹大阳尹志涛刘大伟李雪莲魏晓王雪松姜铮袁静黄留玉
- 关键词：副溶血性弧菌
- 乳腺癌雌激素受体β不同亚型表达载体的构建及其转录活性分析
- 2013年
- 目的:构建人乳腺癌中雌激素受体β(ERβ)3种亚型ERβ1、ERβ2和ERβ5的真核表达载体,测定不同亚型ERβ的转录活性。方法:以乳腺癌细胞MCF7的cDNA为模板,PCR扩增ERβ1、ERβ2和ERβ5基因,分别克隆到pXJ40-Myc载体,Western印迹检测克隆载体在293T细胞内的表达;将上述载体与含雌激素应答元件(ERE)的萤光素酶(Luc)报告基因载体(ERE-luc)共转293T细胞,测定各亚型ERβ的转录活性。结果:构建了Myc-ERβ1、Myc-ERβ2和Myc-ERβ5表达载体,转录活性结果显示上述表达载体均具有活性,雌激素可升高ERβ1的转录活性,不能升高ERβ2和ERβ5的转录活性。结论:该研究为进一步探讨不同亚型ERβ在乳腺癌中的功能奠定了基础。
- 关鑫程龙邹大阳廉攀峰王超叶棋浓
- 关键词：雌激素受体Β真核表达转录活性乳腺癌
