李玉洁
- 作品数：9 被引量：7H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学天文地球医药卫生更多>>
- 抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C-scFv及其应用
- 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C‑scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontB，及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C‑scFv的底物GFP‑HIS6‑SNAP25（62）‑VAMP（57）‑C...
- 张国利田园刘雪于佳李玉洁刘雨玲岳玉环吴广谋李爽史飞赵鑫徐艳玲张培培
- 文献传递
- 抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C-scFv及其应用
- 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C-scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontB，及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C-scFv的底物GFP-HIS6-SNAP25（62）-VAMP（57）-C...
- 张国利田园刘雪于佳李玉洁刘雨玲岳玉环吴广谋李爽史飞赵鑫徐艳玲张培培
- 内蒙古莲花山铜矿区花岗闪长斑岩LA-ICP-MS锆石U-Pb年龄被引量：7
- 2014年
- 为了精确厘定莲花山铜矿的成矿时代,在前人研究的基础上,开展了与成矿关系密切的花岗闪长斑岩锆石U-Pb定年测定。实验结果共获得4组年龄数据,第1组有1个锆石,^206Pb/^238U年龄为343Ma±2Ma;第2组1个锆石,^206Pb/^238U年龄为264Ma±2Ma;第3组有1个锆石,^206Pb/^238U年龄为256Ma±2Ma;第4组有17个锆石,^206Pb/^238U年龄在240～249Ma之间,^206Pb/^238U年龄加权平均值为246.4Ma±1.2Ma（N=17）。结合所测锆石的CL图像特征,确定花岗闪长斑岩就位发生在晚二叠世—早三叠世。
- 王忠禹孙景贵白令安柴鹏古阿雷赵克强李玉洁
- 关键词：花岗闪长斑岩LA-ICP-MS锆石U-PB定年
- 用于肉毒毒素活性测定的特异性绿色荧光融合蛋白的制备
- 2017年
- 目的制备含有7种血清型肉毒毒素切割位点(SNAP25-VAMP)的特异性绿色荧光融合蛋白,在E.coli中诱导表达,纯化后用于肉毒毒素活性测定。方法根据SNARE蛋白复合物中SNAPE25和VAMP基因序列及各血清型肉毒毒素(Bo NTs)的切割位点,设计合成含有SNAREs中突触小体(SNAP25)和突触小泡膜蛋白(VAMP)的Bam HⅠ-HIS6-SNAP62-Eco RⅠ-VAMP57C-TAA-HindⅢ(以下简称为SV)基因,连接至p ET-28a-GFP载体上,构建重组质粒p ET-28a-GFP-SV,转化感受态E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后,经DEAE阴离子交换层析、Cu2+金属螯合层析、Q阴离子交换层析3步纯化,BCA法测定纯化产物的蛋白浓度,ELISA法检测B型肉毒毒素轻链蛋白(Bo NT/BL)活性。结果构建的质粒p ET-28a-GFP-SV经双酶切及测序鉴定证明构建正确,表达的GFP-SV融合蛋白相对分子量约40 000,主要以可溶形式存在,蛋白浓度为18.4μg/μl,纯度可达70%以上。利用该融合蛋白的荧光强弱变化可测定Bo NT/BL活性大小,同时也可测定其抗体中和活性大小。结论制备的含有SV的特异性绿色荧光融合蛋白在E.coli中获得了高效表达,为后续各型肉毒毒素活性检测及抗体中和毒素活性检测奠定了基础。
- 吉元刚张国利李泽鸿岳玉环吴广谋田园刘雨玲李玉洁赵鑫付玉和王冬冬张培培侯天全徐艳玲马洪园
- 关键词：绿色荧光蛋白血清型
- 抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体3A-scFv及其应用
- 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体3A‑scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontB，及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25（62）‑VAMP（57）‑C，人源化抗B型...
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- 文献传递
- 抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体2F-scFv及其应用
- 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体2F‑scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontB，及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25（62）‑VAMP（57）‑C，人源化抗B型...
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- 文献传递
- 抗B型肉毒毒素治疗性胞内抗体的制备及活性研究
- 2016年
- 以克隆表达的B型肉毒毒素轻链蛋白(Bo NT/BL)为抗原,从噬菌体抗体库Tomlinson I+J筛选出得到活性高和特异性高的全人源单链抗体(Sc Fv),结合能够携带外源蛋白有效通过生物膜的小片段跨膜肽(TAT)制备跨膜单链抗体(TAT-Sc Fv)。经PCR后酶切,克隆到原核表达载体(p ET-28a-TAT)中,构建含有跨膜肽(TAT)的抗B型肉毒毒素胞内抗体融合蛋白,并在大肠杆菌中诱导表达,进行纯化工艺,对产物进行浓度纯度、亲和常数测定及生物活性研究。成功构建TAT-Sc Fv表达载体,融合蛋白相对分子量为32.7 k Da,主要以可溶形式表达,纯度也达到95%以上,胞内抗体中和B型肉毒毒素致病轻链得到TAT-Sc Fv的亲和常数为(1.133±0.273)×106L/mol,小鼠神经细胞乙酰胆碱定量测定实验证明胞内抗体具有较好的抗毒素活性。此结果为B型肉毒毒素治疗性胞内抗体的研制和肉毒中毒治疗奠定了基础。
- 吉元刚张国利李泽鸿岳玉环吴广谋田园刘雨玲李玉洁赵鑫付玉和王冬冬张培培侯天全徐艳玲马洪园
- 关键词：蛋白纯化乙酰胆碱
- 抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体2F-scFv及其应用
- 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体2F-scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontB，及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体的底物GFP-HIS6-SNAP25（62）-VAMP（57）-C，人源化抗B型...
- 张国利田园刘雪于佳李玉洁刘雨玲岳玉环吴广谋李爽史飞赵鑫徐艳玲张培培
- 抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体3A-scFv及其应用
- 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体3A-scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontB，及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体的底物GFP-HIS6-SNAP25（62）-VAMP（57）-C，人源化抗B型...
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