徐艳玲
- 作品数：20 被引量：7H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C-scFv及其应用
- 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C-scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontB，及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C-scFv的底物GFP-HIS6-SNAP25（62）-VAMP（57）-C...
- 张国利田园刘雪于佳李玉洁刘雨玲岳玉环吴广谋李爽史飞赵鑫徐艳玲张培培
- 产气荚膜梭菌α毒素人源化单链抗体7D
- 本发明公开了产气荚膜梭菌α毒素人源化单链抗体7D，它是从噬菌体抗体库Source bioscience筛选出来的，是全人源抗产气荚膜梭菌α毒素抗体，既可以实现中和毒素的治疗作用，同时克服了异源性抗体的多种副作用，免除了异...
- 张国利于佳田园朱进刘雨玲岳玉环吴广谋徐艳玲史飞赵鑫
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- 抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体3A-scFv及其应用
- 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体3A‑scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontB，及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25（62）‑VAMP（57）‑C，人源化抗B型...
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- 抗A型肉毒毒素的人源单链抗体E3‑scFv及其应用
- 本发明提供了抗A型肉毒毒素的人源单链抗体E3‑scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontAL，及筛选抗A型肉毒毒素的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25（62）‑VAMP（57）‑C，在人源化抗A型肉毒毒素...
- 岳玉环徐艳玲张国利田园吴广谋刘雨玲李泽鸿周博田多付玉和赵新侯天全张陪陪
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- 抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体2F-scFv及其应用
- 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体2F‑scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontB，及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25（62）‑VAMP（57）‑C，人源化抗B型...
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- 抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C-scFv及其应用
- 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C‑scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontB，及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C‑scFv的底物GFP‑HIS6‑SNAP25（62）‑VAMP（57）‑C...
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- 用于肉毒毒素活性测定的特异性绿色荧光融合蛋白的制备
- 2017年
- 目的制备含有7种血清型肉毒毒素切割位点(SNAP25-VAMP)的特异性绿色荧光融合蛋白,在E.coli中诱导表达,纯化后用于肉毒毒素活性测定。方法根据SNARE蛋白复合物中SNAPE25和VAMP基因序列及各血清型肉毒毒素(Bo NTs)的切割位点,设计合成含有SNAREs中突触小体(SNAP25)和突触小泡膜蛋白(VAMP)的Bam HⅠ-HIS6-SNAP62-Eco RⅠ-VAMP57C-TAA-HindⅢ(以下简称为SV)基因,连接至p ET-28a-GFP载体上,构建重组质粒p ET-28a-GFP-SV,转化感受态E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后,经DEAE阴离子交换层析、Cu2+金属螯合层析、Q阴离子交换层析3步纯化,BCA法测定纯化产物的蛋白浓度,ELISA法检测B型肉毒毒素轻链蛋白(Bo NT/BL)活性。结果构建的质粒p ET-28a-GFP-SV经双酶切及测序鉴定证明构建正确,表达的GFP-SV融合蛋白相对分子量约40 000,主要以可溶形式存在,蛋白浓度为18.4μg/μl,纯度可达70%以上。利用该融合蛋白的荧光强弱变化可测定Bo NT/BL活性大小,同时也可测定其抗体中和活性大小。结论制备的含有SV的特异性绿色荧光融合蛋白在E.coli中获得了高效表达,为后续各型肉毒毒素活性检测及抗体中和毒素活性检测奠定了基础。
- 吉元刚张国利李泽鸿岳玉环吴广谋田园刘雨玲李玉洁赵鑫付玉和王冬冬张培培侯天全徐艳玲马洪园
- 关键词：绿色荧光蛋白血清型
- 抗A型肉毒毒素的人源单链抗体D2-scFv及其应用
- 本发明提供了抗A型肉毒毒素的人源单链抗体D2‑scFv，它是利用人工合成的重组蛋白BontAL，及筛选抗A型肉毒毒素的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25（62）‑VAMP（57）‑C，在人源化抗A型肉毒毒素...
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- A型产气荚膜梭菌α毒素疫苗抗原rCPA-HSP65的原核表达及其纯化
- 2016年
- 目的原核表达A型产气荚膜梭菌α毒素疫苗抗原rCPA-HSP65,并进行纯化。方法以CPA全基因为模板,PCR扩增rCPA基因,插入表达质粒p ET-28a(+)-HSP65,构建重组表达质粒p ET-28a-rCPA-HSP65,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物进行12%SDS-PAGE分析;优化表达工艺进行高密度发酵,发酵产物经DEAE阴离子柱上复性后,再经金属螯合层析纯化。结果重组表达质粒p ET-28a-rCPA-HSP65经双酶切及测序鉴定证明构建正确,表达的重组蛋白相对分子质量约90 000,主要以可溶性形式为主,表达量占菌体总蛋白的30.17%。利用TB培养基,IPTG 34℃诱导5 h的表达产物经纯化后,纯度约达95%,蛋白收率为4.5 mg/g湿菌。结论已成功表达并纯化了A型产气荚膜梭菌α毒素疫苗抗原rCPA-HSP65,为后期疫苗生物学活性的研究奠定了基础。
- 王冬冬张国利岳玉环吴广谋田园吉元刚徐艳玲张培培侯天全赵鑫付玉和
- 关键词：原核细胞高密度发酵
- 产气荚膜梭菌α毒素人源化单链抗体7D
- 本发明公开了产气荚膜梭菌α毒素人源化单链抗体7D，它是从噬菌体抗体库Source bioscience筛选出来的，是全人源抗产气荚膜梭菌α毒素抗体，既可以实现中和毒素的治疗作用，同时克服了异源性抗体的多种副作用，免除了异...
- 张国利于佳田园朱进刘雨玲岳玉环吴广谋徐艳玲史飞赵鑫
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