王鹤
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
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- 褶纹冠蚌防御素基因特征与表达
- 本文从构建的褶纹冠蚌(Cristaria plicata) cDNA文库中获得防御素基因cDNA全长序列。结果表明褶纹冠蚌防御素序列全长为514bp,其中5'UTR有57bp；3'UTR有242bp,含有...
- 王鹤胡宝庆文春根程周玉宁瑞红
- 关键词：褶纹冠蚌防御素半定量荧光定量原核表达
- 褶纹冠蚌防御素基因特征与表达被引量：1
- 2013年
- 褶纹冠蚌(Cristaria plicata)样本壳长(9.50±1.05)cm、壳高(6.45±0.81)cm,暂养1周。40只随机分成试验组和对照组,每组20只。用Trizol法提取经诱导刺激后0、6、12、24、36、48 h的血液、外套膜、鳃、肝胰腺组织RNA,构建褶纹冠蚌cDNA文库并从中获得防御素基因cDNA全长序列。结果表明,褶纹冠蚌防御素序列全长为514 bp,其中5’UTR有57 bp;3’UTR有242 bp,含有一个poly(A)尾;开放阅读框长度为192 bp,编码63个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白N端为1个由23个氨基酸构成的信号肽,成熟肽由40个氨基酸组成,理论等电点为8.72,分子量为7.13 kD。三级结构预测显示其由一个α螺旋和两个β折叠片组成,形成典型的CSαβ结构。通过注射109cell/mL的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)刺激褶纹冠蚌,半定量分析PCR对褶纹冠蚌血液、外套膜、鳃和肝胰腺组织的防御素基因表达,结果表明,诱导前防御素基因在外套膜组织中表达量最高,约为血液和鳃的1.25倍,肝胰腺次之。在诱导0、6、12、24、36、48 h后,对照组的防御素基因表达量在血液和鳃中无明显变化,而在外套膜和肝胰腺中则呈现先略有下降而后上升;试验组防御素基因在血液中12 h时表达量最高,随后略有下降,而在外套膜、鳃和肝胰腺组织中表达量均在0 h时出现峰值,而后呈现下降趋势;外套膜和鳃的表达量分别在24 h和36 h略有上升。本研究通过分析褶纹冠蚌防御素基因全序列,并利用嗜水气单胞菌对褶纹冠蚌进行注射感染,探讨防御素基因的表达规律,以期为防御素对贝类非特异性免疫的影响提供基础依据。
- 王鹤胡宝庆文春根胡向萍程周玉宁瑞红
- 关键词：褶纹冠蚌防御素基因表达抗菌肽嗜水气单胞菌
- 褶纹冠蚌防御素基因表达及蛋白活性分析
- 本论文从褶纹冠蚌中克隆到了防御素基因的 cDNA全长序列,并对其同源性和三级结构进行了分析,采用定量 PCR方法分析了其组织表达情况及对革兰氏阴性菌大肠杆菌和革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌的抑菌效应。其次,以质粒pGex-4...
- 王鹤
- 关键词：褶纹冠蚌防御素基因表达蛋白活性
- 文献传递
- 功能化纳米银在食品分析中的应用
- 纳米材料由于其性能特殊和应用广泛，越来越受到人们的青睐。其中，最耀眼的要属金属纳米材料，尤其是贵金属纳米颗粒的制备与研究一直是材料科学工作者研究的重点。纳米银颗粒由于具有表面效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道等效应，表现出...
- 王鹤
- 关键词：纳米银食品检测表面等离子共振光谱分析
- 翘嘴鳜铜锌超氧化物歧化酶基因的分子克隆与原核表达被引量：3
- 2015年
- 运用RT-PCR和RACE-PCR技术克隆了翘嘴鳜（Siniperca chuatsi）铜锌超氧化物歧化酶（命名为ScCu/Zn-SOD）基因,该基因的cDNA序列全长为804bp,开放阅读框为465bp,编码154个氨基酸。氨基酸序列中含2个Cu/Zn-SOD标签序列、7个铜锌金属结合位点、2个半胱氨酸位点和1个N-糖基化位点;其与胞内Cu/Zn-SOD（icCu/Zn-SOD）和胞外Cu/Zn-SOD（ecCu/Zn-SOD）氨基酸序列的同源性分别为60.13%~92.21%和33.77%~42.21%。在系统进化树中,ScCu/Zn-SOD与其它物种的icCu/Zn-SOD聚成一支。ScCu/Zn-SOD的蛋白晶体结构主要由2个α螺旋和8个β折叠组成,呈β折叠构象,通过结合1个Cu^2＋和1个Zn^2＋构成其酶活性中心。ScCu/Zn-SOD的mRNA在翘嘴鳜肌肉、鳃、肝脏和肾脏等组织中均有表达,且鳃中的相对表达量最高。将该基因编码蛋白序列与pET-30a表达载体重组,热激转入大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中诱导表达,SDS-PAGE检测发现诱导后菌液的超声上清中有可溶性重组蛋白表达。
- 程周玉许亮清胡向萍胡宝庆简少卿阳刚张明文春根宁瑞红王鹤
- 关键词：翘嘴鳜超氧化物歧化酶基因克隆原核表达
- 纳米银粒子的制备及其对维生素C和维生素E的检测被引量：2
- 2015年
- 在聚乙烯吡咯烷酮(PVP)做保护剂的条件下,利用维生素C、维生素E的还原性制备纳米银。考虑反应时间、温度、NaOH浓度、PVP浓度对制备的影响,同时结合响应面方法对条件进行优化。采用扫描电子显微镜和粒度仪对纳米银的形貌和尺寸进行表征,并利用傅里叶红外光谱(FT-IR)表征和分析纳米银的形成。结果表明:维生素C(维生素E)在反应温度为55℃(80℃)、NaOH和PVP浓度分别是2.2×10^(-3)mol·L^(-1)(1.6×10-4mol·L^(-1))和2.4×10^(-5)mol·L(-1)(2.0×10-4mol·L^(-1))的条件下制备出粒径较小、分散性良好的纳米银。用紫外-可见光谱监测发现,纳米银在400~450nm处会产生强烈的表面等离子共振峰,吸收峰强度与维生素C或E的浓度成正比。将纳米银这一特性用于定量检测维生素C和维生素E的含量,其检出限分别是0.17和0.63mg·L^(-1),线性范围分别为0.4~5.0和0.9~9.5mg·L^(-1)。
- 王鹤张国文杨沂凤
- 关键词：纳米银维生素C维生素E
- 褶纹冠蚌防御素基因特征与表达
- 本文从构建的褶纹冠蚌(Cristaria plicata)cDNA文库中获得防御素基因cDNA全长序列。结果表明褶纹冠蚌防御素序列全长为514 bp,其中5’UTR有57bp;3’UTR有242bp,含有一个poly(A...
- 王鹤胡宝庆文春根程周玉宁瑞红
- 关键词：褶纹冠蚌防御素半定量荧光定量原核表达
- 文献传递
