邓亚婷
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南昌大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省科技厅科技支撑计划项目江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺结核患者外周血低密度粒细胞检测的临床意义被引量：3
- 2017年
- 目的探讨肺结核(TB)患者外周血低密度粒细胞(LDGs)的比例变化及其意义。方法采用流式细胞术分析80例TB患者及25例健康体检者外周血单个核细胞(PBMCs)层中CD14^(low)CD15^+LDGs的比例及变化情况,检测LDGs表面CD15、CD16、CD33、CD66b、CD62L的表达水平、凋亡坏死率及ROS水平。分析LDGs与TB发生发展以及转归的相关性。结果 TB患者外周血PBMCs层中LDGs的比例显著高于健康对照组(P<0.01);痰涂片抗酸阳性的TB患者LDGs的比例显著高于抗酸阴性者(P<0.01)。与TB患者正常密度粒细胞(NDGs)比较,TB患者LDGs表面CD15、CD33、CD66b表达量显著升高,CD62L的表达量显著下降,凋亡率上调,ROS水平上调。LDGs的比例在肺部有无空洞及空洞数量分组之间差异有统计学意义(P<0.05),即LDGs的比例随空洞累及范围的增加而升高。TB患者经抗痨治疗后,外周血LDGs的比例随治疗时间延长而下降,治疗3个月后,LDGs的比例显著降低,治疗6个月后与健康对照组无明显差异。结论 LDGs水平在TB患者外周血中显著上调,TB患者外周血中的LDGs为一群发生脱颗粒的活化中性粒细胞,且与TB的严重程度相关。
- 黄自坤姚芳苡邓亚婷罗清熊国亮李俊明
- 关键词：肺结核流式细胞术
- 慢病毒介导的 TACO-shRNA 通过促进吞噬体与溶酶体融合提高巨噬细胞清除结核分枝杆菌的能力被引量：2
- 2015年
- 目的 构建以富含色氨酸天冬氨酸膜蛋白（ TACO）基因为靶点的短发夹状RNA（ shRNA）表达慢病毒载体,鉴定其下调TACO表达的效果,以及对巨噬细胞吞噬和杀伤胞内结核分枝杆菌（ M.tb）的影响及相关机制. 方法 设计3条靶向小鼠TACO基因的shRNA表达片段及1条随机序列对照片段,插入慢病毒表达载体pSicoR 后利用293 T细胞进行病毒包装. 采用包装成功的慢病毒颗粒感染RAW264 .7细胞,分别采用real-time RT-PCR和Western blot方法鉴定干扰效果. 选择沉默效果最佳的重组慢病毒感染RAW264.7细胞,48 h后再采用M.tb对这些巨噬细胞进行感染,倍比稀释培养法进行细胞内荷菌量的检测,免疫荧光结合激光共聚焦显微镜检测巨噬细胞内M.tb与溶酶体的共定位情况,cyto-ID细胞自噬检测试剂盒检测各组细胞的自噬水平,Western blot法检测自噬相关蛋白LC3的表达水平.结果 测序结果证实重组慢病毒表达载体均构建成功. 靶向TACO基因的3种重组慢病毒均可下调RAW264 .7细胞中TACO的表达,其中LV-pSRT1的效果最佳. LV-pSRT1感染组RAW264 .7细胞内的荷菌量在感染后0 h时即显著低于对照慢病毒（LV-pSRTc）感染组（5.50×104 vs 8.1×104, P〈0.05）. 以M.tb感染后0 h时间点的细胞内荷菌量为基准,M.tb感染后48 h和72 h时LV-pSRT1感染组RAW264.7细胞内M.tb 的存活率显著低于对照慢病毒感染组（48 h： 134.54% vs 213.58%, P〈0.05; 72 h：148.18%vs 262.96%, P〈0.05）. 与对照慢病毒感染组比较,LV-pSRT1感染组RAW264.7细胞内M.tb与溶酶体的共定位率显著上调（75.67%vs 10.66%, P〈0.05）,同时细胞的自噬水平显著上调（16.20%vs 8.50%, P〈0.05）,LC3Ⅱ的相对表达水平也显著提高（0.51 vs 0.34, P〈0.05）. 结论 TACO基因特异性RNAi慢病毒表达载体可有效抑制RAW264.7细胞中TACO的表达,抑制巨噬细胞对M.tb的吞噬能力,增强巨噬细胞对胞内M.tb的清除能力. 下调TACO表达对巨噬细胞杀�
- 陈洁呙阳邓亚婷江红黄自坤罗清叶建青李俊明
- 关键词：慢病毒巨噬细胞结核分枝杆菌
