关锋
- 作品数:21 被引量:43H指数:4
- 供职机构:江南大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金中国科学院仪器设备功能开发技术创新项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 流感病毒及其单克隆抗体的研究进展被引量:1
- 2013年
- 流行性感冒是由流行性感冒病毒(influenzavi.rus,简称流感病毒)引起的一类人、禽、畜共患性急性呼吸道传染性疾病,流感病毒可通过空气迅速传播,还可由鸟或鸡等禽类及其粪便传播给人类。
- 袁华平关锋李桂梅
- 关键词:流感病毒单克隆抗体
- 整合素α6在不同转移潜能膀胱癌细胞中的定量差异表达分析被引量:2
- 2015年
- 整合素是一类跨膜糖蛋白,能够与细胞外基质结合参与许多生物学过程,尤其是与癌细胞的增殖、迁移等密切相关.目前在研究膀胱癌的发生发展过程中,对整合素的关注较少.本研究利用稳定同位素标记技术(SILAC)蛋白质定量技术结合质谱分析技术,对3株不同转移潜能的膀胱癌细胞株中的蛋白质组差异表达进行研究,并通过蛋白质免疫印迹技术、实时荧光定量PCR、细胞免疫荧光照相和流式细胞术等多种技术进行验证.同时使用临床组织基因芯片结果对比分析表明,与正常膀胱表皮细胞HCV29相比,整合素α6在膀胱癌细胞中表达量均有明显的上升,且在非侵染性膀胱癌KK47细胞中的表达量最高,侵染性的膀胱癌YTS1细胞中表达量次之.这一结果说明整合素α6与膀胱癌的发展具有密切关系,并为深入研究整合素α6在膀胱癌发生发展中的作用提供了前期基础.
- 陆微杨刚龙薛鹏刘昌梅关锋
- 关键词:SILAC膀胱癌整合素Α6
- 基于超滤膜辅助的糖蛋白全O-连接糖链的富集和MALDI-TOF/TOF质谱结构解析被引量:2
- 2017年
- 哺乳动物中约有50%以上的蛋白质都发生了糖基化修饰.连接在丝氨酸或苏氨酸上的O-连接糖链是常见的蛋白质糖基化修饰方式之一,其主要功能是维持与其连接的蛋白质部分的空间构象,保护其免受蛋白酶水解及覆盖某些抗原决定簇.糖链结构的解析有助于更清楚地认识糖蛋白及其功能.本研究建立了一种基于超滤膜辅助(FASP)富集细胞、血清和尿液中糖蛋白全O-连接糖链的方法,根据糖蛋白与其糖链结构之间的分子质量差异,利用10 KD超滤膜富集蛋白质样品中由β消除反应释放的全O-连接糖链,将糖链甲基化修饰后再使用MALDI-TOF/TOF-MS进行解析,同时利用二级质谱进行结构确认.通过上述方法可从标准糖蛋白mucin、细胞、血清和尿液样本中分别鉴定到83、29、33和85种O-连接糖链结构,利用该方法可以从复杂样品中富集和解析糖蛋白全O-连接糖链,实现快速、高效、高通量地解析糖蛋白O-连接糖链的目的.
- 武艳丽杨刚龙缪明永关锋
- 关键词:糖组学
- 糖生物学本硕衔接培养模式初探被引量:2
- 2014年
- 糖生物学是糖的化学和生物学相结合而产生的一门新兴学科。由于现在高校本科教育还未开设糖生物学课程,故尝试在相关课程教学过程中引入糖生物学的概念和知识。建立研究型教学模式,重视实验,引导学生参与教学,培养学生良好的科学素质和创新能力。
- 徐沙李子杰杨刚龙郭佳关锋
- 关键词:糖生物学研究型教学教学改革
- 针对骨髓移植病患中铁过载的去铁治疗研究进展被引量:4
- 2015年
- 骨髓移植是临床上治疗恶性造血系统疾病的常见手段。而铁过载是临床上常见的并发症之一,对病患的造血功能和治疗后恢复有极大的抑制作用。了解铁过载产生的分子或遗传机制能帮助优化去铁化方案,提高去铁化治疗的效率。本文总结了骨髓移植前后铁过载现象发生机制的最新研究进展,并阐述了临床上多种去铁治疗的方案,以期为该类病患铁过载的预防和治疗提供参考。
- 李士伟李想关锋
- 关键词:骨髓移植铁过载去铁治疗
- 不同转移潜能膀胱癌细胞糖组相对定量分析被引量:3
- 2015年
- 膀胱癌是发生在膀胱黏膜组织上的一种恶性肿瘤,是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤,早期(非肌层浸润型膀胱癌)阶段的诊断和治疗是降低膀胱癌死亡率的最有效方式.肿瘤的发生过程与糖链表达的改变有着密切的关系,而定量分析膀胱癌发生过程中糖链的表达变化尚未有研究.本研究以2株人膀胱正常上皮细胞系(HCV29、HUCV1),1株非肌层浸润性膀胱癌细胞系(KK47),和3株浸润性膀胱癌细胞系(YTS1、J82、T24)为研究材料,应用本室建立的利用乙酰肼修饰糖链唾液酸,以及[12C6]-和[13C6]-苯胺同位素修饰糖链还原性末端技术,然后利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),进行膀胱上皮细胞不同病理状态的糖组相对定量分析.从6株细胞中共鉴定出52种N-连接糖链结构,并定量分析了不同类型的糖链在不同细胞中的分布差异,发现唾液酸化、岩藻糖化的N-连接糖链在膀胱癌肿瘤细胞恶化过程中呈现显著升高的趋势,同时平分型糖链和高甘露糖型N-连接糖链也呈表达升高趋势,说明这些糖链结构的表达变化与膀胱癌发生关系密切,从而有助于进一步阐明膀胱癌发生过程中糖链相关的分子机理.
- 杨刚龙张甲戌刘昌梅关锋
- 关键词:膀胱癌
- 以临床实践为导向的医学细胞生物学教学实践与思考被引量:4
- 2016年
- 以医学细胞生物课程为基础,结合专业教师的教学实践,根据课程特点,设计了以学生为主体的教学模式,从临床上的实际问题出发,注重教学与科研相长及理论与实践的结合。把以教师为主导的教学方法转向从学生角度出发的教学方法,把以完成教学内容为主的教学转向以综合素质培养为目标的能力培养。研究可为我国医学类在生物类基础课程的教学上提供一定的参考。
- 李想关锋
- 关键词:细胞生物学
- miR-10b对MCF10A细胞表达N-糖链及O-糖链的影响被引量:1
- 2017年
- 蛋白质糖基化是蛋白质翻译后修饰之一,对蛋白质功能有重要的调节作用,而异常糖基化在肿瘤的发生、发展以及癌细胞转移过程中起到关键作用.MiRNAs在癌症的发生发展过程中同样起到非常关键的作用,但其如何影响糖基化进而在肿瘤恶性转化过程中发挥生物学功能的研究甚少.本文将miR-10b在人正常乳腺上皮细胞MCF10A中过表达,利用糖类相关基因芯片系统筛选了发生显著变化的糖基转移酶;随后利用本实验室建立的N-糖链及O-糖链测定方法,分析糖链水平的表达差异;最后对关键糖基转移酶基因Fut8、MGAT3及OGT通过荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹和凝集素免疫印迹进行了验证,为研究miR-10b在乳腺癌中的作用提供更多糖组学方面的理论基础.
- 国东郭佳武艳丽关锋
- 关键词:MIR-10BN-糖链
- 多聚唾液酸(PSA)及其修饰的神经粘附分子(PSA-NCAM)对肿瘤及细胞信号通路的影响被引量:7
- 2014年
- 神经粘附分子(Neural cell adhesion molecule,NCAM)是免疫球蛋白家族中的一员,在细胞粘附和细胞通信,尤其是神经系统的生长和塑型中起重要作用。而多聚唾液酸(Polysialic acid,PSA)则是控制NCAM粘附能力形成与神经系统分化的重要因素。研究发现,多种肿瘤细胞中存在PSA以及多聚唾液酸化的神经粘附分子(PSA-NCAM)再表达的现象,预示PSA及PSA-NCAM与多种肿瘤细胞的粘附性、迁移性和侵袭性等特性密切相关,影响肿瘤细胞的生长与转移,并通过介导多种细胞信号通路影响癌症的发生与发展。文章综述了NCAM以及PSA对癌症的发生与发展、预后的作用及其功能对细胞下游信号传导的影响。
- 王欣关锋
- 关键词:信号通路肿瘤
- 铁过载引发人肝细胞HH4N-糖链表达差异研究被引量:1
- 2015年
- 肝脏铁过载是血液系统疾病患者进行骨髓移植后的典型并发症之一,长期铁过载可引发肝脏细胞凋亡和器官损坏,然而铁过载的分子调控机理迄今仍不清楚。以培养的枸橼酸铁铵过载人肝细胞HH4和正常人肝细胞HH4为研究对象,细胞裂解提取总蛋白,分子筛超滤管分离获得总糖肽,PNGase F酶解释放出N-糖链,Sepharose 4B除盐纯化N-糖链,再利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)技术比较N-糖链变化情况。同时,采用荧光细胞凝集素免疫组化方法验证糖链分析结果。结果在铁过载人肝细胞和正常细胞中均检测到16种N-糖链,但糖链丰度存在明显差异。与正常人肝细胞相比,铁过载人肝细胞中高甘露糖型糖链的含量降低,而杂合型、复杂型、平分型、岩藻糖化和唾液酸化糖链的含量明显升高。凝集素免疫组化结果显示铁过载后细胞对凝集素Con A的亲和作用减弱,而对PHA-E、AAL、LCA和MAL-II的亲和作用增强,与糖链质谱分析结果相一致。研究为进一步探索人肝细胞铁过载模式下N-糖链表达差异的分子机理提供了技术支持。
- 李士伟关锋李想
- 关键词:铁过载N-糖链