杨刚龙
- 作品数:24 被引量:22H指数:2
- 供职机构:江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 一种滤膜辅助分离生物样本中糖蛋白全N-连接糖链及其鉴别方法
- 本发明提供了一种滤膜辅助分离生物样本中糖蛋白全N-连接糖链及其鉴别方法,以解决现有技术反应效率较低、可鉴定的糖链种类较少的问题。本发明利用8~12KD滤膜的分子筛效应,将从糖蛋白上释放的糖链与蛋白分离,在10KD分子筛上...
- 李铮杨刚龙马恬然王晔
- 文献传递
- 膀胱癌中唾液酸酶Neu1的异常表达对Toll样受体的影响被引量:2
- 2016年
- 哺乳动物细胞内的某些蛋白质或脂类可以被糖基化修饰,而糖链末端往往存在唾液酸化的现象,催化添加唾液酸的酶为糖基转移酶(sialyltransferase,ST),而去除唾液酸的为唾液酸酶(sialidase,SA或称为neuraminidase,NEU).本实验检测了人膀胱正常上皮细胞HCV29、非浸润性膀胱癌细胞KK47和浸润性膀胱癌细胞YTS-1中唾液酸的表达,发现恶性肿瘤细胞中唾液酸的含量高于正常细胞;进一步分析唾液酸酶和唾液酸转移酶的表达,发现唾液酸酶Neu1在正常细胞中表达最高,在良性肿瘤细胞中次之,在恶性肿瘤细胞中表达最低,推测在膀胱癌中Neu1对唾液酸的异常表达起着主要作用.同时,膀胱癌细胞中Toll样受体1,2,3,4(toll-like receptors,TLRs)表达趋势也与Neu1一致.利用TGF-β处理HCV29,使之发生上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),细胞中Neu1和TLR3表达明显减少;将Neu1基因沉默后,TLR3表达也明显减少.此外,在YTS-1细胞中过表达Neu1,TLR3表达增高且激活了下游NF-κB通路.这一结果说明膀胱癌中Neu1与TLR3的表达有着密切的关系,这为膀胱癌的分子机理研究提供了工作基础.
- 翟延红刘昌梅郭辉杨刚龙关锋
- 关键词:唾液酸唾液酸酶膀胱癌TOLL样受体
- 一种快速评估甲型流感病毒宿主特异性的方法
- 本发明涉及快速评估甲型流感病毒宿主特异性的方法,首先对甲型流感病毒血凝素进行初步纯化和制备糖链磁性微粒复合物;再将初步纯化后的甲型流感病毒血凝素与糖链磁性微粒复合物进行结合;再将与糖链磁性微粒复合物结合的甲型流感病毒血凝...
- 李铮孙宇杜亚蓉祁会彩邓炜娜王秀荣杨刚龙
- 文献传递
- 乳腺癌组织N-连接糖链的分析
- 2016年
- 目的: 解析乳腺癌组织的特异性糖链结构,为乳腺癌的早期诊断提供可能标志物。方法:收集2014年5月至2014年9月在陕西省肿瘤医院乳腺科手术切除的乳腺癌患者组织标本15例及距癌组织边缘3-5 cm的癌旁组织标本5例,另选取乳腺小叶增生组织标本4例,提取组织蛋白质,利用滤膜辅助的糖蛋白糖链释放方法获得N-连接糖链,应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDITOF/TOFMS)技术分析乳腺癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织中糖蛋白N连接糖链类型分布和含量变化情况。结果:乳腺癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织中分别鉴定到38、34和22个糖链。与癌旁组织及正常乳腺组织相比,癌症组织中复杂型、高甘露糖型、平分型、岩藻糖化和二天线型糖链的含量除高甘露糖型明显升高外,其他均显著降低(P〈0.05或P〈0.01)。乳腺癌组织中相对分子质量分别为1 580.455和1 742.490的2种高甘露糖型N糖链的含量显著高于正常乳腺组织(P〈0.05或P〈0.01)、相对分子质量分别为1 647.473和1 850.583的2种复杂型N-糖链的含量则显著低于正常乳腺组织(P〈0.05或P〈0.01)。这4种糖链经ROC曲线分析显示具有较高检测准确性(P〈0.05或P〈0.01)。结论:发现的4种乳腺癌组织特异性的N糖链有成为早期诊断和靶向治疗标志物的潜力。
- 虞迪和晓涵杨刚龙
- 关键词:乳腺癌肿瘤标志物
- 舌癌临床样本N-连接糖链的表达分析
- 2016年
- 从糖组学角度分析健康志愿者和舌癌患者血清中差异表达的N-连接糖链,找出与舌癌密切相关的N-连接糖链结构,为舌癌早期诊断、治疗及预后提供参考依据。以临床血清样品为研究材料,采用滤膜分离全糖蛋白N-连接糖链法(N-glycan-FASP-T)对健康志愿者和舌癌患者血清中全糖蛋白N-连接糖链分别进行比较分析,并利用MALDI-TOF/TOF串联质谱解析糖链结构,通过一级、二级质谱方法分析糖链结构和种类,并通过对糖链丰度数据的ROC曲线分析等统计学方法分析确定其表达水平对舌癌的影响。结果表明,与健康志愿者相比,舌癌患者血清糖链特征主要有:杂合型糖链比例升高;在复合型糖链中,三天线比例升高,而二天线及四天线的比例降低;末端Neu5Gc增加;平分型糖链比例升高。统计学分析发现其中有10个糖链结构在疾病发生过程中显著上调(AUC值大于0.50,其中m/z=1256.510/1418.573的两个糖链的AUC值达到了0.75),可以作为潜在的生物标志物并可以进行深入探究,为舌癌早期诊断提供临床参考依据。
- 郭辉张健杨刚龙黄如今郭佳
- 关键词:舌癌糖组学
- 整合素α6在不同转移潜能膀胱癌细胞中的定量差异表达分析被引量:2
- 2015年
- 整合素是一类跨膜糖蛋白,能够与细胞外基质结合参与许多生物学过程,尤其是与癌细胞的增殖、迁移等密切相关.目前在研究膀胱癌的发生发展过程中,对整合素的关注较少.本研究利用稳定同位素标记技术(SILAC)蛋白质定量技术结合质谱分析技术,对3株不同转移潜能的膀胱癌细胞株中的蛋白质组差异表达进行研究,并通过蛋白质免疫印迹技术、实时荧光定量PCR、细胞免疫荧光照相和流式细胞术等多种技术进行验证.同时使用临床组织基因芯片结果对比分析表明,与正常膀胱表皮细胞HCV29相比,整合素α6在膀胱癌细胞中表达量均有明显的上升,且在非侵染性膀胱癌KK47细胞中的表达量最高,侵染性的膀胱癌YTS1细胞中表达量次之.这一结果说明整合素α6与膀胱癌的发展具有密切关系,并为深入研究整合素α6在膀胱癌发生发展中的作用提供了前期基础.
- 陆微杨刚龙薛鹏刘昌梅关锋
- 关键词:SILAC膀胱癌整合素Α6
- 蓖麻凝集素120在抗甲型流感病毒方面的应用
- 本发明提出蓖麻凝集素120(RCA120)在抗甲型流感病毒方面的应用。蓖麻凝集素120可以结合甲型流感病毒表面的HA和NA上的糖链结构,作用于流感病毒HA可以在病毒侵染宿主细胞的早期发挥作用,通过影响HA与宿主细胞膜上唾...
- 李铮杜亚蓉孙宇王秀荣孙士生杨刚龙
- 文献传递
- 糖生物学本硕衔接培养模式初探被引量:2
- 2014年
- 糖生物学是糖的化学和生物学相结合而产生的一门新兴学科。由于现在高校本科教育还未开设糖生物学课程,故尝试在相关课程教学过程中引入糖生物学的概念和知识。建立研究型教学模式,重视实验,引导学生参与教学,培养学生良好的科学素质和创新能力。
- 徐沙李子杰杨刚龙郭佳关锋
- 关键词:糖生物学研究型教学教学改革
- 不同转移潜能膀胱癌细胞糖组相对定量分析被引量:3
- 2015年
- 膀胱癌是发生在膀胱黏膜组织上的一种恶性肿瘤,是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤,早期(非肌层浸润型膀胱癌)阶段的诊断和治疗是降低膀胱癌死亡率的最有效方式.肿瘤的发生过程与糖链表达的改变有着密切的关系,而定量分析膀胱癌发生过程中糖链的表达变化尚未有研究.本研究以2株人膀胱正常上皮细胞系(HCV29、HUCV1),1株非肌层浸润性膀胱癌细胞系(KK47),和3株浸润性膀胱癌细胞系(YTS1、J82、T24)为研究材料,应用本室建立的利用乙酰肼修饰糖链唾液酸,以及[12C6]-和[13C6]-苯胺同位素修饰糖链还原性末端技术,然后利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),进行膀胱上皮细胞不同病理状态的糖组相对定量分析.从6株细胞中共鉴定出52种N-连接糖链结构,并定量分析了不同类型的糖链在不同细胞中的分布差异,发现唾液酸化、岩藻糖化的N-连接糖链在膀胱癌肿瘤细胞恶化过程中呈现显著升高的趋势,同时平分型糖链和高甘露糖型N-连接糖链也呈表达升高趋势,说明这些糖链结构的表达变化与膀胱癌发生关系密切,从而有助于进一步阐明膀胱癌发生过程中糖链相关的分子机理.
- 杨刚龙张甲戌刘昌梅关锋
- 关键词:膀胱癌
- 肝细胞癌患者血清糖蛋白质组及其糖链结构研究
- 国际癌症研究机构的最新资料表明,肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)是全球最常见的五种恶性肿瘤之一。从2009年起恶性肿瘤致死率已跃居我国主要疾病死亡率的首位,而其中HCC排在恶性肿瘤死亡...
- 杨刚龙
- 关键词:肝细胞癌凝集素糖链
- 文献传递