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张改梅: 作品数：33 被引量：24H指数：3; 供职机构：北京民海生物科技有限公司更多>>; 发文基金：北京市科技计划项目国际科技合作与交流专项项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学更多>>

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柯萨奇病毒A6型毒株及其应用: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及柯萨奇病毒A6型毒株及其应用。本发明提供一株柯萨奇病毒A6型毒株，其P1结构蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该毒株在基因型内和基因型间均具有较强的交叉中和能力，毒力较强，对小...; 张改梅顾美荣胡家垒胡月梅赵丽丽谢学超陈磊马廷涛刘建凯

测定重组肠道病毒71型疫苗(汉逊酵母)原液纯度的高效分子排阻色谱法的建立及方法的验证被引量：3: 2019年; 目的建立检测重组肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)(汉逊酵母)病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)纯度的高效分子排阻色谱法(SEC-HPLC),并进行验证。方法建立SEC-HPLC法检测EV71 VLP纯度,并对该方法的专属性、精密度、检测限、定量限、耐用性及拖尾因子等指标进行验证。结果空白溶剂在设定的积分范围内无特异峰出现。重复性试验中原液参比品保留时间和峰面积相对标准偏差(RSD)分别为0. 14%和0. 21%,3批分析原液保留时间RSD均<0. 3%,峰面积RSD均<0. 8%;中间精密度试验原液参比品和3批分析原液保留时间RSD均<0. 2%;峰面积RSD均<2. 0%。检测限为样品浓度2. 5μg/mL,进样体积20μL;定量限为样品浓度10μg/mL,进样体积20μL。耐用性试验中原液参比品在不同浓度流动相中连续进样3次,保留时间和峰面积RSD均<2. 0%。原液参比品和3批分析原液目的峰的拖尾因子为1. 210±0. 01,RSD为0. 90%。结论建立的SEC-HPLC方法专属性、精密度、耐用性良好,适用于EV71(汉逊酵母)VLP纯度的检测。; 张改梅陈磊李国顺肖海峰李进郭林刘思航徐颖之朱芮波刘建凯顾美荣; 关键词：高效分子排阻色谱法病毒样颗粒纯度

柯萨奇病毒A16型毒株及其应用: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了柯萨奇病毒A16型毒株及其应用。本发明的柯萨奇病毒A16型毒株，其P1结构蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该毒株型内和型间交叉性良好、遗传稳定，可作为柯萨奇病毒A16型血清...; 张改梅刘建凯梁祁潘红星张黎赵丽丽谢学超陈磊马廷涛顾美荣; 文献传递

抗柯萨奇病毒A16型的抗体及其制备方法和应用: 本发明涉及抗体技术领域，具体涉及抗柯萨奇病毒A16型的抗体及其制备方法和应用。本发明提供的抗体或其抗原结合片段的重链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑3所示，轻链互补决定区CDR...; 张改梅陈磊赵丽丽谢学超曹慧佼顾美荣李国顺刘建凯

柯萨奇病毒A6型毒株及其免疫原性组合物和应用: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及柯萨奇病毒A6型毒株及其免疫原性组合物和应用。本发明的柯萨奇病毒A6型毒株的VP4、VP2、VP3、VP1蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、2、3、4所示，2A、2B、2C、3...; 肖霞张德宝顾美荣李国顺陈磊郭林简伟肖海峰徐颖之张改梅刘建凯

柯萨奇病毒A16型毒株及其应用: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了柯萨奇病毒A16型毒株及其应用。本发明的柯萨奇病毒A16型毒株，其P1结构蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该毒株型内和型间交叉性良好、遗传稳定，可作为柯萨奇病毒A16型血清...; 张改梅刘建凯梁祁潘红星张黎赵丽丽谢学超陈磊马廷涛顾美荣

重组肠道病毒71型疫苗的免疫原性和保护效果研究被引量：3: 2018年; 目的评价重组肠道病毒71型(EV-A71)疫苗的免疫原性和保护效果.方法将重组EV-A71疫苗按0、14d程序免疫BALB/c小鼠,采用微量细胞病变法测定一针免疫、二针免疫14d后的EV-A71中和抗体效价,应用酶联免疫吸附法测定二针免疫14d后小鼠脾单个核细胞分泌的细胞因子水平.乳鼠颅内攻击EV-A71病毒,同时将疫苗免疫后小鼠血清通过腹腔注射乳鼠,计算乳鼠生存率及半数动物保护性抗体水平.结果重组EV-A71疫苗一针免疫小鼠后诱导产生的EV-A71中和抗体阳转率即达100%,二针免疫小鼠后诱导产生的EV-A71中和抗体效价显著高于一针免疫(P=0.000),疫苗可诱导小鼠产生Th1和Th2类细胞因子应答.乳鼠颅内攻击20μl原倍EV-A71/M6病毒,同时将疫苗免疫小鼠血清160、40、10、2.5、0.625和0.15625U分别经腹腔注射乳鼠,连续观察22d,乳鼠生存率分别为100%、100%、70%、20%、0和0,对照组乳鼠于第8天全部死亡,采用Reed-Muench法计算平均半数动物保护中和抗体效价(ED50)为5.59U.结论重组EV-A71疫苗可诱导小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫应答,并可保护乳鼠免受EV-A71病毒感染.; 顾美荣高帆张改梅肖霞李国顺陈磊郭林肖海峰刘建凯毛群颖郑海发; 关键词：手足口病肠道病毒71型疫苗免疫原性体液免疫细胞免疫

重组肠道病毒71型疫苗(汉逊酵母)抗原含量测定方法的建立被引量：3: 2018年; 目的建立重组肠道病毒71型疫苗(EV-A71)(汉逊酵母)抗原含量测定方法,用于重组EV-A71(汉逊酵母)疫苗的质量控制.方法以抗EV-A71(汉逊酵母)多克隆抗体为包被抗体,经辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的抗EV-A71单克隆抗体为检测抗体,建立双抗体夹心酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),确定定量限度及最佳定量范围,并对该方法的准确度、精密度和特异性进行方法学验证.结果线性范围为5~80U/ml,线性和平行性良好.定量下限为5U/ml,检测不同浓度的EV-A71国家抗原标准品,回收率在88%~115%,准确度良好;重复性和中间精密度测定,其变异系数均小于15%;与重组柯萨奇病毒A16、甲型肝炎灭活疫苗(HAV)、冻干水痘减毒活疫苗(VZV)、Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)、五价口服轮状病毒减毒活疫苗(RV)等疫苗、Tris缓冲液、PBS缓冲液、破碎液、汉逊酵母宿主蛋白(HCP)均无交叉反应,其专属性良好.结论建立了重组EV-A71疫苗(汉逊酵母)抗原含量测定方法并进行了初步验证,为疫苗研制中抗原含量的质控提供了可靠的检测手段.; 张改梅陈磊高帆姚昕李国顺顾美荣毛群颖刘建凯郑海发; 关键词：疫苗汉逊酵母抗原含量

一种抗柯萨奇病毒A10型的单克隆抗体及其制备方法和应用: 本发明涉及抗体技术领域，具体涉及一种抗柯萨奇病毒A10型的单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明的抗体或其抗原结合片段的重链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3具有如SEQ ID NO.1‑3所示的氨基酸序列，轻链互补决...; 张改梅高帆李国顺陈磊赵丽丽谢学超马廷涛顾美荣刘建凯

肠道病毒71型灭活疫苗(Vero细胞)抗原含量检测方法的建立及应用: 2023年; 目的建立肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV-A71)灭活疫苗(Vero细胞)抗原含量检测方法并对其进行方法学验证及初步应用。方法以抗EV-A71兔多克隆抗体为包被抗体,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的抗EV-A71鼠单克隆抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA并验证其线性范围、专属性、准确度、精密度及耐用性等。通过检测EV-A71疫苗原液及研发生产工艺各中间制品的EV-A71抗原含量评价该方法的适用性。结果包被抗体与酶标抗体最佳稀释度分别为1∶5000和1∶10000。抗原为5~80 U/mL时,线性良好;与同为肠道病毒的其他抗原不存在交叉反应,专属性良好;对不同浓度抗原进行6次测定,其回收率在90%~100%,准确度良好;不同实验员对不同浓度抗原样品检测3次,CV均<11%,精密度良好;针对不同影响因素设计耐用性试验,回收率均在80%~120%,耐用性良好。该方法检测EV-A71疫苗原液和制备过程中的中间制品均具有良好的线性和平行性,表明该方法具有良好的适用性。结论建立了EV-A71疫苗(Vero细胞)抗原含量检测方法并进行了初步应用,为EV-A71疫苗和HFMD多价疫苗的研发及质量控制提供了可靠的检测方法。; 赵丽丽谢学超陈磊李国顺顾美荣张改梅; 关键词：肠道病毒71型双抗体夹心酶联免疫法抗原含量

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