高玉
- 作品数:8 被引量:4H指数:1
- 供职机构:东北农业大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽的筛选及其抗病毒作用被引量:3
- 2015年
- 把成功构建的猪流行性腹泻病毒(PEDV)M蛋白的阳性重组质粒pET-32a(+)-M在大肠杆菌表达系统中进行诱导表达。以表达纯化的M蛋白作为靶蛋白,利用噬菌体展示技术对随机十二肽库进行筛选,4轮淘选后,挑选出了10个与PEDV及M蛋白特异性结合力高的噬菌体单克隆,序列测定后推导的氨基酸序列分别为AGWYCTEVLCV、AYCTRHVCYLDN,多肽被命名为M2、M9。就合成多肽体外抗病毒的效果而言,间接免疫荧光试验和实时荧光定量PCR试验证明,多肽M2、M9及多肽M2与M9联合使用均能够有效抑制病毒复制,且都呈剂量依赖性。其中多肽M2抑制病毒的作用比多肽M9的高,两种多肽联合抗病毒的作用最好。上述结果为进一步研究PEDV M蛋白功能性配体和研制防治PEDV的小分子治疗制剂提供了试验依据,奠定了理论基础。
- 高玉葛旭影曹丽艳李训良任玉东任晓峰李广兴
- 关键词:噬菌体展示猪流行性腹泻病毒M蛋白多肽抗病毒作用
- ST细胞表达TGEV主要蛋白的研究被引量:1
- 2018年
- 为了提高猪睾丸(swine testicular,ST)细胞的转染效率,研究猪传染性胃肠炎病毒(Porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)各蛋白的功能,试验利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的真核表达载体pEGFP-C1转染ST细胞,对ST细胞的转染条件进行优化;然后利用优化后的转染条件将TGEV各蛋白真核表达质粒转染到ST细胞,通过免疫印迹(Western-blot)和间接免疫荧光(IFA)方法检测TGEV各蛋白在ST细胞中的表达情况。结果表明:悬浮细胞转染法(在细胞传代的同时进行转染)比贴壁细胞转染法(待细胞贴壁后再进行转染)的转染效率更高,且转染质粒与转染试剂的比例为1∶3时是转染ST细胞的最佳比例。利用优化后的转染条件将TGEV各蛋白真核表达质粒转染到ST细胞,48 h后采用IFA法检测发现TGEV各蛋白在ST细胞中成功表达,Western-blot法检测发现TGEV各蛋白在ST细胞中表达的大小与预期相符。说明优化后的转染条件可用于提高ST细胞的转染效率。
- 王丽郭田田秦越高玉孙刘妹李海滨李一经
- 关键词:猪传染性胃肠炎病毒免疫印迹间接免疫荧光
- 猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽及其筛选方法
- 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽及其筛选方法,所述M蛋白亲和肽的氨基酸序列为AGWYCTEVLCVQ或AYCTRHVCYLDN。本发明利用噬菌体展示技术获得能特异性结合PEDV及其重组蛋白M的短肽,并对该短肽...
- 李广兴高玉任玉东黄小丹葛旭影
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽筛选及其抗病毒作用
- <正>猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起猪的一种急性高度接触性胃肠道传染病,其临床特点为急性呕吐和严重腹泻,可导致新生仔猪的高死亡率。世界各地区PED广泛流行,经济损失影响重大。M蛋白是PEDV主...
- 高玉葛旭影曹丽艳李训良任玉东任晓峰李广兴
- 猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和多肽筛选与功能鉴定
- 猪流行性腹泻病(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的猪的一种急性高度接触性胃肠道疾病。其临床特点为急性呕吐和严重腹泻,可导致新生仔猪的高死亡率。世界各地区PED广泛流行,经济损失影响重大。M蛋白是PEDV主要结...
- 高玉
- 关键词:猪流行性腹泻病毒M蛋白多肽基因筛选
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽及其筛选方法
- 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽及其筛选方法,所述M蛋白亲和肽的氨基酸序列为AGWYCTEVLCVQ或AYCTRHVCYLDN。本发明利用噬菌体展示技术获得能特异性结合PEDV及其重组蛋白M的短肽,并对该短肽...
- 李广兴高玉任玉东黄小丹葛旭影
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽筛选及其抗病毒作用
- 猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起猪的一种急性高度接触性胃肠道传染病,其临床特点为急性呕吐和严重腹泻,可导致新生仔猪的高死亡率.世界各地区PED广泛流行,经济损失影响重大.M蛋白是PEDV主要结构...
- 高玉葛旭影曹丽艳李训良任玉东任晓峰李广兴
- 关键词:猪流行性腹泻猪流行性腹泻病毒M蛋白抗病毒作用
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽筛选及其抗病毒作用
- <正>猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起猪的一种急性高度接触性胃肠道传染病,其临床特点为急性呕吐和严重腹泻,可导致新生仔猪的高死亡率。世界各地区PED广泛流行,经济损失影响重大。M蛋白是PEDV主...
- 高玉葛旭影曹丽艳李训良任玉东任晓峰李广兴
- 文献传递