周煜
- 作品数:21 被引量:137H指数:4
- 供职机构:北京生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金全军“十五”指令性课题国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 生物气溶胶新型采样介质的研制
- 为了提高生物气溶胶的采样效率,为采样标准化奠定实验基础,研制了一种能适合大多数生物气溶胶的新型采样介质。利用大肠杆菌和粘质沙雷氏菌在静态和动态分别对该介质进行了测试,确定了4个配方后又对其进行了初步应用测试,正交试验结果...
- 翟俊辉朱红陈梅玲徐秀芝孙振海周煜车凤翔
- 关键词:生物气溶胶采样介质空气微生物
- 文献传递
- 重组腺病毒介导的p16与p53基因联合转移对人肺癌细胞系H358生物学行为的影响被引量:11
- 2000年
- 目的 探讨p16与p5 3基因对肺癌细胞的协同抑制效应及凋亡诱导作用。方法 首先用同源重组技术构建重组p16和p5 3腺病毒载体 ,然后单独或联合感染人肺癌细胞系H35 8,用免疫组织化学法及Westernblot检测腺病毒介导的基因转移效率与表达水平 ,用克隆形成实验、原位末端标记及流式细胞术观察它们对H35 8生长特性及凋亡的影响。结果 免疫组织化学染色结果表明重组腺病毒载体可高效地将外源基因p5 3转移到肺癌细胞中表达 ,转移效率可达 98%以上。单独导入p16或p5 3基因均可抑制H35 8细胞生长 ,但p16的抑制作用强于p5 3;两者联合使用可完全抑制H35 8细胞增殖。原位末端标记及流式细胞术分析显示单独导入p16基因只引起细胞周期阻滞 ,不能诱导细胞凋亡 ;导入p5 3基因除导致G1期阻滞外 ,也诱导少数细胞凋亡 ;同时导入 2种基因则可明显的诱导凋亡。结论 p16与p5 3基因对肺癌细胞增殖具有协同抑制作用 ,p16基因可以促进p5
- 白雪源车凤翔李劲松马玉香周煜翟俊辉孟令英
- 关键词:腺病毒抑癌基因
- 质粒DNA气溶胶发生及其经呼吸道转染实验动物的研究
- 气溶胶吸入给药可以使药物直接作用于呼吸道,在呼吸道局部达到较高的药物浓度而发挥有效作用,因此在呼吸道疾病防治中具有明显优势.近年来许多小分子药物通过气溶胶给药在哮喘、呼吸道感染等疾病的临床防治方面已得到较广泛的应用.
- 周煜
- 关键词:气溶胶质粒DNA呼吸道基因免疫
- 肾综合征出血热病毒呼吸道感染免疫抑制小鼠的研究
- 1996年
- 采用肾综合征出血热(HFRS)病毒经呼吸道和腹腔注射感染环磷酰按免疫抑制的成龄BALB/c小鼠.实验发现HFRS病毒通过两种感染途径均可引起免疫抑制动物发病和死亡,病毒气溶胶通过呼吸道感染引起动物死亡率为43%,腹腔注射感染引起的死亡率为61%。该病毒通过呼吸道可以迅速扩散至全身,从肺洗液巨噬细胞可以分离得到病毒.该结果表明,呼吸道是HFRS病毒敏感的侵入途径,在体内的扩散可能是肺巨噬细胞游走携带作用的结果;对于免疫功能低下的动物,呼吸道感染可以导致急性致死性感染。
- 周煜崔红孟令英车凤翔
- 关键词:肾综合征出血热病毒呼吸道感染
- 16S rRNA序列分析法在医学微生物鉴定中的应用被引量:66
- 1999年
- 16S rRNA序列分析作为微生物系统分类的主要依据已得到了广泛认同,随着微生物核糖体数据库的日益完善,该技术成为细菌分类和鉴定的一个有力工具。本文概述了 165 rRNA序列分析法的技术步骤以及该技术在医学微生物研究中的应用,总结了目前文献报导的各种致病微生物种属特异性 165 rRNA引物和探针序列,同时分析了该技术在应用中存在的一些问题。
- 周煜
- 关键词:医学微生物
- 重组腺病毒介导的p16INK4a表达诱导A549细胞衰老的研究被引量:1
- 2004年
- 目的 构建E1区缺失的复制缺陷型 5型重组腺病毒载体 ,探讨p16INK4a基因对肺癌细胞株A5 4 9细胞增殖与衰老的影响。方法 通过脂质体介导 ,将pAdCMV p16INK4a与pJM17共转染人 5型腺病毒E1基因转化的人胚肾细胞系 2 93细胞 ,同源重组产生腺病毒空斑 ,用双重PCR筛选出携带p16INK4a基因的重组腺病毒并感染肺癌细胞A5 4 9,用免疫组化及Westernblot检测腺病毒载体介导的基因转移效率和蛋白表达水平 ,分别用X gal染色和TRAP ELISA检测A5 4 9细胞中衰老相关 β 半乳糖苷酶及端粒酶活性。结果 腺病毒载体可将 95 %以上的p16INK4a基因转移到A5 4 9中 ,受感染细胞有外源p16INK4a蛋白表达 ,其生长受到明显抑制 ,即p16INK4a基因能诱导A5 4 9细胞表达衰老相关 β 半乳糖苷酶 ,并抑制细胞中的端粒酶活性。结论 复制缺陷型重组腺病毒 ,能有效地介导外源基因的转移与表达 ,可用于基因免疫和基因治疗 ;p16INK4a基因能抑制肺癌细胞A5 4 9生长并诱导其发生复制性衰老。
- 白雪源车凤翔陈香美孟令英周煜
- 关键词:重组腺病毒A549细胞
- 睾丸特异蛋白GGN1稳定表达细胞株的建立
- 2005年
- GGN1是1种功能未知的睾丸特异表达蛋白,它是睾丸特异性基因Ggn的表达产物。Ggn 基因的原初转录产物有多种剪接方式,并最终翻译产生3种蛋白,GGN1就是其中的1种。研究 发现Ggn的表达与精子的生成过程紧密相关。GGN1还可以与多种蛋白相互作用,其中包括 FANCL,GGNBP1,GGNBP2和OAZ3。为了能够在体外更方便的研究Ggn及其相关基因的功能,通 过脂质体转染和G418加压法筛选获得了能稳定表达pEGFP-N2/GGN1的CHO-K1细胞株。
- 张进杨婉身卢柏松周煜赵庆国曹志国王艳黄培堂
- 气溶胶发生对质粒DNA损伤的研究被引量:1
- 1998年
- 目的:采用气溶胶吸入方式对呼吸道进行基因转移将有可能成为呼吸系统疾病基因治疗的一种重要的基因转移方法,本项工作应用于基因治疗的载体主要包括病毒和质粒。研究了质粒DNA耐受气溶胶发生的能力。方法:采用TK-2型气溶胶发生器对带有E.coliLacZ报告基因的pCMVβ质粒水溶液进行气溶胶发生实验,采用电泳、COS-7细胞转染和细菌质粒转化等方法检测、分析回流液及采样液中质粒的损伤情况。结果:当喷雾压力和流量较大时质粒的损伤明显增大,而合适的发生条件可以保证裸质粒DNA在较长时间内保持完整。结论:本研究表明,用气溶胶发生裸质粒的给药方式进行呼吸道疾病的基因治疗及基因免疫是可能的。
- 周煜孟令英姜黎车凤翔
- 关键词:质粒DNA完整性基因治疗气雾剂
- 肾综合征出血热病毒气溶胶感染小鼠肺内免疫反应的研究
- 周煜
- HFRSV在玻璃平皿表面和鼠粪尿中自然衰亡的研究
- 1998年
- 室温下用第21代感染肾综合征出血热病毒(HFRSV)的乳小鼠脑悬液滴加于无菌玻璃平皿和盛有鼠粪尿的平皿中,再立即以1640细胞培养液反复洗涤后回收,对鼠脑悬液和回收液分别进行TCID50测定,计算玻璃平皿表面HFRS病毒的存活情况。结果HFRS病毒在玻璃平皿表面存活率为53.7984%;自然衰亡率为46.2016%。病毒加入鼠粪尿中的存活率为0.0012%;自然衰亡率为99.9988%。
- 孟令英周煜李军保鹿建春姜黎车风翔
- 关键词:存活率HFRSVHFRS流行病学