赵庆国
- 作品数：17 被引量：30H指数：4
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- 人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体FrGGI的构建、表达及特性分析被引量：5
- 1995年
- 为了获得半衰期延长,特异活性提高及具有PAI—1抗性的新型t-PA溶栓剂,利用基因重组及定位突变技术成功地构建了t-PA的K1、K2区糖基化位点消除,PAI-1结合位点缺失,F与E区连接序列His44～Ser50置换为纤粘蛋白Ⅰ型F区间连接序列GluSerLysProGluAlaGluGlu的t-PA的组合突变体FrGGI,并在中国仓鼠卵巢细胞中获得了高效表达。对表达产物的生物学特性分析表明,FrGGI在大鼠血浆中的半衰期延长了15倍,特异活性提高了40％,并获得了PAI-1抗性,是一株很有希望的新型溶栓剂候选株。
- 刘士辉黄培堂赵庆国朱恒奇徐秀英陈琳黄翠芬
- 关键词：组织型纤溶酶原激活剂突变体半衰期
- 人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体在中国仓鼠卵巢细胞中的高效表达及表达产物纯化研究
- 赵庆国
- GGNBP1抗体制备及小鼠组织表达谱分析
- 2005年
- 体外实验研究表明配子生成素结合蛋白1(GGNBP1)可能与GGN1相互作用形成睾丸特异性复合物,在精子生成过程中发挥作用。从小鼠睾丸总RNA中反转录扩增Ggnbp1全长cDNA,构建表达质粒,在大肠杆菌中表达GGNBP1,经聚丙烯酰胺凝胶纯化后免疫新西兰白兔,制备兔多抗血清。镍离子金属螯合柱纯化表达的GGNBP1蛋白,与NHS活化基团交联,制备GGNBP1抗体亲和层析柱,纯化GGNBP1多抗。在293FT细胞中瞬时表达Myc-GGNBP1融合蛋白,用于Myc单抗验证GGNBP1抗体特异性,结果证明获得了特异性的GGNBP1抗体。分别制备小鼠脑、心、肺、肝、脾、肾、肌肉、卵巢、睾丸和子宫组织匀浆,用GGNBP1抗体进行Western印迹分析,结果仅在睾丸组织匀浆中检测到GGNBP1特异性条带,证明GGNBP1是睾丸特异性表达蛋白。
- 赵庆国周煜张进朱恒奇曹志国卢柏松黄培堂
- 关键词：多克隆抗体表达谱睾丸小鼠
- 锌原卟啉测定对孕妇缺铁性贫血的临床诊断意义
- 为探讨锌原卟琳(ZPP)作为缺铁性贫血诊断指标的意义及孕妇早、中、晚期缺铁性贫血发病率。本文对139例孕早期,280例孕中期以及208例孕晚期共627例孕妇ZPP含量进行了测定分析,另对17例孕早期,182例孕中期以及1...
- 张建萍李希发张云秀许素菊余裕炉丛爱丽徐清华张郁赵庆国
- 文献传递
- 人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体在CHO细胞中表达产物的纯化研究被引量：4
- 2000年
- 目的 :为了从细胞株培养液中纯化长半衰期的t PA组合突变体FrGGI。方法 :采用高表达克隆细胞株 ,进行大量培养 ,收集 2 4h细胞培养液为初始材料 ,利用t PAK2区含有Lysine结合位点的特性和Zn2 +与蛋白质中咪唑、巯基等基团螯合作用 ,经Lysine Sepharose 4B亲和层析和Zn2 + Sepharose 4B金属螯合层析二步组合纯化。结果 :获得高比活的FrGGI,为研究该突变体生物学特性及推广应用奠定基础。结论 :利用赖氨酸和锌离子柱二步组合纯化方法 ,可有效地分离纯化t
- 赵庆国张郁黄培堂刘士辉焦保权
- 关键词：组织型纤溶酶原激活剂突变体纯化CHO细胞
- 睾丸特异蛋白GGN1稳定表达细胞株的建立
- 2005年
- GGN1是1种功能未知的睾丸特异表达蛋白,它是睾丸特异性基因Ggn的表达产物。Ggn 基因的原初转录产物有多种剪接方式,并最终翻译产生3种蛋白,GGN1就是其中的1种。研究 发现Ggn的表达与精子的生成过程紧密相关。GGN1还可以与多种蛋白相互作用,其中包括 FANCL,GGNBP1,GGNBP2和OAZ3。为了能够在体外更方便的研究Ggn及其相关基因的功能,通 过脂质体转染和G418加压法筛选获得了能稳定表达pEGFP-N2／GGN1的CHO-K1细胞株。
- 张进杨婉身卢柏松周煜赵庆国曹志国王艳黄培堂
- 应用酵母双杂交技术寻找与GGNBP相互作用的蛋白质
- 2004年
- 生殖细胞缺陷症(gcd)小鼠突变体是20个世纪90年代初发现的一种不育突变小鼠,其不育原因是由于其胚胎期原始生殖细胞的数目低于正常。FancL(也叫Pog)的缺失是引起gcd突变小鼠的原因,FancL基因缺失后可能影响了小鼠胚胎期原始生殖细胞的增殖/存活和成年期小鼠精母细胞的减数分裂。FANCL是一种含有PHD结构域的泛素E3连接酶,是Fanconi贫血复合物的组分之一。在生殖细胞中,FANCL与GGN1和GGN3相互作用,GGN1和GGN2又与一种新的蛋白质GGNBP特异作用。但GGNBP蛋白的功能还不清楚。为了研究GGNBP的功能以及揭示更多的参与该过程的蛋白质,运用Clontech公司新开发的第3套酵母双杂交系统,以GGNBP为诱饵从成年小鼠睾丸cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白质基因,发现了一个主要在睾丸中表达的新的基因,其编码的蛋白质产物在酵母系统中与GGNBP特异作用。
- 王艳卢柏松向文洲周煜赵庆国曹志国张进黄培堂
- 关键词：小鼠突变体酵母双杂交技术蛋白质CDNA文库
- 烧伤病人巨细胞病毒感染的检测分析
- 2000年
- 目的 :观察严重烧伤病人巨细胞病毒 (HCMV)感染情况及对病情的影响。方法 :采用PCR技术检测 50例烧伤病人创面及尿液中HCMV -DNA ,用ELISA法观察血清中HCMV -IgM、IgG ,并与 50例正常者检测结果进行对照。结果 :观察组血清中HCMV -IgM和创面及尿液中HCMV -DNA均高于对照组 ,感染HCMV的烧伤病人创面愈合较慢 ,外周血中淋巴细胞计数较高。结论 :烧伤患者感染HCMV的机会较大 ,且烧伤后早期的感染机会大于后期。PCR技术检测HCMV感染较为敏感而特异。
- 张建萍孙志刚许素菊赵庆国徐清华张郁余裕炉吕萍
- 关键词：烧伤巨细胞病毒聚合酶链反应
- 基于谱-效相关的雷公藤效/毒物质初步研究
- 目的： 雷公藤药效明确，但同时其毒性明显，临床应用受到限制，本研究以其为研究对象，探讨研究其抗炎效应和肝损伤物质基础，为提升雷公藤类药材质量建立针对性的控制方法提供参考依据。 方法： 分别采集常用品种雷公藤Trip...
- 赵庆国
- 关键词：雷公藤化学成分抗炎效应肝细胞毒性
- 文献传递
- FANCL在原始生殖细胞的形成和范可尼贫血中的功能研究被引量：2
- 2005年
- Fanconi氏贫血是一种罕见的常染色体隐性遗传性疾病,表现为进行性骨髓衰竭、先天性骨骼畸形和易患癌症等。Fanconiaremia(FA)病人细胞染色体自发不稳定,并对DNA交联剂如丝裂霉素C高度敏感。目前已发现11种FA蛋白参与形成了一种DNA损伤应答途径。新蛋白FANCL是FA复合物蛋白,作为E3连接酶催化FANCD2单一泛素化,泛素化FANCD2导向染色质与BRCA2相互作用,修复DNA损伤。FANCL、FANCC和FANCA等FA蛋白缺失造成生殖细胞缺失性不育,胚胎期生殖细胞中FA途径可能调控原始生殖细胞的增殖。FANCL和睾丸特异性蛋白质GGNBP1、GGNBP2以及OAZ3都与睾丸特异性蛋白质GGN1相互作用,形成睾丸特异性复合物,有可能在成年睾丸中影响精子生成。
- 赵庆国卢柏松黄培堂
- 关键词：生殖细胞原始生殖细胞贫血DNA损伤遗传性疾病
