夏迪
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：南京大学医学院附属金陵医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京市医学科技发展项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠树突状细胞相关C型凝集素-1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：3
- 2015年
- 目的树突状细胞相关C型凝集素-1(dendritic cell-associated C-type lectin-1,Dectin-1)是介导抗真菌天然免疫的重要受体之一。文中旨在构建表达小鼠Dectin-1基因的重组腺病毒载体,扩增、纯化获得高浓度的重组腺病毒。方法将PCR扩增的目的片段CLEC7A-p IRES2-EGFP重组到中间载体p DONR221上,再与腺病毒骨架质粒p AD/CMV/V5-DEST重组,获得重组腺病毒质粒p AD-CLEC7A-p IRES2-EGFP,经Pac I线性化后转染人胚肾293(HEK293)细胞,收获重组腺病毒p AD-CLEC7A-p IRES2-EGFP;利用HEK293细胞大量扩增腺病毒;并进行重组腺病毒的滴度测定;用荧光显微镜和实时荧光定量PCR鉴定转染重组腺病毒组(Dectin-1基因重组腺病毒转染HEK293细胞)和转染空病毒组(空病毒转染HEK293细胞)中Dectin-1基因的表达。结果菌落PCR鉴定、酶切鉴定及测序结果均显示重组腺病毒含有Dectin-1基因,腺病毒滴度为5×1011IU/m L,荧光显微镜下可见绿色荧光,PCR检测到转染重组腺病毒组Dectin-1表达量是转染空病毒组的8677.25倍。结论成功构建并获得了较高浓度的Dectin-1基因重组腺病毒载体,为下一步体内外研究Dectin-1高表达在宿主抗真菌天然免疫中的作用奠定基础。
- 夏迪钱倩刘志成谭鸣鸣丁媛苏欣孙文逵施毅
- 关键词：腺病毒载体模式识别受体
- 基础疾病对隐球菌病患者临床症状和转归的影响
- 2015年
- 目的隐球菌病是一种具有潜在致死性的深部真菌病,易感人群均有显著异质性。目前指南将感染人群分为获得性免疫缺陷综合征、器官移植受者和非HIV感染与非器官移植患者(non-HIV-infected and non-transplant host,NHNT)。文中旨在探讨基础疾病对NHNT隐球菌病患者临床症状和转归的影响。方法采用回顾性的队列研究设计,收集南京军区南京总医院NHNT隐球菌病住院患者临床资料。根据发病时是否处于免疫缺陷状态或合并有增加感染风险的疾病将患者分为有基础疾病组和无基础疾病组,分析2组患者临床症状、胸部影像学特征、实验室检查和临床结局等相关数据。结果与无基础疾病患者相比,有基础疾病患者更容易出现播散性病变(62.9%vs 21.1%,P<0.001),胸部影像学中出现斑片实变影者和混合病变的患者比例更高,分别为(47.4%vs 16.7%)与(31.6%vs 3.3%),P<0.05。此外,该类患者总体病死率更高(30.0%vs 5.3%,P=0.016)。结论基础疾病对NHNT隐球菌病患者的临床症状和转归存在显著影响。有基础疾病的NHNT患者容易发生播散性病变,具有更为严重的临床症状与更高的总体病死率。
- 丁媛谭鸣鸣夏迪何骞施毅苏欣
- 关键词：隐球菌病基础疾病预后
- 棘白菌素类药物的药动学和药效学指导临床用药优化被引量：7
- 2015年
- 免疫抑制人群的增加、抗菌药物的广泛应用、重症监护病房患者生存率的提高、诊断方法的改进等因素使诊断为真菌感染患者的数量显著增加。在抗真菌治疗过程中,多种宿主和医源性因素均会影响疾病的转归,其中药物选择、给药剂量和给药时间是众多因素的重要部分。因此,充分了解抗真菌药物的药动学和药效学特点,实现用药优化具有重要的临床意义。
- 夏迪施毅
- 关键词：卡泊芬净米卡芬净药动学药效学
- MicroRNA Let-7b介导甲型流感突变型PB1重组病毒的构建被引量：1
- 2015年
- 目的疫苗是预防流感所致疾病的最有效方法,MicroRNA介导的基因沉默机制为构建新型疫苗提供了新思路。文中旨在构建包含装载有miRNA Let-7b结合靶位PB1基因的甲型流感重组病毒。方法比对A/Nanjing/108/2009H1N1的PA、PB1、PB2与let-7b的靶序列选定PB1基因为最优序列后,通过基因突变,插入Let-7b的结合靶位;构建p DP2000重组表达载体,设计p DP-mu-PB1,同时设计对照组p DP-sclb-PB1,并与其余7个质粒共转染MDCK细胞和293T细胞拯救病毒;留取上清接种鸡胚尿囊腔,血凝法检测病毒,TCID50检测病毒滴度;提取病毒RNA,采用RT-PCR扩增病毒c DNA,通过琼脂糖凝胶电泳和核苷酸序列分析鉴定病毒。结果选择PB1片段最优序列(位置83 bp-107 bp),突变片段改变了3个氨基酸,同时有3个碱基不能与Let-7b靶序列配对;酶切鉴定重组质粒构建正确;重组病毒miRT(miRNA target elements)-H1N1和scramble(scbl)-H1N1的血凝效价分别为1∶32和1∶64,病毒滴度为4.68×105TCID50/m L和7.94×104TCID50/m L;测序确认突变病毒包含目的片段。结论构建成功重组病毒株,为进一步的毒力评估实验奠定了基础。
- 谭鸣鸣沈小玥孙文逵夏迪施毅
- 关键词：H1N1流感反向遗传学
