王士峰
- 作品数：23 被引量：41H指数：4
- 供职机构：深圳市计量质量检测研究院更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生农业科学更多>>
- 一种冬虫夏草酶联免疫检测试剂盒及其制备方法
- 本发明提供了一种冬虫夏草酶联免疫检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：S1、冬虫夏草70kDa糖蛋白提取分离；S2、单克隆抗体的制备；S3、酶联免疫检测方法的建立及评估；S4、试剂盒的组装。本发明还提供了一种冬虫夏草酶联免...
- 赖晓芳张世伟赖心田伍聪杨国武李碧芳冯荣虎王士峰马广东王珍妮
- 文献传递
- 杏仁蛋白特异性序列及基于其的快速鉴定二联检测卡
- 本发明公开了杏仁蛋白特异性序列及基于其的快速鉴定二联检测卡，杏仁蛋白氨基酸序列是：RQQRQQPFGRPG。该序列具有很好的免疫原性，可以诱导出效价很好的杏仁蛋白特异性抗体。利用本发明制备的杏仁蛋白特异性抗体和已知的扁桃...
- 张世伟赖心田李碧芳黄静敏王士峰冯荣虎唐栋马广东陈极锋杨国武
- 文献传递
- 一种河豚毒素免疫层析检测卡及其应用
- 本发明提供了一种河豚毒素免疫层析检测卡及其应用，制备所述河豚毒素免疫层析检测卡所用的抗原包括河豚毒素免疫抗原和河豚毒素包被抗原，所述河豚毒素免疫抗原为河豚毒素和KLH蛋白采用对苯二醛交联剂进行交联反应得到；所述河豚毒素包...
- 张世伟杨国武赖心田王士峰冯荣虎林霖谌章舟姚添琪唐栋洪晓明
- 文献传递
- 基于酶联免疫分析的大豆蛋白复合纤维鉴定方法
- 2019年
- 不同蛋白来源的改性纤维成本差异较大,为区分纤维的蛋白来源,建立了一种简单、准确的大豆蛋白复合纤维鉴定方法。根据大豆蛋白现有的氨基酸序列和蛋白交联的位点设计一段特征肽半抗原,将该特征肽段偶联载体蛋白,免疫实验动物,并制备得到特异性单克隆抗体。将优化浓度的抗原包被于酶标版,抗体偶联辣根过氧化物酶,建立针对大豆蛋白复合纤维的酶联免疫吸附实验(ELISA)。该方法采用7M尿素作为提取剂,检出限为1.8%氨基酸含量的大豆蛋白复合纤维,检测时间不超过70 min(含前处理)。该方法对常见的纤维无非特异性识别,纤维染色不会对检测结果造成干扰。
- 张世伟王云发王士峰姚添淇冯荣虎杨国武
- 关键词：大豆蛋白复合纤维酶联免疫吸附实验纤维鉴定
- 间接竞争ELISA检测核桃制品中核桃蛋白含量被引量：1
- 2016年
- 通过核桃蛋白组分分析,确定核桃丰度蛋白。以其作为抗原免疫小鼠,制备可特异性识别核桃蛋白的单克隆抗体,建立间接竞争ELISA检测方法。筛选出一株能稳定分泌抗核桃蛋白的杂交瘤细胞株HT-1,对间接竞争ELISA方法的反应条件进行优化后,建立了检测核桃蛋白的间接竞争ELISA方法,核桃蛋白的检测线性范围在4.664.2μg/mL,IC50为17.2μg/mL,最低检测限为0.67μg/mL。抗体特异性较好,与其他的植物蛋白没有交叉反应。该方法适用于检测核桃制品中的核桃蛋白含量。
- 赖心田冯荣虎张世伟王士峰杨国武
- 关键词：核桃核桃蛋白
- 胶体金免疫层析法快速检测配方羊奶粉中的牛β-乳球蛋白被引量：4
- 2018年
- 建立了一种可快速检测配方羊奶粉中牛β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,β-lg)的胶体金免疫层析检测方法。通过杂交瘤技术制备β-lg单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),半抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC_(50))为5.87μg/mL。将胶体金标记的β-lg mAb包被于金标垫,β-lg和山羊抗小鼠IgG标记于硝酸纤维素膜(nitrocellulose membrane,NC膜)分别作为检测线(T线)和质控线(C线),开发了可检测β-lg的免疫层析试纸条。该试纸条对β-lg的检测限(limit of detection,LOD)值为50μg/mL,与其他基质成分均未产生有效交叉反应,对全脂山羊乳粉中掺杂脱脂牛奶粉(nonfat skim milk,NFSM)、脱盐乳清粉(desalted whey powder,DWP)和乳清蛋白粉(whey protein powder,WPP)的LOD值分别为5%、5%和0.1%。运用该方法对9个市售配方羊奶粉进行分析,检测结果与商品化酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒一致。该方法前处理快速简单,5 min即可裸眼判定结果,可用于配方羊奶粉商品的现场快速检测。
- 王士峰姚添淇冯荣虎胡桂平劳翠瑜张世伟
- 关键词：免疫层析掺杂
- 大豆蛋白饮料中大豆蛋白定量方法研究被引量：1
- 2015年
- [目的]建立基于竞争酶联免疫分析（ELISA）的大豆蛋白饮料中大豆蛋白定量方法。[方法]以变性的大豆球蛋白和β-伴球蛋白为抗原,分别制备抗这2种蛋白的多克隆抗体,构建竞争ELISA方法。分析了9个品系的大豆球蛋白、β-伴球蛋白、可溶蛋白的含量。基于大豆球蛋白与伴球蛋白含量之和与可溶蛋白的比例关系,得出了植物蛋白饮料中大豆蛋白含量的计算方法。[结果]该方法的线性范围均为2.0-80μg/ml（R^2=0.99）,样品前处理使用含有0.1%二硫苏糖醇（DTT）的7 mol/L尿素作为提取液。大豆球蛋白与伴球蛋白含量之和除以系数0.682可换算得到蛋白饮料中大豆蛋白含量,方法的相对标准偏差〈12%。[结论]研究可为其他热加工食品的蛋白特异性定量提供参考。
- 张世伟赖心田王士峰冯龙虎唐栋杨国武
- 关键词：大豆大豆蛋白ELISA
- 荧光微球免疫层析技术定量检测河鲀毒素被引量：7
- 2017年
- 建立河鲀毒素的荧光微球免疫层析检测方法。基于抗体亲和位点保护标记方法制备抗河鲀毒素抗体偶联荧光微球,方法简单稳定,所有结合分离步骤均在亲和柱中完成,避免了亲和位点被破坏而且荧光信号更强,将检测灵敏度提高至原来的8倍左右。所建立的河鲀毒素检测方法IC50为18.4 ng/m L,线性范围为2~200 ng/m L(y=-0.15ln x+0.95,R2=0.98)。检测河鲀样本的最低检出限为10μg/kg,平均相对标准偏差小于25%(n=6)。该方法适用于热加工样品的检测,整个检测过程仅需15 min,且无需使用大型设备,为河鲀餐前速测提供了一定技术手段。
- 张世伟王士峰姚添琪杨国武赖心田
- 关键词：河鲀毒素免疫层析
- 一种冬虫夏草胶体金检测卡及其制备方法
- 本发明提供了一种冬虫夏草胶体金检测卡的制备方法，包括以下步骤：S1、冬虫夏草糖蛋白的分离和纯化；S2、单克隆抗体的制备和纯化；S3、胶体金的制备；S4、抗冬虫夏草糖蛋白抗体胶体金标记物的制备；S5、结合垫的制备；S6、反...
- 李碧芳陈血建赖心田张世伟王士峰冯荣虎伍聪杨国武唐栋陈极锋
- 文献传递
- 一种扁桃仁蛋白的定量检测试剂盒及其制备方法
- 本发明提供了一种扁桃仁蛋白的定量检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：S1、单克隆抗体制备；S2、扁桃仁prunin-1蛋白提取分离；S3、酶联免疫检测方法建立及评估；S4、组装定量检测试剂盒。本发明还提供了一种扁桃仁蛋白...
- 赖心田张世伟黄静敏刘小青杨国武王士峰冯荣虎唐栋陈极锋
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