张世伟
- 作品数:61 被引量:137H指数:7
- 供职机构:深圳市计量质量检测研究院更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目深圳市科技计划项目广东省质量技术监督局科技项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程医药卫生农业科学理学更多>>
- 燕窝唾液酸糖蛋白间接竞争酶联免疫检测方法的建立
- 2022年
- 目的建立间接竞争酶联免疫(indirect competitive enzyme linked immunesorbent assay,IC-ELISA)检测燕窝中唾液酸糖蛋白的分析方法。方法以唾液酸糖蛋白为抗原,制备单克隆抗体,对IC-ELISA步骤中相关参数进行优化,确定最佳反应条件。结果最佳包被抗原为1:2000,抗体稀释倍数为1:5000;封闭液浓度为1%牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),封闭时间为150 min;竞争时间30 min;酶标二抗浓度稀释倍数为1:1000,孵育时间30 min;显色时间为10 min。建立的IC-ELISA检测方法半抑制浓度(50%inhibition concentration,IC_(50))为8.61μg/mL,线性范围为2.23~33.25μg/mL,回收率为82.7%~92.0%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSDs)为1.7%~8.9%。结论该方法灵敏度较高、特异性强,可以有效地鉴别假冒伪劣燕窝产品,具有较好的实际应用价值。
- 何金麟王仍瑞张世伟冯荣虎范群艳柳训才徐敦明
- 食用植物油和地沟油中动物源性成分LAMP检测方法的建立被引量:6
- 2015年
- 建立了食用植物油和地沟油中动物源性成分的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。针对猪、牛、鸡、鸭的线粒体Cytb基因分别设计2条外引物(F3、B3)、2条内引物(FIP、BIP)和2条环引物(FLP、BLP),着重对内引物FIP/BIP、甜菜碱和Mg2+浓度等反应参数进行了优化,扩增产物采用恒温实时荧光法检测。对方法的特异性和灵敏度进行了评价。实验结果表明,在0.2μmol/L外引物(F3和B3)、1.6μmol/L内引物(FIP和BIP)、0.8μmol/L环引物(FLP和BLP)、1 mol/L甜菜碱、6 mmol/L Mg SO4、1.6 mmol/L d NTP、反应温度63℃等参数的优化条件下,上述四种物源性成分的扩增效果最佳,该方法可以检测出动物油脂质量比例为1%及地沟油质量比例为5%的混合油脂中的动物源性成分。本方法对猪、牛、鸡、鸭源性成份的检测具有很高的特异性和灵敏度,可以用于油脂中动物源性成分的检测,为油脂的鉴伪和地沟油的鉴别提供技术支持。
- 谭贵良刘垚李向丽赖心田张世伟
- 关键词:食用植物油地沟油环介导等温扩增动物源性成分CYTB基因
- 燕窝蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析被引量:6
- 2011年
- 燕窝水提及丙酮沉淀蛋白质经液相等电聚焦电泳纯化后,再经双向电泳分离获得了质量较佳的2-DE图谱,由此可见液相等电聚焦电泳是对燕窝蛋白质进行纯化的有效手段。对纯化后的2个白燕窝和1个血燕窝水提及丙酮沉淀蛋白质进行了双向电泳分析,结果显示两种方法制备蛋白质获得的2-DE图谱非常相似。燕窝水提蛋白质经丙酮沉淀制备样品时间较透析、冻干所需的时间短,这对于成分复杂蛋白质提取率较低的血燕窝则更为适用。
- 黄秀丽赖心田张世伟林霖詹家芬林俊芳杨国武
- 关键词:双向电泳
- 基于异源包被的地索奈德间接竞争酶联免疫检测方法被引量:1
- 2022年
- 为监控保健食品和化妆品中地索奈德的滥用情况,本研究建立了地索奈德间接竞争酶联免疫分析方法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。将地索奈德(Desonide,DES)半抗原通过活泼酯法与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,获得地索奈德完整抗原DES-KLH;通过免疫小鼠和细胞融合获得抗地索奈德单克隆抗体。将地索奈德半抗原通过活泼酯法分别与牛血清白蛋白(bovine serumalbumin,BSA)偶联作为包被原,建立地索奈德同源及异源的间接竞争酶联免疫分析方法。在同源包被情况下,地索奈德灵敏度为7.9ng/m L,而DEX异源包下灵敏度为0.72ng/m L。对增强骨密度类保健食品、面霜、精华、眼霜、爽肤水的添加回收率在82%—105%之间。该方法能有效应用于食品和化妆品中地索奈德的快速筛查。
- 谭攀张世伟
- 关键词:糖皮质激素
- 双抗夹心酶联免疫分析法检测食品中鸡蛋过敏原被引量:7
- 2012年
- [目的]建立食品中鸡蛋过敏原的酶联免疫检测方法。[方法]以卵白蛋白为检测对象,分别制备抗卵白蛋白的多克隆和单克隆抗体。将单克隆抗体作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记多克隆抗体为二抗构建卵白蛋白的双抗夹心ELISA方法。[结果]该方法的IC50为260 ng/ml,检出限为10 ng/ml,样品的添加回收率为84.2%~89.8%,相对标准偏差小于10%。[结论]该试验建立的分析方法稳定可靠,能满足食品中鸡蛋过敏原准确、快速的检测需要。
- 张世伟赖心田洪晓明王珍妮李锐杨国武
- 关键词:鸡蛋卵白蛋白单克隆抗体ELISA
- 基于异源包被的曲安奈德竞争酶联免疫检测方法被引量:3
- 2020年
- 为监控曲安奈德的滥用情况,本研究建立了曲安奈德竞争酶联免疫检测方法。将曲安奈德(Triamcinolone acetonide,TCA)半抗原通过活泼酯法与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联获得曲安奈德完整抗原TCA-KLH;通过免疫小鼠、细胞融合及筛选获得一株能够稳定分泌抗曲安奈德的单克隆抗体细胞株,制备并纯化了腹水抗体。将TCA和地塞米松(Dexamethasone,DEX)半抗原通过活泼酯法分别与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联作为包被原,建立曲安奈德同源及异源的间接竞争酶联免疫分析方法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。在同源包被情况下,曲安奈德灵敏度为5.4 ng/mL,而DEX异源包下灵敏度为0.53 ng/mL。未观察该方法到对哈西奈德、布地奈德、安西奈德以外的其他糖皮质激素的交叉反应。在添加回收实验中,使用20%甲醇水溶液提取动物组织的添加回收率在75%~95%之间。该方法能有效应用于动物组织中曲安奈德的快速筛查。
- 王英姿闫剑勇张世伟
- 关键词:糖皮质激素曲安奈德
- 杏仁蛋白特异性序列及基于其的快速鉴定二联检测卡
- 本发明公开了杏仁蛋白特异性序列及基于其的快速鉴定二联检测卡,杏仁蛋白氨基酸序列是:RQQRQQPFGRPG。该序列具有很好的免疫原性,可以诱导出效价很好的杏仁蛋白特异性抗体。利用本发明制备的杏仁蛋白特异性抗体和已知的扁桃...
- 张世伟赖心田李碧芳黄静敏王士峰冯荣虎唐栋马广东陈极锋杨国武
- 文献传递
- 燕窝胶体金免疫试纸条及其制备方法
- 本发明提供一种燕窝胶体金免疫试纸条,包括样品垫、结合垫、反应垫、吸水垫和PVC背衬,所述PVC背衬上依次粘附有样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫;所述结合垫粘附于所述样品垫之上,并与所述反应垫相搭接;所述反应垫与所述吸水垫相...
- 赖心田杨国武张世伟刘小青李芸严琼英陈血剑张秦蕾陈国培陈雁叶秀玲
- 文献传递
- 一种河豚毒素免疫层析检测卡及其应用
- 本发明提供了一种河豚毒素免疫层析检测卡及其应用,制备所述河豚毒素免疫层析检测卡所用的抗原包括河豚毒素免疫抗原和河豚毒素包被抗原,所述河豚毒素免疫抗原为河豚毒素和KLH蛋白采用对苯二醛交联剂进行交联反应得到;所述河豚毒素包...
- 张世伟杨国武赖心田王士峰冯荣虎林霖谌章舟姚添琪唐栋洪晓明
- 文献传递
- 基于酶联免疫分析的大豆蛋白复合纤维鉴定方法被引量:1
- 2019年
- 不同蛋白来源的改性纤维成本差异较大,为区分纤维的蛋白来源,建立了一种简单、准确的大豆蛋白复合纤维鉴定方法。根据大豆蛋白现有的氨基酸序列和蛋白交联的位点设计一段特征肽半抗原,将该特征肽段偶联载体蛋白,免疫实验动物,并制备得到特异性单克隆抗体。将优化浓度的抗原包被于酶标版,抗体偶联辣根过氧化物酶,建立针对大豆蛋白复合纤维的酶联免疫吸附实验(ELISA)。该方法采用7M尿素作为提取剂,检出限为1.8%氨基酸含量的大豆蛋白复合纤维,检测时间不超过70 min(含前处理)。该方法对常见的纤维无非特异性识别,纤维染色不会对检测结果造成干扰。
- 张世伟王云发王士峰姚添淇冯荣虎杨国武
- 关键词:大豆蛋白复合纤维酶联免疫吸附实验纤维鉴定