孙晓雅
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 大鼠骨髓间充质干细胞条件培养基对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响被引量：3
- 2015年
- 目的 观察大鼠骨髓间充质干细胞条件培养基（BMSCs-CM）对人HepG2细胞胰岛素抵抗（IR）的影响,并探讨其分子机制.方法 根据葡萄糖利用情况筛选出最佳造模剂使用浓度及时间;以正常HepG2细胞为空白对照,给予棕榈酸处理的细胞为IR模型组,加入BMSCs-CM为条件培养基（CM）干预组,而加入同样经半透膜浓缩后的低糖培养基作为阴性对照组,分别采用细胞培养、糖原染色、葡萄糖及糖原检测试剂盒等方法来分析各组葡萄糖利用情况;免疫印迹法观察BMSCs-CM对IR HepG2细胞磷酸化的胰岛素受体底物（p-IRS）、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）与磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（p-AKT）蛋白表达的影响;分别加入PI3K抑制剂LY294002及激动剂740Y-P后继续观察上述胰岛素信号蛋白的变化情况.结果 （1）以0.25 mmol/L棕榈酸作用HepG2细胞24 h的方法成功建立IR模型;IR模型组培养液中葡萄糖含量明显高于空白对照组,其细胞内糖原含量也显著减少（P＜0.05）.（2）与IR模型组相比,CM干预组HepG2/IR葡萄糖的摄取与利用明显改善（P＜0.05）,而在阴性对照组则差异没有统计学意义.（3）CM干预组p-IRS、PI3K与p-AKT的蛋白表达水平显著高于IR模型组（P＜0.05）;而在加入LY294002阻断PI3K后,给予BMSCs-CM后PI3K及p-AKT蛋白含量则未增加;进一步加入740Y-P过度激活PI3K后,则这些蛋白的表达水平较IR模型组显著升高.结论 大鼠BMSCs-CM的胰岛素增敏作用与p-IRS、PI3K与p-AKT蛋白的表达增强有关.
- 孙晓雅郝好杰韩为东母义明
- 关键词：间质干细胞胰岛素抗药性HEPG2细胞
- 间充质干细胞条件培养基通过NLRP3炎症小体增加胰岛素敏感性的机制研究
- 目的:①探讨分离大鼠骨髓间充质干细胞的方法并鉴定其相关表型，收集培养的上清液并将其制备成浓缩条件培养基保存备用。②证实NLRP3炎症小体及其下游分子在游离脂肪酸(FFA)和脂多糖(LPS)诱导HepG2细胞胰岛素抵抗过程...
- 孙晓雅
- 关键词：胰岛素抵抗信号蛋白间充质干细胞
- 文献传递
- 短发夹RNA慢病毒载体稳定抑制NLRP3表达的HepG2细胞的构建
- 2015年
- 目的:构建针对NLRP3基因的短发夹RNA(sh RNA)慢病毒表达载体,在Hep G2细胞中鉴定该载体对NLRP3的抑制效果。方法:设计针对NLRP3基因的sh RNA序列,将其插入慢病毒表达载体p WPT-U6-sh RNA-CMV-GFP中,将载体与包装质粒ps PAX2、p MD2.G共转染293T细胞,进行病毒包装;得到的病毒原液浓缩后系列稀释为9个浓度递减的病毒液,分别转染293T细胞后进行滴度测定;用获得的慢病毒液感染人肝癌细胞系Hep G2,获得稳定沉默NLRP3的细胞株;利用实时定量PCR和Western印迹检测稳定细胞株中NLRP3的沉默效应。结果:构建了具有沉默效应的慢病毒干扰载体;稀释法测定干扰病毒滴度为2×108TU/m L;实时定量PCR和Western印迹实验均证实慢病毒转染后,细胞株中NLRP3表达水平明显降低。结论:构建了人NLRP3基因特异性慢病毒干扰载体,获得NLRP3基因稳定干扰的Hep G2细胞株。
- 孙晓雅韩庆旺宋晓艳何文俊郝好杰韩为东母义明
- 关键词：NLRP3短发卡RNA慢病毒载体HEPG2细胞
- 胰高血糖素样肽1对胰腺β细胞的作用及其机制被引量：4
- 2015年
- 胰高血糖素样肽1(GLP-1)是一种主要由肠道L细胞分泌的肠促胰素。GLP-1能通过葡萄糖依赖模式刺激胰岛素的分泌,同时有延缓胃排空、抑制胰高血糖素分泌、降低体重的作用,有利于维持体内血糖稳态。目前,基于GLP-1的药物作为新的糖尿病治疗手段已越来越受到重视。我们简要综述GLP-1对胰腺β细胞的作用及机制研究进展。
- 宋晓艳何文俊孙晓雅郝好杰韩为东母义明
- 关键词：胰高血糖素样肽-1Β细胞糖尿病
