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何文俊: 作品数：35 被引量：26H指数：3; 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学矿业工程更多>>

合作作者

搅拌式生物反应器培养促进拟胚体的形成及其向心肌细胞分化: 目的：摸索搅拌式生物反应器培养小鼠胚胎干细胞(mESC)的最佳条件,建立一种批量制备拟胚体(EB)的方法。方法：研究mESC不同接种密度及生物反应器初始搅拌速度对EB形成的数量和质量的影响,以细菌培养皿中形成的EB为对照...; 何文俊付小兵; 文献传递

癌症化学预防的分子靶标: 2009年; 乙肝病毒和人乳头状瘤病毒分别是肝细胞癌和子宫颈癌的风险因素,针对这2种病毒感染的疫苗已在临床上成功用于癌症化学预防。分子靶向药物能够预防乳腺癌(雷洛昔芬与他莫昔芬)、大肠腺瘤(塞来昔布)和前列腺癌(非那雄胺)。然而,化学预防广泛应用于临床还不现实。分子靶标的深入研究将扩展化学预防的范围并使其个性化。; 何文俊田佳鑫秦红霖William WN JrHeymach JYKim ES; 关键词：癌症化学预防分子靶标靶向药物

短发夹RNA慢病毒载体稳定抑制NLRP3表达的HepG2细胞的构建: 2015年; 目的:构建针对NLRP3基因的短发夹RNA(sh RNA)慢病毒表达载体,在Hep G2细胞中鉴定该载体对NLRP3的抑制效果。方法:设计针对NLRP3基因的sh RNA序列,将其插入慢病毒表达载体p WPT-U6-sh RNA-CMV-GFP中,将载体与包装质粒ps PAX2、p MD2.G共转染293T细胞,进行病毒包装;得到的病毒原液浓缩后系列稀释为9个浓度递减的病毒液,分别转染293T细胞后进行滴度测定;用获得的慢病毒液感染人肝癌细胞系Hep G2,获得稳定沉默NLRP3的细胞株;利用实时定量PCR和Western印迹检测稳定细胞株中NLRP3的沉默效应。结果:构建了具有沉默效应的慢病毒干扰载体;稀释法测定干扰病毒滴度为2×108TU/m L;实时定量PCR和Western印迹实验均证实慢病毒转染后,细胞株中NLRP3表达水平明显降低。结论:构建了人NLRP3基因特异性慢病毒干扰载体,获得NLRP3基因稳定干扰的Hep G2细胞株。; 孙晓雅韩庆旺宋晓艳何文俊郝好杰韩为东母义明; 关键词：NLRP3 短发卡RNA 慢病毒载体 HEPG2细胞

禽类多能干细胞的研究与应用被引量：1: 2009年; 禽类多能干细胞是一种未分化的细胞,来源于X期未孵化的胚盘细胞或5.5 d性腺的原始生殖细胞,具有自我更新能力,并能分化为所有类型细胞,包括生殖系。禽类多能干细胞最重要的应用就是在体外对其基因组进行特异性修饰,用来制备转基因禽类。禽类多能干细胞的培养已取得显著进步,随着对其多能性分子基础等研究的深入,禽类多能干细胞也将得到充分运用。综述了禽类多能干细胞的培养方法、生物学特性及其应用进展。; 何文俊叶玲玲陈昭烈; 关键词：禽类胚胎干细胞胚胎生殖细胞原始生殖细胞嵌合体

FDA医疗器械境外临床研究的监管要求及启示被引量：3: 2016年; 目的:探讨美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration,FDA)对医疗器械境外临床研究的监管要求,为我国相关从业人员提供参考和借鉴。方法:通过介绍美国法规中针对医疗器械境外临床研究的条款和FDA发布的涉及境外临床研究的指导原则,了解FDA对医疗器械境外临床研究的监管要求,从而在此方面为我国相关监管部门提出启示。结果:相关监管部门在接受医疗器械境外临床研究资料时,需考虑临床医疗条件、临床研究人群、临床研究监管要求等多方面的差异。结论:我国相关监管部门可借鉴FDA接受境外临床研究结果的经验,结合我国相关法规要求和实际情况,在确保产品安全有效的前提下,细化接受进口医疗器械提交境外临床试验资料的接受标准和要求。; 田佳鑫何文俊侯倩; 关键词：医疗器械

基于枯草芽孢杆菌生物素连接酶的外源基因诱导表达调控系统及其构建方法: 本发明公开了一种新型的真核细胞基因表达调控，该系统以枯草芽孢杆菌生物素连接酶与转录激活结构域的融合蛋白为调控元件，在生物素存在下可激活弱化启动子下游目的基因的转录。该系统具有背景表达较低、诱导率较高、响应迅速等优点，可适...; 叶玲玲陈昭烈李世崇刘红何文俊刘兴茂王启伟; 文献传递

基于胚胎干细胞的心肌组织工程研究: 本研究先后以胚胎干(ES)细胞、核移植来源的胚胎于(ntES )细胞作为种子细胞，以液态I型胶原为支架开展了心肌组织工程再造研究。具体研究包括以下二个部分:I、以ES细胞为种子细胞来源构建组织工程化心肌组织;么以ntES...; 吕双红何文俊郭希民李颖李延民段翠密江红王常勇; 关键词：心肌组织胚胎干细胞种子细胞; 文献传递

一种基于三顺反子表达载体的生物素诱导表达系统的建立: 2011年; 目的:建立一种以无毒的生物素为诱导剂的哺乳动物细胞诱导表达系统。方法:通过基因组PCR或重叠延伸PCR获得该系统的三个基本构件:大肠杆菌生物素连接酶(BirA)、链亲和素-四环素依赖的抑制因子融合蛋白(SA-TetR)和生物素化信号-VP16转录激活结构域融合蛋白(Avitag-VP16)。将上述基因连入三顺反子表达载体,与响应载体一起共转染293f细胞,以EGFP为报告基因,检测EGFP荧光强度随培养体系中生物素浓度变化的情况。结果:随着生物素浓度的增加,目的基因表达出现OFF-ON-OFF的变化,诱导状态下的EGFP荧光强度约为抑制状态下的3倍。结论:可通过调节生物素浓度对目的基因的表达进行可逆的调节,该系统是一种有应用前景的诱导表达系统。; 叶玲玲李世崇刘红刘兴茂何文俊陈昭烈; 关键词：生物素哺乳动物细胞诱导表达系统 EGFP

抗坏血酸体外诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化被引量：4: 2007年; 目的:探讨抗坏血酸作为诱导剂对小鼠胚胎干细胞(mESC)分化为心肌细胞的影响,建立一种体外诱导mESC分化为心肌细胞的实验方法。方法:采用直接悬浮培养法使mESC形成拟胚体(EBs),用含不同浓度抗坏血酸的分化培养基对其进行诱导分化,摸索最佳的诱导分化条件。结果:抗坏血酸诱导mESC分化为心肌细胞的最佳浓度为0.1mg/ml,约为70%的EBs出现跳动的心肌合胞体,显著高于不添加任何诱导剂的对照组。抗坏血酸诱导产生的心肌细胞表达多种心肌蛋白,具有心肌细胞的结构特征。结论:抗坏血酸能够促进mESC向心肌细胞分化,应用抗坏血酸体外诱导mESC向心肌细胞分化是一种较为理想的体外诱导方法。; 何文俊王晶波王常勇段翠密李晶吕双红; 关键词：抗坏血酸胚胎干细胞细胞分化

心肌组织工程研究进展被引量：2: 2009年; 心肌组织工程的目的在于利用体外构建的组织修复、替换及再生受损心肌。我们综述了心肌组织工程中的最新方法及其在体内的初步应用,讨论了心肌组织工程的细胞来源和支架材料,提出了现存障碍。心肌组织工程的替代治疗具有极其诱人的前景,但是它还处于早期阶段,仍然需要对其真正的价值做出合适的评价。; 何文俊陈昭烈; 关键词：心肌细胞干细胞