申秀银
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中山大学中山医学院人体解剖学教研室更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HuD在N2aAPP细胞和APP/PS1转基因小鼠中的表达
- 2018年
- 目的研究RNA结合蛋白HuD在AD细胞和动物模型中的表达水平,探讨HuD与AD的关系;明确PI3K/AKT通路对神经细胞HuD表达的调控作用。方法免疫荧光检测HuD在C57BL/6小鼠脑组织中的表达水平;构建过表达APP的N2a APP细胞模型,Western blot检测HuD的表达情况;购买APP/PS1转基因小鼠,Western blot检测HuD在脑组织中的表达情况;应用LY294002处理3种神经细胞(N2a、SH-SY5Y和HT22),阻断PI3K/AKT通路,观察该通路对HuD的调控作用。结果 HuD在整个C57BL/6小鼠脑组织中均有表达,且在海马体的颗粒细胞尤为明显;在N2a APP细胞,HuD的表达水平明显低于对照组;APP/PS1转基因小鼠脑组织中的HuD水平也低于野生对照鼠;LY294002处理下调了HuD在神经细胞中的表达水平。结论 HuD在N2a APP细胞和APP/PS1转基因小鼠中均呈低表达;HuD在神经细胞中受PI3K/AKT通路的调控,为研究HuD与AD的关系及寻找新的AD诊断和治疗靶点提供了理论基础。
- 欧阳婷申秀银王芬王胜罗涛汪华侨
- 关键词：HUD阿尔茨海默病
- 药根碱促进N2aAPP细胞线粒体自噬的初步证据被引量：1
- 2019年
- 目的探讨药根碱作用于AD细胞模型后,其线粒体自噬的超微结构变化。方法以N2a细胞作为对照组,N2aAPP细胞作为实验组,采用不同浓度的(5μmol/L和10μmol/L)药根碱分别作用于N2aAPP细胞和N2a细胞,24 h后收集细胞,进行活性氧检测和透射电镜观察。结果 N2aAPP组活性氧量最高,多于N2a组,差异有统计学意义(P<0.01);加药根碱处理24 h后,N2aAPP+5μmol/L JAT组和N2aAPP+10μmol/L JAT组活性氧均有减少,与N2aAPP组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组N2a细胞组相比,N2aAPP细胞线粒体自噬的溶酶体与自噬小体较少,与N2aAPP细胞组相比,N2aAPP+5μmol/L JAT组和N2aAPP+10μmol/L JAT组的自噬溶酶体和自噬小体数量则相对增多。结论药根碱可能促进N2aAPP细胞的自噬溶酶体和自噬小体的增加,以促进线粒体自噬的降解。
- 王芬罗涛申秀银欧阳婷王胜张敏汪华侨
- 关键词：药根碱自噬线粒体活性氧
- AD病人血清及表观遗传学药物处理后SK-N-SH细胞培养上清中蛋白二级结构的圆二色谱分析
- 2020年
- 目的观察阿尔茨海默症(AD)病人血清及不同表观遗传学药物处理后的SK-N-SH细胞培养液中蛋白二级结构的变化情况。方法采用圆二色谱法(CD)对AD病人及正常老人血清中蛋白二级结构进行检测分析;对Aβ25-35处理前、后人神经瘤母细胞(SK-N-SH)上清中的蛋白二级结构进行对比分析;分别对DNA甲基化转移酶抑制剂脱氧氮杂胞苷(DAC)及去乙酰化抑制药物曲古抑菌素A(TSA)处理后SK-N-SH细胞上清中的蛋白二级结构进行分析比较。结果①AD病人和正常对照样本血清样本中,二者大分子结构具有明显变化。与正常对照组相比,AD病人的血清中Helix和Random的结构成分明显降低,而Beta和Turn的结构成分则显著升高(P<0.05,或P<0.01);②经过Aβ25-35处理2 d后,SK-N-SH细胞培养液中Helix和Turn结构的含量显著降低(P<0.05),而Beta结构则明显增高(P<0.05);③不同的表观遗传学药物及不同的处理时间对细胞培养环境中大分子结构的影响不同,其中对于Helix和Beta结构的影响尤为显著。经DAC、TSA或DAC/TSA联合药物处理2 d后,在导致SK-N-SH细胞培养液中Helix结构显著下降的同时,Beta水平较对照组均显著上调(P<0.05)。结论①AD病人血清中蛋白二级结构的变化可能与其发病或病理过程有关。②Aβ25-35的细胞毒性与细胞培养液中Beta构型的增加可能存在一定的关系,并且它们也可能参与了AD的病理过程。③DAC/TSA药物单独作用或二者联合作用,均可引起SK-N-SH细胞培养液中大分子二级结构的改变,这可能与药物或其引起的生理功能的改变有关。
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- 关键词：Β-淀粉样蛋白
- 西红花酸联合顺铂协同抗肿瘤作用及其机制
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- APP基因转染SK-N-SH细胞中阿尔兹海默病相关基因表达水平的变化被引量：2
- 2015年
- 目的探讨淀粉样前体蛋白(APP)表达对AD相关基因表达水平的影响。方法构建APP基因的真核表达质粒,并转染人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞,实时定量PCR法检测转染细胞中SIRT1、Tau、PS1、PS2及Apo E4的表达水平变化。结果成功构建了APP基因的真核表达载体,相对于空载体转染组,转染24、48 h时APP基因的过表达对SK-N-SH中SIRT1基因的表达具有明显的抑制作用(P<0.01、P<0.05);对Apo E4的表达水平有一定的上调作用(P<0.001)。转染24、48 h时,PS2基因的表达水平均有一定的上调,但均未发现差异有统计学意义(P>0.05)。转染24 h时,对PS1有上调趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),转染48h时,则有下调作用(P<0.05)。对Tau,转染24 h时有明显的上调作用(P<0.001),但转染48 h时,则有下调趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。相对于空载体转染组,APP基因转染组的细胞活力显著降低。结论 APP基因的过表达对SK-N-SH细胞中SIRT1基因的表达具有明显的抑制作用;对Apo E4、PS2的表达水平有一定的上调作用,对Tau、PS1的表达水平有上调和下调作用不一,表明这些基因之间存在密切关系和对AD病理机制影响的复杂性,这为揭示不同AD相关基因之间的相互影响及调控机制提供一定的实验证据。
- 侯亚萍罗涛李声申秀银周跃周令麒汪华侨
- 关键词：淀粉样前体蛋白阿尔兹海默病
- 西红花酸对骨肉瘤MG63细胞的影响及其作用机制被引量：2
- 2015年
- 目的探讨西红花酸对人成骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响及其作用机制。方法以0、50、100、200、400μmol/L不同浓度西红花酸处理人成骨肉瘤MG63细胞48 h后,用倒置显微镜观察MG63细胞形态的变化;用MTT法检测其对MG63存活率的影响;用划痕实验观察其对MG63细胞迁移能力的影响;用Western blot法检测其对MG63细胞中bcl-2、Caspase-3、P53、P21等凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果不同浓度西红花酸作用48h后,倒置显微镜观察到MG63细胞呈现凋亡的形态结构;MTT结果显示随着西红花酸浓度从0增加到400μmol/L,MG63细胞的存活率由(100±9.5)%减少为(26.8±4)%,且与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);划痕实验可见经西红花酸处理细胞后MG63细胞的迁移能力降低;Western blot结果提示不同浓度经西红花酸(0、50、100、200μmol/L)作用MG63细胞后,其bcl-2/β-actin的灰度比值从(56.09±4.36)%降至(18.78±1.20)%,p21/β-actin、Caspase-3/β-actin、P53/β-actin的灰度比值分别由(28.61±1.71)%、(13.90±1.65)%、(21.18±1.95)%增至(71.37±2.46)%、(112.36±2.97)%、(97.43±3.48)%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01),且均呈浓度依赖性。结论西红花酸能够促进MG63细胞凋亡并抑制其增殖,其机制可能与抑制凋亡基因bcl-2表达下调和促进凋亡的基因caspase3、p53、p21基因表达上调的调节有关。
- 周跃罗涛李声申秀银周令麒汪华侨
- 关键词：西红花酸细胞增殖细胞凋亡
