戴晓峰
- 作品数：13 被引量：35H指数：3
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学轻工技术与工程更多>>
- 高通量培养技术在生物过程研发中的应用进展被引量：3
- 2015年
- 对近年来高通量培养技术在质量源于设计（Qb D）驱动下的研究进展与应用进行了阐述,重点对一些从DNA到大规模生产的放大过程中能够缩短培养时间并广泛应用于工业生产的高通量培养技术进行了详细介绍。这些技术主要包括微孔板（MTP）培养、微型生物反应器、平行发酵系统等,
- 孙杨聂简琪白仲虎杨艳坤戴晓峰
- 关键词：生物过程发酵系统微孔板微流控微流体微型反应器
- 大肠杆菌中dAb一级结构与可溶性表达关联
- 2017年
- 抗体类药物研发是药物发展的一个重要研究方向,目前已有许多抗体在原核表达体系中成功表达。人们通常采用"试错法"优化表达系统,提高蛋白质产量,但该方法费时费力且成功率低,因此迫切需要探索氨基酸组成与蛋白质可溶性表达水平之间的关联,以指导表达系统的选择或蛋白质分子的定向改造。在单域抗体dAb分子的C端末尾添加一个氨基酸,发现单个氨基酸的改变足以引起蛋白质可溶性表达量发生显著变化。通过层次聚类、Cluster Omega对dAb氨基酸序列与表达水平分别进行分类,发现两者分类一致的比例达到70%,证明了氨基酸序列与蛋白质表达水平间的关联。通过对65个CDR随机突变的dAb分子进行线性建模分析其可溶性表达量,发现对dAb胞外质量分数有显著影响作用的氨基酸组合为S(丝氨酸),R(精氨酸),N(天冬酰胺),D(天冬氨酸),Q(谷氨酰胺),Y(酪氨酸),F(苯丙氨酸),G(甘氨酸),对dAb胞内质量分数有显著影响作用的氨基酸组合为G,R,C(半胱氨酸),N,S,Y,K(赖氨酸),A(丙氨酸),对dAb蛋白质总量有显著影响的组合为R,S,G,N,Y,C,Q,F,T(苏氨酸)。其中R、S和G的含量显著影响dAb的可溶性表达量且该影响不受分布位置的影响。蛋白质的极性亦是其可溶性表达水平的显著影响因素。
- 郭雯雯刘萌刘萌杨艳坤戴晓峰
- 关键词：DAB氨基酸组成可溶性表达聚类分析
- RNA-Seq探索基底型乳腺癌干细胞差异表达基因被引量：1
- 2018年
- 基底型乳腺癌许多特性与肿瘤干细胞十分相似,为筛选出基底型乳腺癌的关键靶点,从乳腺癌干细胞入手,采用乳腺癌干细胞标志物CD44^+ CD24^(-/low)流式分选HCC1937和SUM149PT乳腺癌细胞系的干细胞及非干细胞,利用高通量转录组测序筛选干细胞和非干细胞差异表达的基因,并对其进行相关生物信息学分析,最后随机选取部分差异表达基因进行qRT-PCR验证。结果表明筛选出的关键差异表达基因共134个,其中39个基因在干细胞中上调,95个基因下调。从生物过程、细胞组分、分子功能3方面GO功能分类表明,差异基因富集最显著的条目分别是胞外基质组成、胞外区、过氧化物酶活性,KEGG富集发现差异表达基因最显著富集的通路是肿瘤相关通路,qRT-PCR结果表明差异表达基因在干细胞中的表达趋势与转录组测序结果一致。通过对肿瘤干细胞全转录组水平进行研究,筛选其关键差异表达基因,为揭示肿瘤干细胞的分子机制以及基底型乳腺癌的靶向治疗奠定了理论基础。
- 李婷李璐李璐戴晓峰白仲虎
- 关键词：转录组测序
- 建立表达犬NECTIN4的牛源细胞株用于培养犬瘟热病毒
- 2019年
- NECTIN4是犬瘟热病毒的受体之一。通过在牛肾MDBK细胞株中表达NECTIN4,建立MDBK-N4细胞株用于培养犬瘟热病毒。接种犬瘟热病毒后,MDBK-N4细胞能够扩增病毒并产生细胞病变,这说明病毒受体的表达增强了病毒与细胞膜表面的结合能力,进而改变细胞对病毒的敏感性。这一发现为工业疫苗生产细胞株的开发提供了新的思路。
- 杨思鸣蔡东焱孙曼曼陈霄戴晓峰戴晓峰
- 关键词：犬瘟热病毒受体
- 科学研究前沿进展促进细胞生物学教学质量的提高被引量：2
- 2016年
- 当今生命科学迅速发展,细胞生物学是生命科学领域中的一个重要基础学科,它包含的内容和研究技术在不断更新中。教师有必要将科学研究前沿进展纳入细胞生物学的教学内容中,紧贴时代发展。本文概述了细胞生物学教学内容纳入科学研究前沿进展后在教学改革中的一些探讨。
- 刘秀霞杨艳坤何东旭戴晓峰白仲虎
- 关键词：细胞生物学教学改革
- 低温大气压等离子体激活培养基选择性杀伤三阴性乳腺癌细胞被引量：2
- 2019年
- 低温大气压等离子体(CAP)近年来作为一种新兴的抗癌手段逐渐为人们所熟知。三阴性乳腺癌在多种乳腺癌亚型中恶性程度最高,由于缺少有效的治疗手段导致预后很差。发现等离子体激活的培养基(PAM)能够选择性抑制三阴性乳腺癌细胞增殖和迁移能力,而对正常细胞和非三阴性乳腺癌细胞影响较小,同时PAM能够抑制MDAMB231中原本高度激活的JNK的磷酸化程度。因此推测累积的基因组突变和高度激活的MAPK/JNK信号通路使三阴性细胞更容易被PAM杀死。研究提出了CAP杀伤作用与乳腺癌亚型之间的相关性,并且为探索CAP选择性杀死三阴性细胞的机制提供了前期基础。
- 项良剑徐潇宇张硕蔡东焱戴晓峰
- 关键词：乳腺癌细胞凋亡细胞迁移JNK
- 生物过程工程研究在创新生物医药开发中应用的驱动力--生物反应器被引量：6
- 2016年
- 近年创新生物医药在生物产业中的比重逐渐增大,也给生物产业带来了巨大的经济效益,靶点筛选及分子构建等上游技术的进步是促进生物医药进步的主要原因。随着目前细胞培养技术在生物医药生产中的广泛应用,对细胞培养技术的要求也不断提高,同时细胞培养技术的实现载体——生物反应器的技术改进和创新也越发凸显其重要性。本文介绍了生物反应器在创新生物医药产业中的应用种类、发展趋势及发展驱动力,回顾了全球范围内新型生物反应器的发展成果,包括新型反应器技术及过程分析技术在生物医药中的应用,最后,分析了中国生物反应器的发展现状与问题,指出了生物反应器的发展与进步应以提高生物培养过程的稳定性最终提高产品的质量而不是以提高产量为主要目标。本文详细阐述现代生物反应器技术及基于"质量源于设计"的质量控制理念在其中所起到的关键作用,以及生物反应器的技术发展的现状和未来走向。
- 孙杨聂简琪刘秀霞杨艳坤戴晓峰白仲虎
- 关键词：生物反应器生物工程微反应器
- 转录因子FOXA1在乳腺癌分子分型中的功能研究被引量：8
- 2017年
- 乳腺癌作为高度异源性的疾病,其准确的分子分型对于乳腺癌预后判断和制定合理的治疗方案都具有十分重要的临床意义。通过前期生物信息学分析认为foxa1在乳腺癌中具有重要的分子分型作用,利用免疫印迹法及实时定量PCR方法在涵盖4个乳腺癌亚型的10个乳腺癌细胞株中检测FOXA1的mRNA及蛋白表达水平情况,探索其与乳腺癌分子亚型之间关联,以及在肿瘤发生、发展及预后中的意义。结果显示,FOXA1的mRNA和蛋白表达量在乳腺癌Luminal A型和Luminal B型中显著高于其在Her2过表达型和三阴性型乳腺癌细胞株中的表达量。通过对其他促进细胞生长的重要基因表达量的关联分析以及基因沉默实验,发现FOXA1是介于GATA3和ER的关键调控元素,其高表达能够抑制细胞增殖。研究提出foxa1可以作为辅助分子对乳腺癌进行精准分型,验证了前期的生物信息学结论,推动了乳腺癌精准医学的发展。
- 白仲虎李璐戴晓峰
- 关键词：乳腺癌分子分型转录因子
- 生物反应器中表达ScFv大肠杆菌细胞自溶的分析被引量：2
- 2016年
- 表达外源蛋白细菌培养过程中的细胞自溶现象是一个普遍性的过程工程问题。在相同发酵培养条件下,研究生物反应器中大肠杆菌W3110表达全人源化单链抗体片段(Single chain antibody fragments,ScFv)工程菌和野生菌的外源蛋白表达及细胞活性的差异,发现外源蛋白高效表达并积累在细胞内,大部分活细胞较野生菌提前6 h进入活着但不可培养(Viable but nonculturable,VBNC)状态,进而发生细胞自溶。分析工程菌与野生菌中胁迫应激和自溶途径基因转录水平表达谱,发现外源蛋白表达过程中热激途径rpo H,dna K,dna J,gro EL,gro ES;酸胁迫途径rpoS,gadE,gadX;氧胁迫途径sodA,katE均出现表达波峰,而发酵罐中细胞自溶过程中外膜蛋白基因ompA,ompC,ompW,ompX表达量显著下降,但rpoE并未出现持续高表达。这些发现为后续ScFv表达宿主细胞抗胁迫和自溶控制策略提供了新思路。
- 胡卫国安展飞刘秀霞戴晓峰杨艳坤白仲虎
- CAR-T细胞疗法的自动化设备及展望被引量：1
- 2017年
- 嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞疗法是近年来发展非常迅速的一种细胞治疗技术。通过从患者或者捐献者外周血分离获得T细胞,并进一步激活、基因修饰、扩增从而获得CAR-T细胞,洗涤浓缩后回输患者体内进行治疗。修饰后的T细胞肿瘤靶向性、杀伤活性更强,在血液肿瘤疾病临床试验中疗效明显,在实体瘤的临床试验中也崭露头角。CAR-T细胞疗法整个过程的安全性、无菌性、纯度等质量控制极其重要。确保CAR-T细胞疗法生产过程的标准化、封闭化与自动化,做到药效和风险可控是首要任务。对CAR-T细胞疗法工艺与自动化设备以及面临的工程化问题进行综述,以期为CAR-T细胞疗法工程化提供参考。
- 聂简琪聂简琪杨艳坤孙杨刘秀霞杨艳坤白仲虎
- 关键词：细胞治疗自动化设备工程化
