肖凤君
- 作品数：5 被引量：8H指数：1
- 供职机构：解放军第307医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TRAIL胞外段基因克隆及其表达与纯化被引量：1
- 2002年
- 目的:克隆TNF相关的诱导凋亡配体胞膜外段基因（the extracellular regionof the human TRAIL cDNA,TPAILex）,构建表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达有生物学活性的TRAIL蛋白胞膜外段。方法:抗CD3McAb刺激正常人外周血淋巴细胞,用RT-PCR、巢式-PCR方法从活化的淋巴细胞中获得人TRAIL基因及其胞膜外段oDNA,并克隆到pGEM-T Easy载体中,DNA测序鉴定。将TRAIL的胞膜外段基因插入表达载体pGEX-2T,构建重组表达质粒pGEX/TRAILex,用IPTC诱导表达TRAIL蛋白的胞膜外段,GST-Agarose4B层析柱纯化 GST-TRAILex融合蛋白,Western-blot鉴定纯化产物。结果:抗CD3 McAb能诱导正常人外周血单个核细胞TRAIL的高表达,成功地克隆了TRAIL胞膜外段基因,构建了重组表达载体pGEX/TRAILex,IPTG诱导后得到高效表达的TRAIL蛋白胞膜外段,经12％SDS-PAGE分析,可观察到一分子量和理论值相符（约54kD）的诱导表达带。Kodak软件分析表面GST-TRAIL胞膜外段融合蛋白的表达量占菌体蛋白总量的28％,进一步分析证实TRAIL蛋白的胞膜外段主要以可溶性的形式表达,用GST-Agarose4B层析柱纯化超声破菌后的上清,每升细菌培养液可得到9.8mg纯度的95％以上的GST-Tex。Western-blot结果证实54kD的表达带可与鼠抗TRAIL McAb起特异性反应。结?
- 周海胜田方肖凤君张立新李克勤
- 关键词：基因克隆基因表达蛋白质纯化肿瘤生物治疗
- TNF相关的凋亡诱导配体表达、纯化及其功能初步分析
- TNF 相关的诱导凋亡配体（TNF-Related Apotosis Induced -Ligand,TRAIL）是 TNF 超家族中一种新成员,也是一种Ⅱ型跨膜蛋白,与 Apo-1L（FasL）有较高的同源性,又称为 ...
- 周海胜田方肖凤君张立新李克勤
- 关键词：TRAIL基因克隆细胞凋亡融合蛋白表达
- 文献传递
- CD147与子宫内膜异位症的相关性研究被引量：7
- 2001年
- 目的 :探讨和比较免疫球蛋白超家族分子CD147在子宫内膜异位症患者异位子宫内膜、在位子宫内膜及健康人子宫内膜中表达及定位。方法 :采用免疫组化方法对 30例异位子宫内膜及其 18例同期在位子宫内膜和 15例健康人子宫内膜组织中的CD147的表达进行观察。结果 :异位子宫内膜标本中CD147表达增强 ,以膜分布为主 ;而无论有无子宫内膜异位症 ,在位子宫内膜中CD147表达无差异。结论 :CD147分子表达在异位子宫内膜和正常子宫内膜存在明显差异。CD147可能与子宫内膜异位症的发生密切相关。
- 王丽李亚里田方孟元光肖凤君许道江
- 关键词：子宫内膜异位症免疫球蛋白类免疫组织化学CD147
- 人基质金属蛋白酶抑制剂-4（TIMP-4）的重组表达、基因转染和抗肿瘤转移生物学性质研究
- ＜正＞ 目的:肿瘤细胞发生侵袭和转移与蛋白水解酶水解胞外基质成分密切相关,其中,基质金属蛋白酶（ma-trix metalloproteinases,MMPs）是参与此过程的一个关键性蛋白酶。人体内有组织型基质金属蛋白酶...
- 李克勤李春海肖凤君田方Yuenian Eric Shi
- 文献传递
- CD147在子宫内膜癌的表达及意义
- 子宫内膜癌（endometrial carcinoma）,因其以内膜腺癌为主, 又称子宫内膜腺癌。在我国,内膜癌发病率居妇女生殖道恶性肿瘤第二位。近年来,子宫内膜癌的发病率有上升的趋势。为了研究子宫内膜癌发生的分子生物学...
- 肖凤君田方孟元光王丽李亚里
- 文献传递
