张立新
- 作品数：54 被引量：257H指数：9
- 供职机构：安阳市肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MUC1抗体BC2的纯化研究
- 2005年
- 目的为了得到较高纯度的MUC1抗体BC2。方法应用RESOURSEQ离子交换柱进行阴离子交换层析 ,对腹水中的MUC1单抗BC2进行纯化。结果所得BC2抗体纯度约为 90 %。结论所获得高纯度的BC2抗体可做为筛选配基 ,用于下一步噬菌体随机肽筛选MUC1抗原模拟表位。
- 杨清浩王祥卫金燕张立新
- 关键词：抗体
- MUC1黏蛋白模拟表位的筛选和原核表达被引量：2
- 2006年
- 目的从噬菌体随机12肽库中筛选出MUC1抗原的模拟表位,构建MUC1模拟表位的原核表达载体。方法通过生物淘洗、基因测序和氨基酸序列比较,筛选出模拟表位,构建重组表达质粒PET-31b(+),用IPTG诱导表达,亲和层析纯化,W estern b lot鉴定其抗原性。结果筛选到的模拟表位与MUC1单克隆抗体的亲和力较强。成功构建了重组表达质粒,重组蛋白在BL21(DE3)p lysS中得到诱导表达,纯化的目的蛋白在SDS-PAGE上呈现特异的单一条带,W estern印迹也检测到目的蛋白特异条带。结论筛选到了MUC1的模拟表位,成功表达和纯化了MUC1模拟表位蛋白,为研究其在肿瘤疫苗方面的应用奠定基础。
- 崔志刚宋波张立新路浩军李春海
- 关键词：MUC1噬菌体表面展示模拟表位克隆
- 细胞测量在食管癌前病变分级诊断中应用的结果及癌前病变的阻断性治疗
- 1994年
- 食管癌是我国常见肿瘤之一,其危害极大,因此对癌前病变的分级诊断,进行预防性治疗,降低癌的发病率是十分重要的研究课题。作者采用细胞测量方法对癌前病变分级:
- 杨怀华张三申肖郑生郭梅赵子贞王丽娟张立新朱桂林赵成生刘永义
- 关键词：癌前病变癌细胞核服药量死亡登记登记报告维胺脂
- P-糖蛋白抗原表位分析及表达被引量：1
- 2003年
- 目的 :研究P 糖蛋白抗原表位和表达。方法 :联合应用多种方法对P 糖蛋白的二级结构和表面特性进行分析 ,设计了一对引物 ,PCR扩增产物插入到 pGEM T中 ,经测序正确后 ,再克隆入表达载体 pGEX 2T ,构建高效表达载体 pGEX Pgp ,转化大肠埃希菌DH5α ,进行表达、鉴定及纯化。 结果 :位于P 糖蛋白胞外段的抗原表位位点仅见于氨基酸残基 82～ 1 1 5(I)、741～ 760 (IV)及 80 0～ 81 6(V)。SDS PAGE分析 ,表达出约 30× 1 0 3(30kDa)大小的蛋白。结论 :该基因片段的高效表达为进一步制备其抗体或筛选其特异性结合肽 ,进行靶向治疗等工作奠定了基础。
- 王祥卫张立新杨唐俊郭应禄
- 关键词：P-糖蛋白抗原表位多药耐药
- 噬菌体展示肽表位的免疫原性研究被引量：2
- 2005年
- 目的研究模拟表位TAPDLRP的噬菌体展示肽的免疫原性。方法用我们筛选获得的展示MUC1抗原模拟表位的噬菌体阳性克隆免疫小鼠。以最大OD450值之纯化血清做为一抗行蛋白印迹分析。检测小鼠脾脏淋巴细胞增殖率。结果3次免疫小鼠后,血清(1∶1 000)中能检测到较强的MUC1抗体阳性。纯化血清可识别MUC1蛋白。噬菌体展示肽表位可在无佐剂存在情况下,大大促进小鼠的脾淋巴细胞的增殖。结论噬菌体是一种较好的生物载体。该模拟抗原免疫小鼠后能激发体液及细胞免疫应答,具有良好的免疫原性。
- 杨清浩王祥卫金燕张立新
- 关键词：MUC1蛋白模拟表位
- 食管鳞癌患者血清15种非必需微量元素定量分析被引量：7
- 2015年
- 目的研究食管鳞癌患者血清中多种非必需微量元素的变化情况。方法采用频数匹配(匹配因素为年龄和性别)的病例对照研究,采集2009-03-31-2010-03-31河南省安阳市肿瘤医院收治的食管鳞癌患者及安阳农村地区的健康对照的血清样本,应用电感耦合等离子体质谱仪定量检测其血清中15种非必需微量元素浓度,采用非条件Logistic回归估计各元素的不同水平对食管癌患病风险的影响,采用Spearman相关分析研究元素间相关性。结果共纳入100例患者和100名对照。非条件Logistic回归分析结果显示,以中浓度组为参照组,未调整其余因素(性别、年龄、吸烟史、饮酒史和食管癌家族史)时,血清铋(Bi)、汞(Hg)、铊(Tl)和铀(U)的高浓度组,以及硼(B)、钛(Ti)、锗(Ge)、铷(Rb)、铯(Cs)和钍(Th)的低浓度组,其食管癌患病风险升高,P<0.05;血清Bi低浓度组食管癌患病风险降低,P<0.05。而锂(Li)和饰(Ce)低浓度和高浓度组的食管鳞癌患病风险均升高,P<0.05。调整上述因素后,血清Bi、Hg、Tl和U高浓度组,以及B、Ti、Ge、Rb、Cs和Th低浓度组,其食管癌患病风险升高,P<0.05;血清Bi低浓度组,以及La高浓度组,其食管癌患病风险降低,P<0.05。Li和Ce低浓度和高浓度组的食管鳞癌患病风险均升高,P<0.05。相比于对照组,病例组元素间相关关系较对照组有所减弱,且部分元素间的相关性与对照组相比发生了反转。结论人体内多种血清非必需微量元素含量的变化与食管鳞癌的发生和发展密切相关。食管鳞癌患者血清中部分有害元素越高,有抗癌活性的有益元素越低,则食管鳞癌患病风险越高。
- 王栋芳闫赖赖卢庆彬文华徐瑞平张立新张钰刘多见王京宇刘雅琼
- 关键词：食管肿瘤血清电感耦合等离子体质谱
- 应用噬菌体随机肽库筛选肿瘤MUC1/Y黏蛋白结合肽
- 2001年
- 目的 :探索用噬菌体随机肽库筛选可用于肿瘤导向治疗的新型小分子载体。方法 :以MUC1/Y黏蛋白的胞外段蛋白(MUC1/Yex)为靶分子 ,用凝胶亲和法和酶联板法分别筛选十二肽噬菌体随机肽库 ,ELISA鉴定阳性克隆 ,DNA序列测定后确定MUC1/Yex结合肽的氨基酸序列 ;免疫组化鉴定阳性噬菌体克隆与正常及肿瘤细胞的结合能力及特异性。结果 :通过 4轮筛选 ,共获得 3种MUC1/Yex的结合肽 ,分别为HHWHSRSQLSWF ,HLKHKNYLPPTP和GNWYRHPHYLQP ,其中HXXHS表位可能在与MUC1/Yex的结合中起重要作用。阳性噬菌体克隆可与肿瘤细胞系MCF7,OVCA3,而不与正常外周血淋巴细胞结合。结论 :筛选获得的MUC1/Yex结合肽具有一定的亲合力和肿瘤特异性 ,可进一步用于肿瘤导向治疗的研究。
- 张立新李春海孙丽亚岳文
- 关键词：结合肽噬菌体随机肽库肿瘤
- 噬菌体随机肽库筛选MUC1抗原模拟表位被引量：5
- 2005年
- 目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP。鉴定结果表明:4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上。结论所得序列TAPDLRP、SAPDLRPAAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位。
- 杨清浩王祥卫金燕张立新
- 关键词：模拟表位抗体
- 新型MUC1黏蛋白模拟表位原核表达、纯化和鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的对新筛选的MUC1模拟表位进行克隆表达、纯化和鉴定。方法从噬菌体随机12肽库中筛选出新的MUC1的模拟表位,目的基因片段克隆入表达质粒PET-31b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,IPTG诱导表达,亲和层析纯化,Western blot鉴定。结果成功构建了重组表达质粒,诱导表达出新的MUC1模拟表位重组蛋白,纯化的目的蛋白在SDS-PAGE上呈现特异的单一条带,Western印迹也检测到目的蛋白特异条带。结论成功获得了新的MUC1模拟表位表达产物,为其在肿瘤疫苗方面的应用研究创造条件。
- 崔志刚张立新岳明路浩军刘志清李春海
- 关键词：MUC1模拟表位克隆
- 血清MUC1粘蛋白IRMA及其初步临床应用被引量：15
- 1997年
- 建立有效的ＭＵＣ１粘蛋白免疫放射分析法（ＩＲＭＡ），并初步用于乳腺肿瘤的诊断。利用纯化的ＭＵＣ１及其多抗，建立ＭＵＣ１双抗夹心ＩＲＭＡ法，对５５例健康女性、１１例乳腺良性肿瘤、２７例乳腺癌及２８例乳腺癌术后患者进行血清ＭＵＣ１的测定。结果：血清ＭＵＣ１ＩＲＭＡ的灵敏度为０７４ｋＵ／Ｌ；健康女性、乳腺良性肿瘤、乳腺癌及乳腺癌术后患者血清ＭＵＣ１的平均含量分别为７２３±３６７、１７８０±１０５６、３００４±２３８４和３１８４±２４７９ｋＵ／Ｌ；正常值上限为１３５４ｋＵ／Ｌ，假阳性率为１８２％；乳腺肿瘤患者血清ＭＵＣ１水平较健康女性明显提高；乳腺癌患者血清ＭＵＣ１水平高于乳腺良性肿瘤患者，但两者的阳性率（７７８７％和７２７０％）差异无显著性（χ２＝０１５４，Ｐ＞００５）；乳腺癌与乳腺癌术后患者血清ＭＵＣ１水平差异无显著性（ｔ＝－０２２，Ｐ＞００５）。ＭＵＣ１血清水平与肿瘤恶性程度成正相关，对于乳腺癌的诊断具有重要参考价值。
- 张立新李春海陆雅芬孙丽亚
- 关键词：MUC1粘蛋白血清放射免疫测定乳腺肿瘤
