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张永昌

作品数：1 被引量：3H指数：1
供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
发文基金：江苏高校优势学科建设工程项目国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇定向进化
  • 1篇易错PCR
  • 1篇原位
  • 1篇环状
  • 1篇基因
  • 1篇PPCP

机构

  • 1篇江苏大学
  • 1篇南京师范大学

作者

  • 1篇邵蔚蓝
  • 1篇刘明杰
  • 1篇王未未
  • 1篇张永昌

传媒

  • 1篇微生物学通报

年份

  • 1篇2014
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
通过原位易错PCR一步构建基因突变文库被引量：3
2014年
主要介绍一种通过原位易错PCR构建随机突变文库的新技术。本实验室最近发表的一项国际专利中,利用来源于海栖热孢菌的极耐热性DNA连接酶,在传统PCR循环中加入一个连接步骤,即变性—退火—延伸—连接的四步循环法PCR,从而实现环状质粒的PCR指数扩增(PPCP)。原位易错PCR中所用引物为一段线性双链DNA,它含有与模板质粒不同的筛选标记,产物转化宿主菌后,模板质粒在筛选平板上被直接剔除。筛选到的阳性突变子可用作模板直接进入突变文库的再次构建,通过筛选获得二级或多级累加的正突变。利用这种方法构建了一个木聚糖酶基因和一个纤维素酶基因的随机突变文库,并筛选出具有正向突变的蛋白,证明以PPCP为基础的原位易错PCR技术,为基因定向进化提供了一种快速有效的随机突变文库构建的新方法。
王未未张永昌刘明杰邵蔚蓝
关键词：定向进化
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共1页<1>
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