于淑珍
- 作品数:10 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金:转基因生物新品种培育专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 用于糖尿病治疗的多基因修饰小型猪
- 目的胰岛细胞移植是治疗糖尿病及其并发症的有效手段,猪胰岛细胞被认为是解决人类临床胰岛细胞供体短缺的最适宜来源。已有研究表明五指山小型猪的胰腺是分离纯化胰岛细胞的良好供体,但猪胰岛细胞异种移植面临着超急性免疫排斥和血液介导...
- 潘登科冯冲龙川于淑珍贺伸李西睿石宁宁
- 一种同卵双生仔猪快速鉴定方法
- 本发明公开了一种同卵双生仔猪快速鉴定方法,采用SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:20所示的10对引物,首先使用1其中的两对引物对1,201个仔猪个体进行毛细管电泳检测,如果同一窝号中的仔猪同时满足这两对引物的毛...
- 刘瀛锴李明洲贺伸于淑珍周怡李学伟
- 文献传递
- 利用TALEN技术和猪胰岛素启动子PIP制备GTKO/LEA29Y转基因猪
- 目前,糖尿病已成为威胁全人类健康的重要疾病之一。研究证明,移植胰岛是治愈糖尿病重症患者的有效方法,但该医学方法的发展却受到了器官来源不足的制约,而异种移植是解决临床器官移植供体来源短缺的有效途径。在异种器官移植中面临着超...
- 于淑珍
- 关键词:转基因猪特异性表达排斥反应
- 文献传递
- 猪胰岛素启动子调控EGFP表达载体的优化及体外验证
- 2014年
- 目的获得猪胰岛素启动子调控外源基因的高效表达载体,为制备转基因猪胰岛特异性表达目的基因奠定基础。方法利用猪胰岛素启动子(PIP,包含5'调控区、第一外显子、第一内含子及第二外显子ATG前的序列共1.5 kb)构建表达载体,连接PIP和EGFP的酶切位点HindⅢ设计在起始密码子前,命名为PIP-Hind IIIEGFP。鉴于酶切位点的插入位置可能会影响外源基因的表达效率,对载体进行了优化:将Hind III酶切位点删除,实现PIP和EGFP无缝连接,载体命名PIP-EGFP;将第一内含子3'端的内含子剪接受体位点(splicing acceptor site,SA)突变为Hind III内切酶识别位点,命名为PIP-SA(M)-EGFP。三种载体分别电转染小鼠胰岛素瘤β细胞株MIN-6细胞、猪耳成纤维细胞以及猪肾细胞,48 h后通过荧光强度、流式分析、RT-PCR及Western blot检测,验证载体的表达效率。结果转染细胞后,三种载体都仅在MIN-6胰岛β细胞表达绿色荧光。RT-PCR及其产物测序结果显示三种载体的胰岛素启动子第一内含子的剪切存在差异:载体PIP-Hind III-EGFP和PIP-EGFP的内含子存在剪切和不剪切两种情况,剪切不稳定;载体PIP-SA(M)-EGFP的SA位点突变后内含子不剪切,流式细胞及Western blot检测显示,与另外两种载体相比,该载体目的蛋白的表达量最高。结论通过突变胰岛素启动子第一内含子的3'端的剪接受体位点,成功获得了胰岛β细胞的高效表达载体,可用于制备胰岛特异表达外源基因的转基因猪。
- 于淑珍冯冲石宁宁宋小凤潘登科
- 关键词:特异性表达EGFP五指山小型猪
- 转LEA29Y和DN-CⅡTA基因制备抗T细胞排斥的异种移植供体猪
- 于淑珍贺伸冯冲龙川李明洲李学伟潘登科
- 关键词:异种移植特异性表达
- 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
- 潘登科龙川石宁宁冯冲李西睿于淑珍曾国敏唐雨婷高景波
- 胰岛特异性表达LEA29Y转基因猪的繁育与分析
- 邢向阳于淑珍石宁宁龙川冯冲李西睿潘登科
- 人源化小型猪组织器官的基因改造进展
- 潘登科龙川石宁宁冯冲李西睿于淑珍曾国敏唐雨婷高景波
- 一种同卵双生仔猪快速鉴定方法
- 本发明公开了一种同卵双生仔猪快速鉴定方法,采用SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:20所示的10对引物,首先使用1其中的两对引物对1,201个仔猪个体进行毛细管电泳检测,如果同一窝号中的仔猪同时满足这两对引物的毛...
- 刘瀛锴李明洲贺伸于淑珍周怡李学伟
- 文献传递