龙川 作品数:53 被引量:87 H指数:6 供职机构: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
CRISPR/Cas9介导的敲除ASGR1基因五指山小型猪 猪内皮细胞的去唾液酸糖蛋白受体1 (asialoglycoprotein receptor 1,ASGR1)是诱发异种肝移植后受体发生血小板减少症的主要诱因之一.本研究在α-1,3-半乳糖基转移酶基因(α-1,3-gal... 石宁宁 李西睿 龙川 冯冲 潘登科关键词:异种肝移植 体细胞核移植 减少异种肝移植血小板吞噬的ASGR1基因敲除猪 肝移植是解决临床供体肝短缺的有效途径之一.猪的肝脏作为"过渡肝"移植给急性肝衰病人,可以有效缓解急性肝衰病人的病情.敲除猪α-1,3半乳糖基转移酶基因(GGTA1已基本解决了异种肝移植的超急性免疫排斥... 李西睿 魏静 冯冲 龙川 纪慧丽 石宁宁 蒋应弟 曾国敏 潘登科关键词:异种肝移植 基因敲除 敲除α-1,3-半乳糖基转移酶基因五指山小型猪的繁育和鉴定 被引量:3 2017年 目的总结α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除(GTKO)五指山小型猪的繁育和鉴定。方法统计GTKO五指山小型猪的繁育结果及窝产仔数;采用聚合酶链反应(PCR)技术对GTKO五指山小型猪GGTA1基因敲除类型进行鉴定;采用荧光显微镜和流式细胞术对人、野生型五指山小型猪、GTKO五指山小型猪外周血单核细胞(PBMC)的α-1,3-半乳糖(αGal)表型进行检测;比较GTKO五指山小型猪与野生型五指山小型猪血常规指标的差异。结果 GGTA1基因型的遗传符合孟德尔定律;GGTA1-/-猪的PBMC流式检测无荧光表达,与基因型鉴定结果一致;GTKO五指山小型猪雌性猪初产窝产仔数为(6.8±1.8)只,经产窝产仔数为(8.3±2.2)只;血常规检测的各项指标与野生型五指山小型猪差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论连续2代GTKO五指山小型猪遗传稳定,繁殖力正常。GTKO五指山小型猪可作为异种器官移植研究的可靠供体。 龙川 高景波 唐雨婷 杜敏杰 石宁宁 冯冲 鲁琳 潘登科关键词:基因敲除 五指山小型猪 繁殖性能 外周血单核细胞 曲古抑菌素(Trichostatin)A对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育能力的影响 被引量:5 2008年 曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)是一种组蛋白去乙酰化抑制剂,用TSA处理鼠核移植胚胎可显著提高胚胎的囊胚率。检验TSA对猪卵母细胞体外成熟以及孤雌胚胎发育的影响。在猪卵母细胞体外成熟液及胚胎培养液中添加TSA,比较不同浓度TSA对卵母细胞成熟的影响,不同浓度TSA对孤雌胚胎发育能力的影响以及TSA处理不同时间对孤雌胚胎发育能力的影响。结果发现:(1)5 nmol/L TSA处理对卵母细胞体外核成熟无显著影响,却显著提高了卵母细胞孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率(P<0.05);(2)50 nmol/L TSA处理显著提高了孤雌胚胎的卵裂率及囊胚率(P<0.05);(3)50 nmol/L TSA处理24 h能显著提高胚胎的卵裂率及囊胚率(P<0.05,82.1%±2.6%和37.4%±3.1%)。结果表明TSA对猪卵母细胞的体外成熟及孤雌胚胎发育具有显著的促进作用。5 nmol/L的添加量对卵母细胞的体外胞质成熟具有促进作用;胚胎培养基中添加50 nmol/L TSA处理24 h能提高孤雌胚胎的发育能力。 刘晓 潘登科 陈扣扣 冯冲 张卫红 郑茂恩 龙川 冯书堂 杨博辉关键词:TSA 卵母细胞 体外成熟 孤雌胚胎 用于血管性器官异种移植的多基因修饰小型猪 背景:异种器官移植是解决人类器官短缺的重要途径之一,猪血管性器官移植到非人灵长类体内后主要面临超急性排斥反应和凝血紊乱.目前,敲除猪α1,3一半乳糖基转移酶基因(GTKO)及导入人补体调控蛋白基因(hCD46)可基本解决... 潘登科 冯冲 石宁宁 龙川 李西睿用于糖尿病治疗的多基因修饰小型猪 目的胰岛细胞移植是治疗糖尿病及其并发症的有效手段,猪胰岛细胞被认为是解决人类临床胰岛细胞供体短缺的最适宜来源。已有研究表明五指山小型猪的胰腺是分离纯化胰岛细胞的良好供体,但猪胰岛细胞异种移植面临着超急性免疫排斥和血液介导... 潘登科 冯冲 龙川 于淑珍 贺伸 李西睿 石宁宁初次卵裂时间可作为猪克隆胚胎发育潜能的标识 【目的】本研究探讨了初次卵裂时间与猪克隆胚胎发育潜能的关系。【方法】通过比较不同初次卵裂时间(20-24 h,早期;25-36 h,中期;37-48 h,晚期;0-48 h,对照)的猪体细胞核移植(somaticcell... 罗学明 龙川 朱彦宾 冯冲 闫军 陆芳 严康 潘登科关键词:体细胞核移植 发育潜能 文献传递 发育潜能不同的猪孤雌胚胎差异表达基因的筛选 被引量:1 2010年 本试验以猪孤雌胚胎为材料,根据初次卵裂时间的早晚划分出发育能力不同的2组胚胎,比较其母源mRNAs丰度。利用mRNA差异显示技术(mRNAdifferential display reverse transcription PCR,DDRT-PCR)筛选出2组胚胎中表达丰度不同的母源mRNAs,并经反Northern blotting验证,结果发现,有8条差异表达的阳性cDNA片段(E1-E4;L1-L4),克隆、测序后与GenBank数据库进行同源性比对分析,其中6条(E1、E2、E4、L1、L2、L4)与已知ESTs有较高的同源性,E3与人CPEB2的同源性为97%,L3与人hnRNPA1的同源性为89%。因此,CPEB2和hnRNPA1是影响胚胎发育能力的重要候选基因。 陆芳 罗学明 龙川 王希彪 潘登科关键词:孤雌胚胎 胚胎质量 用于异种移植的GTKO/hCD46/hTBM多基因修饰五指山小型猪 小型猪是理想的异种器官移植供体,猪器官移植到人体后会诱发超急性免疫排斥反应(Hyperacute rejection,HAR)、凝血功能障碍等一系列问题,通过对小型猪进行多基因修饰,可以阻断HAR及凝血功能障碍的发生,为... 潘登科 冯冲 石宁宁 龙川 李西睿利用体细胞LOH突变制备α1,3-半乳糖基转移酶基因(GGTA1)缺失的五指山小型猪 被引量:5 2013年 制备α1,3-半乳糖基转移酶(αl,3-galactosyltransferase,GGTA1)基因缺失的五指山小型猪,为我国异种器官移植研究奠定基础。在已经获得的GGTA1单等位基因敲除(GGTA+/-)五指山小型猪基础上,建立GGTA1+/-猪耳成纤维细胞系。利用特异性结合α1,3Gal的药物GSI-B4联合免疫磁珠筛选,成功分离出自发杂合性缺失(Loss of heterozygosity,LOH)的双等位基因敲除(GGTA1-/-)耳成纤维细胞。单细胞克隆培养与PCR鉴定后,以GGTA1-/-细胞为核供体,体外成熟的猪卵母细胞为核受体构建克隆胚胎并移植。先后将3 122枚重构胚移植到13头受体母猪,其中4头怀孕,产仔12头。采用PCR和Southern blotting进行GGTA1基因型检测,11头为GGTA1-/-猪;流式细胞术分析表明,GGTA1-/-仔猪耳成纤维细胞不表达α1,3Gal。获得能克服异种器官超急性排斥反应(HAR)的GGTA1-/-猪,不仅为异种器官供体的进一步基因修饰提供了平台,也为异种移植临床前研究提供了宝贵资源。 王飞 冯冲 龙川 岳成鹤 王宁 李西睿 曹随忠 李明洲 储明星 潘登科 帅素容关键词:Α1,3-半乳糖基转移酶 异种器官移植 体细胞核移植 五指山小型猪