陈晓佩
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- DMSO对兔骨髓间充质干细胞诱导分化为胰岛细胞的影响被引量：3
- 2015年
- 红细胞裂解法分离获得兔骨髓间充质干细胞(BM-MSCs),传代纯化培养并进行生物特性的鉴定。不同浓度二甲基亚砜(DMSO)(0、0.5%、1%、2%、4%)作用于贴壁前、贴壁后的兔BM-MSCs,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)观察细胞的形态、生长情况。DMSO体外诱导P3代兔BM-MSCs分化为胰岛细胞,观察诱导前后细胞形态学变化;双硫腙染色法初步鉴定胰岛细胞;免疫细胞化学检测胰岛素的表达;ELISA检测胰岛素的分泌。结果显示,原代、传代细胞呈成纤维细胞样,生长良好。DMSO对细胞的生长有抑制作用,细胞贴壁前、后的2种处理方法相比,DMSO对细胞生长抑制作用差异不显著(P>0.05)。相对而言,DMSO浓度<1%对细胞的生长损害作用较小。诱导分化过程中,细胞变圆,逐渐聚集,6d出现细胞聚集,随着诱导的继续,形成细胞团样结构,细胞团数逐渐增多;终末阶段试验组双硫腙染色呈明显的猩红色、免疫细胞化学法鉴定胰岛素表达显示阳性,ELISA检测细胞分泌胰岛素,诱导组7d和12d的胰岛素含量分别为(31.32±0.14)mU/L和(32.85±0.21)mU/L,与对照组的(25.02±0.55)mU/L和(25.06±2.46)mU/L比较,差异极显著。结果表明,DMSO可以用于诱导BM-MSCs分化,终末阶段形成分泌胰岛素的功能细胞,未来可以针对其诱导的高效性进一步进行研究。
- 许晓婷翟明胜蒋金航陈晓佩丁丹丹于文浩刘远哲王新庄
- 关键词：骨髓间充质干细胞诱导分化
- 牛PPARγ基因对脂肪细胞增殖分化的影响被引量：10
- 2016年
- 取郏县红牛第6和第7肋骨间肌间脂肪组织为试验材料,分离并培养原代前体脂肪细胞。在诱导分化牛前体脂肪细胞过程中,添加终浓度为1μmol/L的吡格列酮对脂肪细胞进行药物干预,上调过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferations actirated receptorγ,PPARγ)基因的表达后,通过MTT检测牛前体脂肪的增殖;油红O提取比色法检测牛前体脂肪细胞分化过程中脂滴的分泌;利用real-time PCR技术检测PPARγ基因表达上调后其他参与脂肪分化相关基因的表达情况。结果显示:吡格列酮药物干预后,PPARγ基因表达明显上调(P<0.01);PPARγ基因的表达上调后,牛脂肪细胞的增殖能力下降,分化能力增强;脂肪分化相关基因C/EBPA、SREBP11、FABPA、PLIN1、LPL和IGFBP2的表达量明显上调(P<0.05),GATA2和FAS基因的表达量没有发生明显变化。结果表明:PPARγ基因的表达可显著影响脂肪细胞的增殖与分化,可能与肉牛脂肪沉积有一定的关系。
- 陈晓佩于文浩蒋金航王亚丹刘远哲张宁王新庄
- 关键词：PPARΓ基因吡格列酮郏县红牛
- 5-aza-dC体外诱导兔骨髓间充质干细胞分化为胰岛细胞的研究被引量：2
- 2014年
- 为探讨DNA甲基化水平变化与BMSCs分化的关系,采用MTT法检测不同浓度的DNA甲基化抑制剂5-aza-dC作用不同时间对细胞活力的影响,用1.0μmol·L-1的5-aza-dC处理BMSCs,并联合DMSO、尼克酰胺诱导BMSCs向胰岛细胞分化,与未作DNA酶甲基化抑制剂处理的DMSO法诱导组进行双硫腙染色对比、胰岛关键调控基因PDX-1的免疫细胞化学荧光染色鉴定对比。研究表明,0.2~1.0μmol·L-15-aza-dC为处理兔BMSCs合适的浓度,1.0μmol·L-1的5-aza-dC与DMSO、尼克酰胺诱导剂的联合使用,能够促进胰岛调控关键基因PDX-1的表达,建立了BMSCs向胰岛细胞分化的较为高效的诱导体系。揭示了甲基化程度影响BMSCs向胰岛细胞的分化,低甲基化程度促进胰岛特异基因PDX-1的表达。
- 吕婧玉许晓婷陈晓佩翟明胜冯建昆于文浩王新庄
- 关键词：骨髓间充质干细胞5-AZA-DCDNA甲基化PDX-1胰岛细胞
- 兔骨髓间充质干细胞体外分离培养及冻存被引量：4
- 2014年
- 对分离获得的兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行低温冻存研究。用红细胞裂解法体外分离培养BMSCs,采用SABC法进行鉴定;冻存后复苏,台盼蓝染色检测细胞复苏率,观察冻存时间(15d,30d,90d)对各代(P1,P3,P9代)细胞复苏效果的影响;向脂肪细胞诱导分化验证其干细胞多潜能分化特性。结果表明:BMSCs呈长梭形,聚集成旋涡状均匀生长,SABC法鉴定其为BMSCs;冻存前后P1、P3代细胞活力好,增殖速度快;P9代细胞增殖缓慢;冻存时间对P1、P3代细胞复苏率的影响不显著(P>0.05),复苏率较高;但是P9代细胞复苏率极低,并且随着冻存时间的延长,细胞复苏率逐渐降低;冻存复苏的细胞向脂肪细胞诱导分化,油红浸染红色。可见:红细胞裂解液法分离获得的BMSCs生长生物学性状稳定;P3代以前冻存增殖和分化特性不受影响,可作为种子细胞用于后续研究。
- 许晓婷胡文举陈晓佩翟明胜于文浩王亚丹张宁王新庄
- 关键词：骨髓间充质干细胞冻存
- 不同分离方法及首次换液时间对兔骨髓间充质干细胞生物活性的影响被引量：2
- 2015年
- 探讨不同分离方法及首次换液时间对兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）生物活性的影响。分别采用红细胞裂解法和全骨髓贴壁法分离纯化兔骨髓间充质干细胞,倒置显微镜观察细胞形态、台盼蓝染色检测细胞活性、记录首次传代时间、细胞免疫组化法鉴定CD90、CD44、CD34抗原表达;分别于培养12,24,48,72h首次换液,以后每2d换液1次,记录各组0～3代培养时间。结果显示,2种分离方法均能得到较均一的长梭形细胞,聚集成旋涡状均匀生长,CD90、CD44抗原表达阳性,CD34抗原表达阴性。其中红细胞裂解法所得细胞活性较全骨髓贴壁法高,首次传代时间短,差异显著（P〈0.05）;24h首次换液各代达传代所需时间与其他各组比较差异极显著（P〈0.01）,为最佳首次换液时间,可显著缩短细胞培养周期。这表明,采用红细胞裂解法,24h首次换液能够提高骨髓间充质干细胞的活性,缩短细胞培养周期。
- 陈晓佩于文浩王亚丹刘远哲张宁王新庄
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 兔骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛细胞的研究
- 目的：本试验通过在体外添加不同生长因子，拟探索稳定高效的体外诱导兔骨髓间充质干细胞定向分化为胰岛β细胞的诱导体系，为进一步进行深入研究及临床实践中应用干细胞移植治疗糖尿病奠定试验基础及临床指导意义。 方法：分别采用全骨...
- 陈晓佩
- 关键词：骨髓间充质干细胞定向分化胰岛Β细胞动物模型
