闫岩
- 作品数：18 被引量：85H指数：6
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- 发文基金：国家自然科学基金军队杰出人才基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 反义人端粒酶RNA对胃癌细胞生长的抑制效应被引量：6
- 2000年
- 目的 探讨反义人端粒酶RNA(hTR)对胃癌细胞的生长抑制作用。方法 将反义hTR真核表达载体经脂质体介导转染人胃癌细胞系SGC790 1,体外培养及接种裸鼠观察其基因转染细胞的细胞周期、超微结构变化、生长速率及致瘤性。结果 反义hTR在潮霉素筛选的阳性克隆中稳定表达 ,正义hTR表达下调 ,并出现凋亡改变。基因转染细胞体外传代培养的生长速率大多减慢 ,在裸鼠皮下的致瘤性明显降低。荷瘤鼠存活时间延长。
- 张方信张学庸樊代明邓芝云闫岩吴汉平
- 关键词：胃肿瘤端粒末端转移酶反义RNA基因治疗
- HCV核心蛋白在HepG2细胞中对COX-2表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白是否影响环氧化酶-2(COX-2)的表达。方法用PCR从含HCVH77株全长基因组序列质粒中扩增HCV核心蛋白基因,并克隆至pcDNA3.1载体中,构建HCV核心蛋白基因的真核表达载体HCV-C/pcDNA3.1。用HCV-C/pcDNA3.1和含COX-2启动子的荧光素酶报告载体COX2pro1.5kb/luc瞬时共转染HepG2细胞,测定萤火虫荧光素酶的活性,并用Westernblot检测COX-2蛋白的表达水平。结果成功地构建了HCV-C/pcD-NA3.1重组质粒。瞬时转染后的HepG2细胞中,COX2启动子荧光素酶的活性显著增强。Westernblot检测,发现COX-2的表达明显升高。结论HCV核心蛋白在HepG2细胞中激活COX-2启动子,并且明显诱导COX-2的表达,为进一步研究COX-2与HCV致病性的关系提供了新的实验依据。
- 刘艳丽闫岩白文涛张芳琳吕欣张伟徐志凯
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白环氧化酶-2
- 用siRNA抑制胃癌细胞AGS中COX-2表达及对AKT磷酸化的抑制
- 2006年
- 构建了可在真核细胞中表达针对COX-2基因的siRNA表达载体,并用胃腺癌细胞系AGS建立了COX-2siRNA的稳定转染细胞系。用Western-Blot检测稳定转染细胞系中COX-2的表达以及AKT的磷酸化水平。结果表明稳定转染COX-2siRNA的细胞中COX-2的表达较转染空载体的细胞明显降低,且发现COX-2表达的降低可抑制AKT-Ser473和Thr308的磷酸化水平。为进一步探索抑制COX-2对胃癌细胞生物学特性的影响,及其在肿瘤治疗中的作用奠定了基础。
- 刘艳丽闫岩白文涛张芳琳吴兴安张德新徐志凯
- 关键词：SIRNACOX-2AGS细胞
- 汉滩病毒核蛋白的分段表达及抗原表位分析被引量：9
- 2000年
- 在大肠杆菌中对汉滩病毒S基因 4种不同长度片段的重组表达质粒进行诱导表达。结果表明表达的 4种GST NP融合蛋白均以不溶性包含体形式存在于菌体细胞内 ,表达量分别占菌体蛋白总量的 2 9- 36 % ,分子量分别约为 72kD、6 6kD、54kD和 4 4kD。Westernblot显示 54kD和 72kD融合蛋白用酶标抗汉滩病毒NPMcAb 1A8和抗GSTMcAb 3C11染色呈阳性反应。 6 6kD和4 4kD融合蛋白仅与酶标 3C11呈阳性反应。用凝血酶切去GST ,获得 4种汉滩病毒重组核蛋白(rNP) ,分子量分别约为 4 4kD、4 0kD、2 6kD和 16kD。用 19株McAb对表达产物做抗原位点分析 ,结果完整的rNP可与 19株McAb中的 13株反应 ,McAb反应谱与天然NP相同 ;S1.1kb表达产物 (N 端 1 37和C端 4 0 2 4 2 9位aa缺失 )和S 0 .5kb表达产物 (N 端 1 2 74位aa缺失 )与 19株McAb均不发生反应 ;S0 .7kb表达产物 (C 端 2 75 4 2 9位aa缺失 )可与 5株组特异性McAb反应。表明汉坦病毒核蛋白上的抗原位点主要存在于N 端 1 37位aa区段内。
- 薛小平徐志凯马文煜尹文张芳琳闫岩吴兴安白文涛
- 关键词：汉滩病毒抗原表位核蛋白
- 新型大肠癌抗原MC3-Ag在临床血清学诊断中的应用被引量：1
- 1996年
- 早期筛诊是提高大肠癌患者生存率的有效途径,以CEA,CA50等肿瘤抗原建立的血清学放免测定法在灵敏度、特异性上尚欠理想,且具有放射性污染,因而寻找特异性更好的大肠癌标志及建立相应的非放射性测定技术,是大肠癌血清学诊断的努力方向。作者利用自行纯化鉴定的新型大肠癌抗原MC3-Ag建立了一种快速ELISA血清学诊断方法,现将临床应用的初步结果报告如下。
- 陈兵周绍娟樊代明张学庸薛小平闫岩贺丽华
- 关键词：大肠肿瘤抗原血清学诊断
- 抗家鼠型HFRS病毒McAb 13E_2V_H基因的克隆及序列分析
- 1996年
- 从分泌高亲和力抗家鼠型ＨＦＲＳ病毒型特异性ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系１３Ｅ２中提取细胞总ＲＮＡ，经逆转录合成ＣＤＮＡ，并以之为模板，用特异性引物进行ＰＣＲ，扩增出约３６０ｂｐ产物，将之克隆入ＰＵＣ１８质粒中。序列分析表明，所克隆的基因符合编码小鼠抗体ＶＨ的特征。１３Ｅ２ＶＨ基因由２６６个ｂｐ组成，编码１２２个氨基酸，隶属于小鼠重链ⅡＡ亚组。
- 吴兴安徐志凯闫岩尹文
- 关键词：肾综合征出血热病毒单克隆
- 重组汉滩病毒核蛋白及其26ku片段的免疫学特性初步鉴定被引量：13
- 2000年
- 目的 研究基因重组表达的汉滩病毒核蛋白及其氨基端 2 6 ku片段在刺激机体免疫应答中的作用 ,为汉滩病毒基因工程疫苗研究打下基础 .方法 采用基因重组技术和亲和层析技术对汉滩病毒核蛋白及其氨基端 2 6 ku片段进行表达和纯化 ,并通过体外和体内试验对上述表达产物刺激小鼠免疫应答的作用及其特性进行了初步鉴定 .结果 汉滩病毒核蛋白及其 2 6 ku片段对小鼠均具有较强的免疫原性 .EL ISA检测免疫鼠抗体滴度可达 1∶ 32 0 0 0以上 ,并且均可刺激产生不同滴度 (1∶ 10～ 1∶ 16 0 )的中和抗体 .被动转移免疫鼠脾细胞对汉滩病毒感染乳鼠具有保护作用 ,其中 2 6 ku片段免疫鼠脾细胞的保护作用尤为明显 .结论 汉滩病毒核蛋白及其氨基端 2 6 ku片段能刺激机体产生中和抗体 ,同时可刺激机体细胞免疫应答 .
- 刘勇徐志凯王海涛尹文薛小平张芳琳闫岩吴兴安
- 关键词：汉滩病毒核蛋白免疫学特性
- 汉坦病毒S基因真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的瞬时表达被引量：1
- 1999年
- 本文采用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增了汉坦病毒陈株的Ｓ基因的编码区序列，克隆入真核表达载体ＰＣＭＶ４，构建了可表达汉坦病毒Ｓ基因的真核表达载体ＰＣＭＶ４－ＣｈｅｎＳ１．３。用电穿孔法转染ＣＯＳ－７细胞，免疫荧光和ＥＬＩＳＡ检测表明，目的基因在ＣＯＳ－７细胞中获得瞬时表达。
- 薛小平徐志凯马文煜闫岩张芳琳尹文吴兴安白文涛
- 关键词：汉坦病毒S基因真核表达COS-7细胞
- 淋球菌IgA蛋白酶基因中和表位片段的克隆、表达和鉴定被引量：6
- 2000年
- 目的 克隆和表达编码淋球菌IgA蛋白酶中和表位的基因。方法 通过PCR扩增淋球菌IgA蛋白酶编码基因 16 0 1～ 2 72 2位序列 ,克隆后在大肠杆菌中表达 ,表达产物用重组淋球菌IgA蛋白酶免疫血清作Western印迹。并用表达产物免疫小鼠血清与产IgA蛋白酶的标准菌株培养上清作用 ,观察免疫血清对酶活性的影响。结果 所克隆的基因在大肠杆菌中获得高效表达 ,表达产物能与重组淋球菌IgA蛋白酶免疫血清反应 ,表达产物的免疫血清能中和淋球菌IgA蛋白酶的活性。结论 所克隆的基因序列中含有淋球菌IgA蛋白酶的中和表位 。
- 许福明马文煜项秉懿闫岩白光春李元
- 关键词：淋球菌表位
- 原发性胃癌组织中的端粒及端粒酶表达被引量：29
- 1998年
- 目的观察端粒（ＴＲＦ）及端粒酶在胃癌形成及发展中的作用。方法采用ＤＮＡ琼脂糖凝胶杂交技术及端粒重复扩增ＰＣＲ方法检测１７例早期胃癌、８９例进展期胃癌组织及邻近正常组织中的平均ＴＲＦ长度及端粒酶活性。结果早期、进展期胃癌的ＴＲＦ长度及端粒酶活性表达均显著短于或高于邻近胃组织（Ｐ＜０．０５～０．０１），且端粒酶活性的表达主要表现在ＴＲＦ缩短或延长的胃癌组织中，而ＴＲＦ缩短与胃癌的分化程度相一致。结论端粒及端粒酶的异常状态可能与胃癌的发生发展密切相关。
- 张方信张学庸樊代明樊代明邓芝云
- 关键词：胃肿瘤端粒端粒酶原发性
