张芳琳
- 作品数：162 被引量：404H指数：10
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校骨干教师资助计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 医学生素质培养浅析被引量：5
- 2002年
- 随着卫生事业的发展,21世纪对医学人才的综合素质提出了更高的要求,不仅要有深厚的医学专业知识和广泛的社会科学知识,而且要有高尚的品德和良好的身心状况.本文对医学生素质培养的目标做一简要阐述.
- 张芳琳罗雯刘勇
- 关键词：医学生
- 汉坦病毒感染对Ⅰ型干扰素应答的调节机制被引量：6
- 2014年
- 汉坦病毒主要感染人内皮细胞,细胞在病毒感染早期诱导生成的Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)可阻断汉坦病毒的复制,但不同的病毒蛋白和不同型别的汉坦病毒在IFN应答的调节机制上可能有所不同。就汉坦病毒感染对IFN应答的调节机制进行了综述。
- 徐永妮曹梦远叶伟张芳琳
- 关键词：汉坦病毒
- 人IFN-β基因启动子荧光表达载体的构建及鉴定
- 2014年
- 目的构建人IFN-β基因启动子萤火虫荧光素酶报告基因载体(pGL3-IFNB1)及增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体(pGE3-IFNB1),并在A549细胞中进行表达验证。方法采用PCR方法扩增出IFN-β启动子区片段,克隆入荧光表达载体pGL3 basic和pGE3 basic,并用脂质体瞬时转染A549细胞,6 h后用汉滩病毒(HTNV)感染转染后的细胞,24 h后检测重组载体在细胞内的表达情况。结果重组载体pGL3-IFNB1和pGE3-IFNB1分别经双酶切鉴定及序列测定证实载体构建正确;且在A549细胞内成功表达。经HTNV刺激后表达明显增加。结论成功构建了人IFN-β启动子荧光素酶报告基因载体(pGL3-IFNB1)及增强型绿色荧光蛋白表达载体(pGE3-IFNB1),为进一步研究病毒诱导产生IFN-β机制提供了有用的工具。
- 徐永妮曹梦远惠倩倩叶伟于澜张亮张芳琳
- 关键词：IFN-Β启动子汉滩病毒病毒感染
- 联合应用泛素分子基因的汉滩病毒嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒的构建及鉴定
- 2015年
- 目的构建含有泛素(ubiquitin,Ub)基因的汉滩病毒嵌合基因Gn S0.7和Gc S0.7重组腺病毒。方法通过PCR扩增获得Ub基因,分别克隆入本室已构建的重组腺病毒转移载体p Shuttle-p CAG-Gn S0.7和p Shuttle-p CAG-Gc S0.7中,进一步通过双酶切将转移载体中的嵌合基因分别克隆入腺病毒载体,得到重组腺病毒载体r Ad-p CAG-Ub-Gn S0.7和r Adp CAG-Ub-Gc S0.7,使用PacⅠ线性化后转染HEK293细胞,包装后获得重组腺病毒,感染HEK293细胞后用免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测表达产物。结果限制性内切酶酶切鉴定、PCR扩增和测序结果显示,各重组腺病毒转移载体及重组腺病毒载体构建正确。IFA检测到各重组腺病毒中目的蛋白的表达。结论成功制备了含有Ub基因的汉滩病毒嵌合基因Gn S0.7和Gc S0.7重组腺病毒,为进一步研究联合Ub基因的汉滩病毒重组腺病毒的免疫学特性奠定了实验基础。
- 张亮于澜叶伟李璞媛张芳琳程林峰
- 关键词：汉坦病毒腺病毒科泛素
- 医学微生物学课程教学中人文素养的渗透被引量：3
- 2016年
- 医学兼具人文社会属性,对于医学生培养而言,人文素养培育的重要性不言而喻,现今医患矛盾的加剧更突显了对医学生人文素养培育的迫切性。医学微生物学作为基础医学与临床医学的桥梁学科,其在理论教学与实验教学中可以渗透入大量与人文素养相关的内容,通过多样性的教学方式、教学内容上有意识的引导,对于医学生人文素养的培育能起到很好的作用。
- 吕欣姚敏柏银兰张芳琳
- 关键词：医学微生物学医学生人文素养
- HSV-1 gC糖蛋白真核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2011年
- 目的:构建单纯疱疹病毒1型(HSV-1)囊膜糖蛋白C(gC)哺乳动物表达载体pCI-mCMV-gC-1-IRES-DHFR-L22R,实现其在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中的稳定表达。方法:利用基因重组技术构建同时克隆有gC-1基因和中国仓鼠二氢叶酸还原(DHFR-L22R)基因的真核表达载体pCI-mCMV-gC-1-IRES-DHFR-L22R,按LipofectamineTM2000说明书转染野生型CHO-K1细胞,在G418和氨甲喋呤(MTX)双筛选压力下筛选稳定表达细胞株,Slot blot方法测定重组蛋白的表达,并用His-Ni琼脂糖填料进行目的蛋白纯化,纯化后West-ern blot检测。结果:成功构建了真核表达载体pCI-mCMV-gC-1-IRES-DHFR-L22R。经过两轮筛选获得稳定表达HSV-1型gC基因的细胞系,Western blot成功检测到目的蛋白。结论:HSV-1 gC在CHO-K1细胞中成功表达,并具有良好的特异性结合活性,为进一步的实验研究和临床应用提供了基础。
- 党引利阎岩张晓晓李璞媛于澜张蕾张芳琳徐志凯吴兴安
- 关键词：HSVGCDHFR真核表达CHO
- 抗羊布鲁菌核糖体蛋白L7/L12单克隆抗体制备及初步鉴定
- 2006年
- 制备抗羊布鲁菌核糖体蛋白L7/L12的单克隆抗体(mAb),为进一步研制布鲁菌检测方法和免疫制剂提供基础。常规动物免疫、细胞融合、克隆化制备抗核糖体蛋白L7/L12的mAb,并用Westernblot和ELISA方法对其特异性、抗原识别表位及相对亲和力等做了初步鉴定。获得了4株抗L7/L12蛋白的mAb:1B1,2A2,2H9和2H10,相对亲和力为2A2>2H10>2H9>1B1,4株mAb识别的抗原表位相近,但仍存在一定的差异。得到的4株稳定的杂交瘤细胞系分泌的mAb能特异结合L7/L12蛋白。
- 司瑞徐志凯张芳琳白文涛吴兴安王海涛于澜胡刚
- 关键词：单克隆抗体
- 从HIV讲授探讨医学微生物学教学改革被引量：3
- 2011年
- 在医学微生物学教学过程中,灵活运用案例式教学法、以问题为中心的教学法、计算机辅助教学法及课外科研、课外科普活动等方法来提高教学效果,激发学生学习兴趣,培养学生发现问题、分析问题及解决问题的能力。
- 黎志东王平忠徐志凯吴兴安张芳琳王媛
- 关键词：医学微生物学教学改革教学方法
- 汉坦病毒嵌合基因G2S0.7与CTL多表位重组腺病毒的构建及免疫学分析
- 目的：构建含有汉坦病毒M基因(编码糖蛋白G2)和部分S基因(编码核蛋白主要抗原区段)以及S基因的多个CTL表位的多种重组腺病毒表达载体，并对这些重组腺病毒的免疫学特性进行研究。
方法：构建含目的基因的重组腺病毒...
- 胡刚白文涛吴兴安王海涛徐志凯张芳琳
- 关键词：汉坦病毒CTL表位免疫学分析
- 文献传递
- 大肠杆菌中融合表达汉滩病毒S,M基因片段的研究被引量：1
- 2002年
- 为在大肠杆菌中融合表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与NP含主要抗原位点的片段 .将汉滩病毒 76 118株S基因编码区 5′端约 0 .7kb的片段与M基因编码G1的片段连接 ,克隆入 pGEX 4T2 ,构建嵌合基因原核表达载体 pGEX 4T2 S 0 .7G1,在大肠杆菌XL1 Blue中诱导GST S0 .7G1融合蛋白的表达 .表达产物用ELISA和Westernblot进行鉴定 .限制性内切酶酶切鉴定证明 ,成功构建了嵌合原核表达载体 pGEX 4T2 S0 .7G1.经IPTG诱导后 ,ELISA活性测定结果表明 ,该融合蛋白可与抗汉坦病毒NPmAb特异性结合 .Westernblot结果显示 ,诱导出相对分子质量 (Mr)大于 1× 10 5的S0 .7G1与GST的融合蛋白 ,并有一系列大小不等的可与抗汉坦病毒NPmAb特异性结合的蛋白带 .获得具有特异性结合活性的融合蛋白GST S0 .7G1。
- 罗雯徐志凯张芳琳阎岩吴兴安刘勇白文涛王海涛
- 关键词：大肠杆菌汉滩病毒基因片段
