贾庆华
- 作品数：36 被引量：62H指数：4
- 供职机构：兰州军区兰州总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省科技支撑计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因对铅致动脉内皮细胞损伤的保护作用
- 2011年
- 目的观察重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因(Ad-HGF)对铅致动脉内皮细胞损伤的保护作用,为Ad-HGF保护血脑屏障提供理论依据。方法实验设正常组、转染组、铅染组、转染加铅染毒组。转染加铅染毒组用Ad-HGF转染动脉内皮细胞48 h后,加入20μmol/L的醋酸铅,24 h、48 h后分别用G iem sa染色法观察细胞形态学变化;细胞免疫化学法检测P53的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果染色显示出铅单独染毒组细胞成凋亡形态学改变。转染加铅染毒组动脉内皮细胞的免疫化学结果显示P53阳性表达较对照组下降。MTT结果表明铅处理不同时间点(6 h、12 h、18 h、24 h、48 h)后,转染加铅染毒组细胞增殖率与铅单独染毒组比较没有显著升高(P>0.05),转染组的增殖率略高于对照组(P<0.05)。醋酸铅组细胞凋亡率较对照组明显升高,转染组较未转染组比较细胞凋亡率明显下降。结论 Ad-HGF具有抗细胞凋亡作用,为解释Ad-HGF对铅致血脑屏障的损伤保护效应提供有力的理论和实验依据。
- 贾庆华徐娟杨志华杨霄鹏哈小琴昌业伟
- 关键词：AD-HGF铅动脉内皮细胞血-脑屏障
- 加强学术交流 提升科研水平 促进科学发展
- 2010年
- 吕同德徐娟哈小琴贾庆华
- 关键词：医院管理
- 醋酸铅对体外培养人肾小球系膜细胞的凋亡作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨醋酸铅对人肾小球系膜细胞(HRMC)的凋亡作用。方法醋酸铅处理HRMC后,HE染色法观察细胞形态学变化;细胞免疫组织化学法检测p53、bax、bcl-2的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果经10、20μmol/L醋酸铅处理24 h后,HE染色均显示出醋酸铅组细胞成凋亡形态学改变。HRMC的细胞免疫组织化学结果显示醋酸铅组的p53和bax阳性表达升高,而bcl-2的阳性表达下降。流式细胞仪检测结果表明醋酸铅组细胞凋亡率较对照组明显升高。结论醋酸铅可促进HRMC凋亡,进而影响肾脏正常功能。
- 吕同德贾庆华蒋军军哈小琴
- 关键词：醋酸铅人肾小球系膜细胞凋亡
- Lg-1诱导人胃癌细胞系BGC-823凋亡作用及机制的探讨被引量：1
- 2013年
- 目的:研究新鬼臼毒素衍生物4β-4-脱氧-氮取代的异亮氨酸(5-FU基)-戊醇酯-4′-去甲表鬼臼(Lg-1)对人胃癌细胞系BGC-823的诱导凋亡作用及机制。方法:噻唑蓝(MTT)、流式细胞术和Hoechs33258染色分别检测Lg-1对BGC-823细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测药物处理后对BGC-823细胞凋亡相关基因p53、Bax、Bcl-2、p21和Caspase-3表达的影响。结果:Lg-1对BGC-823细胞增殖具有明显剂量和时间依赖的抑制作用,随药物浓度增加,抑制效应增强,药物浓度为0.01、0.1、1和10μmol/L时,Lg-1对BGC-823的抑制率分别为23.5%、30.8%、32.4%和52.1%,与依托泊苷(Vp-16)处理组(3.5%、8.7%、10.9%和21.3%)比较差异有统计学意义,P均<0.01。随时间延长,抑制作用逐渐增强,12～60hLg-1处理组对BGC-823的抑制率与Vp-16处理组比较差异有统计学意义,12h抑制率分别为9.8%和8.0%,P=0.001;24h分别为11.6%和9.0%,P=0.02;36h分别为19.4%和16.2%,P=0.014;48h分别为44.1%和41.2%,P=0.048;60h分别为65.4%和50.1%,P=0.001。细胞周期检测显示,Lg-1作用12和24h后,G2/M期的细胞含量分别为39.37%和74.36%,与对照组及Vp-16组比较均明显增加,而G0/G1期细胞含量分别为20.06%和12.25%,较对照组及Vp-16组显著减少。Hoechst33258染色显示,Lg-1处理组细胞核固缩、碎裂、凋亡样改变,药物处理后Bcl-2mRNA的表达呈降低趋势,Vp-16处理组Bcl-2mRNA表达量为0.748,Lg-1处理组为0.425,而p53、Bax、p21和Caspase-3mRNA的表达呈增高趋势,Vp-16处理组mRNA表达量分别为1.074、1.232、1.818和2.9,Lg-1处理组分别为1.903、1.393、1.911和3.097,且Lg-1处理组作用优于Vp-16处理组。结论:Lg-1可抑制胃癌细胞增殖,使细胞阻滞在G2/M期,该过程可能与其上调p53、Bax、p21、Caspase-3表达和下调Bcl-2基因的表达有关。
- 闫蔚吕同德惠玲王美亮贾庆华王晓辉马明仁
- 关键词：胃肿瘤鬼臼毒素细胞周期
- 16例Turner综合征的细胞遗传学分析被引量：3
- 2013年
- 目的分析Turner综合征不同核型的遗传学特征、临床表现及其关系。方法外周血淋巴细胞G带分析。结果 16例Turner综合征患者中单体45,X0 6例(37.50%),46,X0/46,XX嵌合体1例(6.25%),46,Xi(Xq)1例(6.25%),47,XXX 4例(25.00%),46,XY/45,X0 3例(18.75%),46,XX,del(Xq24)1例(6.25%)。结论 X染色体数目异常及结构畸变是导致Turner综合征的主要原因,多种异常核型均不同程度导致女性生长缓慢、性腺发育不良、闭经及智力低下等其他器官功能异常。
- 昌业伟贾庆华唐瑜王晓辉杨霄鹏马明仁惠玲王美亮哈小琴
- 关键词：TURNER综合征核型分析产前诊断G带
- 异体移植工程细胞对大鼠烧伤创面愈合中皮肤附属器作用被引量：2
- 2011年
- 目的以大鼠深Ⅱ度烧伤为模型,观察工程细胞即腺病毒介导肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因修饰的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对烧伤创面愈合中皮肤附属器再生的作用。方法体外分离、培养雄性Wistar大鼠骨髓MSCs,转染携带HGF基因的重组腺病毒(100 pfu/cell)后备用。16只雌性Wistar大鼠复制深Ⅱ度烧伤模型,随机分为观察组与对照组各8只。在造模同时,观察组将携带HGF基因的重组腺病毒修饰的骨髓MSCs悬液,对照组将同体积磷酸盐缓冲液注射于创面真皮下。分别于细胞移植后第3,5,7,14,21天计算创口愈合率,第7,14,21天光镜下观察组织愈合及皮肤附属器情况,常规PCR法检测细胞移植后第21天创面组织中性别决定基因Sry片段。结果携带HGF基因的重组腺病毒可有效转染MSCs,修饰的MSCs移植后第7,14天,观察组创口收缩率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。HE染色结果显示,第7天观察组表皮化优于对照组,第21天观察组再生表皮明显厚于对照组,并可见再生毛囊和皮脂腺。观察组雌性大鼠创面组织中扩增到Sry基因片段。结论 MSCs联合携带HGF基因的重组腺病毒异体移植可促进烧伤创面愈合修复过程中皮肤附属器的形成,且移植的细胞也参与了烧伤创面修复过程中附属器的形成。
- 赵曼他维玮哈小琴惠玲贾庆华王美亮刘国军
- 关键词：烧伤间充质干细胞肝细胞生长因子愈合皮肤附属器
- 醋酸铅对人股动脉内皮细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响
- 2011年
- 目的探讨醋酸铅对人股动脉内皮细胞凋亡和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性的影响。方法醋酸铅染毒人股动脉内皮细胞后,用Hochest 33258染色法检测细胞形态学变化,用细胞免疫化学法检测caspase-3、P53、Bax、Bc l-2的表达;用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果经10μmol/L醋酸铅处理24、48 h后,Hochest 33258-PI染色显示醋酸铅组细胞呈凋亡形态学改变。动脉内皮细胞的细胞免疫化学结果都显示醋酸铅组的caspase-3、P53和Bax阳性表达升高,而Bc l-2的阳性表达下降。其流式细胞仪检测结果表明醋酸铅组细胞凋亡率较对照组显著升高(P<0.05)。结论醋酸铅可促进动脉内皮细胞凋亡,其机制可能与capase-3的活化有关。
- 贾庆华杨彩哈小琴杨霄鹏蒋军军
- 关键词：醋酸铅凋亡血脑屏障
- 醋酸铅对体外培养人肾小管上皮细胞的毒性效应被引量：1
- 2010年
- 目的探讨醋酸铅对人肾小管上皮细胞系HK-2的毒性效应。方法醋酸铅处理HK-2后,Giemsa及HE染色法检测观察细胞形态学变化;细胞免疫化学法检测凋亡相关蛋白P53、Bax、Bcl-2的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果经10μmol/L和20μmol/L醋酸铅处理48h后,Giemsa及HE染色均显示醋酸铅组细胞成凋亡形态学改变。HK-2的细胞免疫化学结果示醋酸铅组的P53和Bax阳性表达升高,而Bcl-2的阳性表达下降。流式细胞仪检测结果表明,醋酸铅组细胞凋亡率较对照组明显升高。结论醋酸铅可损伤HK-2,促进其凋亡及影响肾脏。
- 贾庆华蒋军军哈小琴
- 关键词：醋酸铅肾小管上皮细胞
- Notch1对人脐带间充质干细胞增殖、黏附及迁移影响的体外研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨Notch1基因的重组腺病毒转染对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)增殖、黏附及迁移能力的影响。方法按照不同腺病毒感染hUCMSCs分为实验组(AdNotch1)、阴性对照组(Ad-GFP)与空白对照组。以最佳MOI转染hUCMSCs,观察细胞形态变化以及GFP蛋白的表达。比较3组细胞增殖能力、细胞周期、黏附能力及迁移能力。Western Bolt检测3组细胞Notch1蛋白的表达水平。结果荧光下观察腺病毒成功感染细胞,阴性对照组和实验组均出现了GFP的表达,且随培养时间的延长表达量增高,可见光下观察实验组细胞增殖速度较快。实验组细胞的增殖能力(48、72、96 h)、黏附能力(12、16、20 h)及迁移能力均较阴性对照组及空白对照组增强(P<0.05)。Western Bolt检测实验组细胞Notch1蛋白的表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论 Notch1能明显促进hUCMSCs的增殖、黏附和迁移。
- 王晓辉罗芸贾庆华杨霄鹏王鲲哈小琴
- 关键词：间质干细胞脐带NOTCH1细胞黏附细胞运动
- 乙酸铅对人星形胶质细胞超微结构及凋亡相关蛋白天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响
- 2010年
- 为探讨乙酸铅对人星形胶质细胞超微结构及凋亡相关蛋白天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响,将处于对数生长期人星形胶质细胞(细胞密度约5×103个/ml)分别暴露于0(对照)、10、20μmol/L乙酸铅,培养24 h后,采用倒置相差显微镜观察细胞的形态学变化,采用透射电镜观察细胞超微结构的变化,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用细胞免疫化学法检测Caspase-3的表达,采用Western blot法检测细胞中Caspase-3表达量。结果显示,显微镜下观察发现,乙酸铅染毒人星形胶质细胞变小、变圆,细胞间隙变大,细胞部分脱落。透射电镜观察发现,乙酸铅染毒细胞胞质内出现空泡,核固缩,核膜结构模糊,线粒体数目减少、空泡化。流式细胞仪检测结果表明,乙酸铅染毒组细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞免疫化学法和Western Blot法检测结果显示,乙酸铅染毒人星形胶质细胞Caspase-3表达量均高于对照组,并且表达量随着染铅剂量增加而升高。提示乙酸铅可诱发人星形胶质细胞凋亡,其机制可能与Capase-3的活化有关。
- 贾庆华哈小琴蒋军军吕同德
- 关键词：超微结构天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3
