袁英 作品数:31 被引量:209 H指数:10 供职机构: 吉林省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 吉林省科技发展计划基金 吉林省财政厅科研育种项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
农杆菌介导玉米幼胚遗传转化体系的建立 被引量:10 2014年 以玉米(Zea mays L.)HiII的幼胚为外植体,β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)为报告基因,通过农杆菌介导转化法对影响遗传转化体系的外植体大小、农杆菌浓度、热预处理温度、侵染时间、共培养及恢复培养时间、抗生素、筛选剂等因素进行优化,以建立农杆菌介导玉米幼胚遗传转化体系。结果表明,幼胚大小为1.0~1.5 mm,农杆菌菌液的OD600 nm为0.5,40℃热处理3 min,侵染8 min,共培养3 d和恢复培养4 d,100 mg/L羧苄青霉素作为抑菌剂,双丙氨膦作为筛选剂时为最佳遗传转化条件。通过该优化体系已获得多种转基因玉米材料,表明该体系具有较高的可重复性和可靠性。 孙传波 郭嘉 袁英关键词:幼胚 转cspB基因玉米获得及其耐盐碱性分析 被引量:3 2017年 本研究依据Gen Bank数据库中发表的枯草芽孢杆菌cspB基因序列进行优化,人工合成了cspB基因序列,构建植物表达载体,通过农杆菌介导法将cspB基因转入玉米自交系Hi-Ⅱ中,获得转cspB基因玉米材料,经过分子检测获得4个阳性转化事件。在4个浓度水平的NaCl溶液(0,40 mmol/L,80 mmol/L,120 mmol/L)和Na_2CO_3溶液(0,10 mmol/L,20 mmol/L,30 mmol/L)胁迫下,研究其耐盐碱性。结果表明:80 mmol/L的NaCl溶液和20 mmol/L Na_2CO_3溶液可以作为转cspB基因玉米的耐盐碱分析条件;cspB基因已经整合到玉米基因组中,转cspB基因玉米的耐盐碱性得到了显著提高。转cspB基因玉米丰富了耐盐碱玉米种质资源。 郭嘉 孙传波 杨向东 袁英关键词:NACL NA2CO3 耐盐碱 转基因玉米 利用基因工程技术创造耐盐粳稻新种质 林秀峰 邢少辰 刘志铭 郝文媛 王中伟 李淑芳 姜昱 林春晶 王凤华 袁英 王景余 李海龙 王艳 王青蓝 徐晓红 桑健 该项目优化了吉林省主栽粳稻品种的组织培养条件,为大规模转化吉林省地方品种,实现转基因水稻产业化奠定了基础;利用花药培养法培育转基因植株的后代,加速了基因纯合速度,缩短了育种年限;首次将耐盐基因转入吉林省主栽的地方品种中,...关键词:关键词:BADH基因 耐盐 水稻 转chi和rip双价基因大豆抗疫霉根腐病评估 被引量:1 2018年 大豆疫霉根腐病(phytophthora root rot,PRR)是由大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)引起的一类世界性大豆病害。培育抗病品种是控制病害发生,减少大豆产量损失最为经济有效的措施。本研究采用农杆菌介导转化法,将菜豆几丁质酶基因chi和大麦核糖体失活蛋白编码基因rip导入栽培大豆品种,获得对大豆疫霉菌1号生理小种抗性显著提高的转基因大豆。Southern杂交表明,外源基因以寡拷贝形式整合至大豆基因组中。连续多代(T1~T4)喷施草丁膦和PCR跟踪检测表明,外源基因在转基因大豆不同代际间能够稳定遗传。采用下胚轴伤口接种法,对T3和T4代转基因大豆接种鉴定表明,转基因大豆接种死亡率为6.0%~15.0%,均显著低于对照受体品种沈农9号(93.33%~94.44%)和Williams82(41.18%~56.25%),表明chi和rip双价基因过表达显著提高了转基因大豆抗PRR水平。农艺性状分析表明,转基因大豆在生育期、株高、分支数、节数、叶形、花色、结荚高度、和百粒重等方面与对照受体品种没有显著差异。本研究将chi和rip双价基因转入大豆中,显著提高了转基因大豆对PRR的抗性,对大豆PRR抗性育种工作具有重要的意义。 郭嘉 赵倩倩 邢国杰 邢国杰 贺红利 杨静 牛陆 贺红利关键词:大豆 疫霉根腐病 分子标记辅助选择结合外源DNA导入技术创造玉米新种质 李晓辉 刘晓鑫 刘德璞 袁英 郝文媛 高树仁 李海云 孔祥梅 刘芳 该项目利用外源DNA导入技术将高粱总DNA导入到玉米自交系中,获得了茎秆含糖量接近受体甜高粱、与受体相比穗重增产达到显著水平的导入D3代变异材料。该项目摸索确立了最佳外源DNA导入技术并对其具体技术流程进行了优化;结合国...关键词:关键词:外源DNA导入技术 分子标记辅助选择 玉米新种质 农杆菌介导玉米遗传转化体系的研究 被引量:16 2012年 为了提高玉米自交系的遗传转化率,建立农杆菌介导玉米遗传转化体系。通过农杆菌菌株EHA105侵染玉米自交系7922的胚性愈伤组织,以β-葡萄糖苷酶基因(GUS)为报告基因研究几种因素对遗传转化体系的影响。结果表明:(1)当农杆菌浓度OD600=0.6时,GUS瞬时表达率最高为35.3%;(2)当侵染时间为15min时,GUS瞬时表达率最高为37.3%;(3)当共培养时间为3天和恢复培养时间为4天时,GUS瞬时表达率最高为29.1%。因此选择农杆菌浓度OD600=0.6,侵染时间15min,共培养3天和恢复培养4天,为最佳遗传转化条件。通过优化影响遗传转化体系的因素,初步建立了农杆菌介导的玉米遗传转化体系。 孙传波 郭嘉 陶蕊 李海华 邢少辰 袁英关键词:农杆菌介导法 玉米 胚性愈伤 玉米杂交种苗期耐盐碱筛选与大田鉴定的比较分析 被引量:27 2010年 基于所确定的玉米苗期耐盐碱筛选最宜浓度和适宜的生理生化指标,对14个吉林省主推玉米杂交种进行苗期盐碱耐性分析和大田鉴定。结果表明:大田鉴定结果与苗期耐盐碱能力综合评价分级基本吻合;苗期盐碱耐性弱的杂交种其大田减产明显,其减产率最高为44.12%,最低为17.39%,证明鉴定方法与评价指标科学有效,并可以初步筛选剔除一些苗期胁迫表现弱的材料;对于苗期胁迫耐盐碱能力综合评价表现较强的杂交种,其大田减产率变化幅度不大,变化范围在9.33%~11.76%,具体品种是否适宜盐碱地种植需经进一步的大田鉴定。 张春宵 袁英 刘文国 李文华 王丹 李万军 李晓辉关键词:玉米 杂交种 盐碱胁迫 反义RNA介导GmFAD2-1B基因沉默增强大豆种子中油酸的高效累积 被引量:9 2017年 油酸含量是评价大豆油食用品质和稳定性的重要指标。本研究采用农杆菌介导转化法,将反义GmFAD2-1B基因导入栽培大豆品种,获得油酸含量显著提高的转基因大豆新品系。Southern杂交检测表明,外源GmFAD2-1B基因片段已导入大豆基因组,其插入拷贝数为1~5个。q RT-PCR检测表明,外源GmFAD2-1B主要在大豆种子中表达,并导致种子中内源GmFAD2-1 m RNA表达水平显著降低,而根、茎、叶、花组织中内源GmFAD2-1 m RNA表达水平无显著变化。脂肪酸组分分析表明,12份转基因大豆种子油酸含量为27.38%~80.42%,其中,L40和L72油酸含量分别为68.91%~80.42%和65.98%~80.22%,较对照品种Williams 82(17.8%~22.0%)提高2.65倍以上,亚油酸降低至4.84%~14.55%,饱和脂肪酸降低至10.34%~11.16%,但总脂肪和总蛋白含量与对照品种相比没有显著变化。农艺性状分析表明,转基因大豆在熟期、株高、叶形、花色、结荚高度、百粒重等方面与对照品种也没有显著差异。 杨静 邢国杰 牛陆 贺红利 杜茜 郭东全 袁英 杨向东关键词:大豆 油酸 Bt基因转化玉米培育抗玉米螟自交系 被引量:11 2007年 采用基因枪法将苏云金杆菌(简称Bt)的杀虫毒蛋白基因(CryIA)导入东北春玉米自交系铁7922的幼胚中,诱导愈伤组织。抗虫基因的表达载体是pBI121,包含Bt杀虫毒蛋白基因和新霉素磷酸转移酶(NPTII)基因,筛选标记bar由CaMV35S启动子驱动。通过对后代植株的除草剂草丁膦(PPT)筛选、分子鉴定和ELISA法检测,证明外源基因已经整合到玉米基因组中并可以稳定遗传。对转基因株系进行田间接玉米螟虫卵,调查不同生长时期的危害指数,最终筛选出一批抗玉米螟自交系。 袁英 李晓辉 孔祥梅 董英山 姜志磊 林春晶 李葱葱 武树香 刘红军 刘芳 刘德璞关键词:玉米 BT基因 基因枪转化 农杆菌介导法向玉米茎尖导入抗草甘膦EPSPS基因的研究 被引量:14 2011年 以玉米自交系郑58的茎尖为受体,通过农杆菌介导法将抗草甘膦EPSPS基因转入玉米中,研究以茎尖为受体的农杆菌转化体系的可行性。98株转化苗,经过300 ppm的除草剂(农达)筛选,共获得13株转基因植株,经PCR检测,其中7株表现阳性,转化率达7.14%。初步证明外源基因已经整合到玉米基因组中,以玉米茎尖作为受体的转化系统用于基因转化是可行、高效的。 孙传波 李海华 郭嘉 陶蕊 曲文利 孟凡梅 张举仁 刘文国 袁英关键词:玉米 茎尖 农杆菌介导