孔祥梅
- 作品数：16 被引量：129H指数：7
- 供职机构：吉林省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 分子标记结合田间观察快速鉴定外源DNA导入玉米的变异后代被引量：1
- 2008年
- 本研究通过花粉管通道导入技术将甜高粱总DNA导入优良玉米自交系4112和8902中,并应用RAPD标记技术从导入后代中筛选出变异后代。从306个RAPD引物中筛选出79个引物对供受体及导入后代进行鉴定,其中10个随机引物在供、受体和导入后代间有多态性。对D1和D2代进行田间茎秆糖分调查,并对D2代室内考种,发现糖分含量和穗长、穗重、轴粗、穗粒重等穗部性状都发生了明显变异。结合分子鉴定结果,最终获得了一批变异材料。
- 刘芳刘晓鑫高树仁袁英孔祥梅刘德璞李晓辉
- 关键词：玉米分子标记外源DNA
- 农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究被引量：38
- 2006年
- 以东北春玉米自交系7922、340、78599、921及美国杂交种H99等幼胚愈伤组织为受体,利用农杆菌介导法转化Bt(CryIA.)基因,研究菌液预处理、愈伤组织状态、侵染培养基、侵染时间及共培养条件等因素对转化频率的影响。根据转化愈伤组织的除草剂(Basta)抗性筛选结果评估转化率,表明继代培养3￣5d的愈伤组织适于转化,其中以继代5d的7922愈伤组织转化率最高,为46.6%;不同基因型对农杆菌转化率存在差异,H99的抗性愈伤组织率为34.57%,7922为26.27%、340为21.36%、78599和921抗性愈伤组织率仅为8.02%和6.78%。基因型间差异显著;浸染培养基中加入(AS100￣200mg/L)抗性愈伤转化率明显提高;菌液浓度OD6000.5￣0.6、侵染时间5￣10min、共培养时间3d最佳。
- 袁鹰李启云郝文媛谭化孔祥梅张光弟刘德璞
- 关键词：农杆菌介导法影响因素抗性愈伤组织
- 大豆花粉管通道技术转化雪花莲凝集素(GNA)基因被引量：24
- 2006年
- 采用花粉管通道技术,用雪花莲凝集素基因(Galanthusnivalisagglutinin,GNA)转化吉林省主推品种吉林20号、吉林30号、吉林45号品种大豆。通过接蚜鉴定和PCR鉴定,从所获得的种子苗中筛选出转基因植株。对转基因植株的后代进行分子生物学鉴定:(1)PCR分析,转基因植株97TGR1和97TGR2的T2代表现阳性,第5代表现阳性纯合;97TGR1、97TGR2和98FD1￣98FD20的T3代Westernblotting检测结果证明,GNA基因在蛋白质水平有表达,最高表达量占总可溶性蛋白的0.7%;97TGR1、98TGR2和99JI45TGR2的Southernblotting检测结果显示,GNA基因已插入大豆基因组;(2)遗传学分析,97TRG1的T2代呈孟德尔3:1分离,97TGR2的T3代出现种皮颜色不规则分离。经过抗蚜性鉴定和连续的筛选,获得抗性纯系;(3)抗蚜性鉴定,转基因株的T1、T2世代转基因植株可抑制蚜虫繁殖量50%￣90%;(4)品系鉴定,转基因大豆的抗蚜性达到农学标准抗(R)和高抗(HR)水平;大面积环境释放试验自然感蚜鉴定,转基因系蚜虫发生的高峰比对照延迟,高峰期过后群体蚜量的下降速度也比对照快。本研究认为,大豆花粉管通道技术可以利用于大豆的转基因研究和应用中,GNA基因在改良大豆的抗蚜性上是可取的。
- 刘德璞袁鹰唐克轩郑培和王兴智刘宝周正平姜昱孙小芬肖乃仲朱筱娟孔祥梅郝文媛徐文静刘娜李晓辉
- 关键词：大豆转基因GNA花粉管通道抗蚜性
- 分子标记辅助选择结合外源DNA导入技术创造玉米新种质
- 李晓辉刘晓鑫刘德璞袁英郝文媛高树仁李海云孔祥梅刘芳
- 该项目利用外源DNA导入技术将高粱总DNA导入到玉米自交系中，获得了茎秆含糖量接近受体甜高粱、与受体相比穗重增产达到显著水平的导入D3代变异材料。该项目摸索确立了最佳外源DNA导入技术并对其具体技术流程进行了优化；结合国...
- 关键词：
- 关键词：外源DNA导入技术分子标记辅助选择玉米新种质
- 大豆新品种吉育96选育报告被引量：1
- 2010年
- 大豆新品种吉育96号,2007～2008年区域试验结果:平均产量为3187.2 kg/hm2,比对照品种吉林30增产5.2%,2008年生产试验结果:平均产量为3054.6 kg/hm2,比对照吉林30增产4.2%。该品种2009年1月通过吉林省农作物品种审定委员会审定,其主要特点是多分枝,单产水平高,稳产性好,抗病性强。
- 孔祥梅程延喜赵丽梅彭宝王曙明张卫龙王越强张鸣浩张静波周松涛王礼宾杨柳
- 关键词：大豆选育
- 吉林省水改旱田种植大豆技术措施被引量：3
- 2004年
- 水田改旱田,整地是关键;排水通畅是保障;科学施肥、加强田间管理、防治病虫害和适时收获是获得高产和优质的有效途径。早豆晚播是一种有针对性的有效提高产量的种植方法。
- 程延喜孔祥梅越刚
- 关键词：大豆
- 农杆菌介导的玉米合子基因转化被引量：9
- 2008年
- 本研究建立了农杆菌介导的玉米合子转化方法。用农杆菌介导合子转化方法,以含有bar基因的标准双元载体PTF102和含有bar基因和双价抗虫基因Cry1A(a)或Cry1A(c)、PTA(半夏凝集素)的载体p3300-Bt-pta转化玉米自交系吉8902、丹340、吉4112、吉853、铁7922及PA91,直接从受体植株得到转化种子,用除草剂PPT筛选和PCR鉴定,获得转基因植株及后代。实验分析了2002年、2003年和2004年的3批转化操作的结实率、转化率及转基因的遗传情况:经农杆菌侵染的雌穗平均结实率为39%,合子转化频率达1%以上,转基因可以遗传下去。农杆菌介导玉米合子转化方法可以重复获得成功,表明我们成功建立起一个新的不依赖组织培养的玉米转基因技术体系。
- 刘德璞袁英郝文媛王景会李晓辉孔祥梅姜志磊孙传波曲文利
- 关键词：玉米合子农杆菌介导法基因转化
- Bt基因转化玉米培育抗玉米螟自交系被引量：11
- 2007年
- 采用基因枪法将苏云金杆菌(简称Bt)的杀虫毒蛋白基因(CryIA)导入东北春玉米自交系铁7922的幼胚中,诱导愈伤组织。抗虫基因的表达载体是pBI121,包含Bt杀虫毒蛋白基因和新霉素磷酸转移酶(NPTII)基因,筛选标记bar由CaMV35S启动子驱动。通过对后代植株的除草剂草丁膦(PPT)筛选、分子鉴定和ELISA法检测,证明外源基因已经整合到玉米基因组中并可以稳定遗传。对转基因株系进行田间接玉米螟虫卵,调查不同生长时期的危害指数,最终筛选出一批抗玉米螟自交系。
- 袁英李晓辉孔祥梅董英山姜志磊林春晶李葱葱武树香刘红军刘芳刘德璞
- 关键词：玉米BT基因基因枪转化
- 抗除草剂转基因玉米育种筛选方法的建立被引量：6
- 2008年
- 本试验建立了一个以除草剂抗性为选择标记的玉米(ZeamaysL.)转基因育种中的早期世代批量快速筛选技术。通过对玉米自交系铁7922、吉8902、丹340、PA91以及转Bar基因PA91玉米PA91TBA523在营养钵中浸灌250mg/L、500mg/L、1000mg/L、1500mg/L不同浓度的Basta除草剂的萌发试验,确立了不能正常生长的临界浓度:铁7922在250mg/L的除草剂中无法生长,吉8902在500mg/L的除草剂中无法生长;转基因材料PA91TBA523在除草剂达到1500mg/L仍与不浸灌除草剂的对照无明显差异。利用此方法对花粉管通道法转化获得的转基因T0植株的种子进行鉴定和筛选,从T0植株种子(T1)获得阳性植株6株,3株获得种子,对获得的种子(T2)再做除草剂筛选,抗性植株PCR检测均表现阳性。对以往的转基因T3做批量规模筛选,可以淘汰大量(70%)非转基因和表达不强的株系或个体,减少了田间种植工作量,提高了育种效率。
- 武淑香姜志磊孔祥梅殷奎德袁英李晓辉刘德璞
- 关键词：玉米转基因除草剂
- “十五”期间吉林省大豆育成品种及其评价
- 2008年
- 全面总结了吉林省"十五"期间大豆育成品种的特征特性及产量、品质指标,通过对"十五"期间育成品种与"九五"期间育成品种的比较,阐述了"十五"期间大豆育种取得的进展,并提出"十一五"大豆育种的目标及注意问题。
- 程延喜孔祥梅王曙明彭宝张伟龙王跃强张鸣浩赵丽梅王富成
- 关键词：大豆
