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蔡森林
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
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福建医科大学附属第一医院
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吴明祥
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2013
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人碱性成纤维生长因子基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞的研究
被引量:3
2013年
目的观察人碱性成纤维生长因子(bFGF)基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外向血管内皮样细胞分化的能力。方法利用密度梯度离心分离和贴壁培养相结合的方法从SD大鼠骨髓中提纯单个核细胞,体外扩增3代,倒置显微镜观察细胞生长及形态,流式细胞仪检测BMSCs表面抗原表达。取扩增第3代的BMSCs,分为3组:阴性对照组(普通的BMSCs组)、空白对照组(不含bFGF基因但含有GFP的慢病毒载体转染组)、实验组(含bFGF目的基因的慢病毒载体转染组),3组同法培养[培养基10%胎牛血清、50μg/L血管内皮生长因子(VEGF)的L-DMEM培养基]。1周后各组上清液ELSIA法测定bFGF含量,4周后各组行细胞形态学观察,免疫细胞化学法检测细胞表面标记分子CD31、CD34及Ⅷ因子的表达及Dil—AC—LDL吞噬实验等。结果流式细胞仪显示分离、培养的第3代BMSCs表面抗原阳性表达率:CD11b/c和CD34分别为(14.16±0.72)%和(1.29±0.46)%,而CD44和CD90分别为(97.87±0.84)%和(96.85±1.49)%。实验组bFGF分泌量(5.50±0.12)ng/L明显高于空白对照组(2.65±0.40)ng/L和阴性对照组(2.76±0.25)ng/L,实验组与空白对照组以及阴性对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01);3组大部分细胞形态变化不明显,呈长梭形、杆状、多角形。实验组CD31、CD34及Ⅷ因子阳性表达率分别为(22.73±5.42)%、(26.32±3.95)%和(30.34±6.62)%,而空白对照组和阴性对照组则为[(7.85±1.83)%、(8.93±1.37)%、(10.23±1.21)%]和[(7.57±1.21)%、(8.41±0.97)%、(9.97±0.52)%],实验组与空白对照组以及阴性对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01);诱导后实验组细胞能有效地吞噬Dil-AC-LDL,表达荧光的平均吸光度值,实验组(0.52±0.23)明
张金池
蔡森林
吴佳文
吴明祥
郑国富
欧阳亮远
关键词:
碱性成纤维生长因子
骨髓间充质干细胞
基因转染
分化
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