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吴佳文
作品数:
3
被引量:16
H指数:3
供职机构:
福建医科大学附属第一医院
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发文基金:
福建省自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
欧阳亮远
福建医科大学附属第一医院
张金池
福建医科大学附属第一医院
吴明祥
福建医科大学附属第一医院
郑国富
福建医科大学附属第一医院
刘学强
福建医科大学附属第一医院
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医药卫生
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间充质干细胞
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骨髓间充质干...
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机构
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福建医科大学
作者
3篇
吴佳文
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张金池
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欧阳亮远
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2篇
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1篇
中华肝脏病杂...
年份
1篇
2013
2篇
2012
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体外诱导糖尿病鼠骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞分化的研究
被引量:5
2012年
目的观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外培养方法和向血管内皮样细胞分化的能力。方法利用密度梯度离心分离和贴壁培养相结合的方法从STZ诱导的糖尿病大鼠骨髓中提纯单个核细胞,体外扩增3代,倒置显微镜观察细胞生长及形态,流式细胞仪检测BMSCs表面抗原表达。取扩增第3代的BMSCs,分为2组,诱导组加入诱导培养剂[含10%胎牛血清、10μg/L血管内皮生长因子(VEGF)、2μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、100U/ml青霉素、100mg/L链霉素的M199培养基]中诱导分化,对照组则不加任何细胞因子。2周后行细胞形态学观察,免疫细胞化学法检测VEGF受体(VEGFR)-2表达,流式细胞仪测定CD34表达量,紫外线分光光度法测定一氧化碳(NO)含量,电镜观测胞质Weibel Palade小体。结果STZ腹腔注射可诱导糖尿病大鼠模型。流式细胞仪显示第3代BMSCs表达表面抗原:CIM4和CD90阳性细胞表达率分别为(97.8±0.9)%和(96.8±1.4)%,而CD11b/e和CD34阳性细胞表达率分别为(13.2±0.6)%和(1.2±0.5)%。诱导组大部分细胞形态变化不明显,呈长梭形、杆状、多角形,诱导组VEGFR-2、CD34阳性表达率分别为(97.1±1.0)%和(65.0±3.9)%,而对照组则为(7.0±1.0)%和(0.9±0.3)%,两组比较差异有统计学意义(P〈0.05);诱导组胞外NO含量(94.14±3.25)μmol/L亦明显高于对照组(70.37±2.10)μmol/L(P〈O.05);电镜两组均未观察到胞质Weibel Palade小体。结论经密度梯度离心分离和贴壁培养相结合的方法可从骨髓中提纯BMSCs。糖尿病鼠BMSCs可在体外诱导向血管内皮样细胞方向分化,BMSCs有望作为治疗糖尿病下肢缺血性疾病的种子细胞。
张金池
欧阳亮远
吴佳文
王敬瀚
关键词:
糖尿病
骨髓间充质干细胞
诱导分化
内皮样细胞
人碱性成纤维生长因子基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞的研究
被引量:3
2013年
目的观察人碱性成纤维生长因子(bFGF)基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外向血管内皮样细胞分化的能力。方法利用密度梯度离心分离和贴壁培养相结合的方法从SD大鼠骨髓中提纯单个核细胞,体外扩增3代,倒置显微镜观察细胞生长及形态,流式细胞仪检测BMSCs表面抗原表达。取扩增第3代的BMSCs,分为3组:阴性对照组(普通的BMSCs组)、空白对照组(不含bFGF基因但含有GFP的慢病毒载体转染组)、实验组(含bFGF目的基因的慢病毒载体转染组),3组同法培养[培养基10%胎牛血清、50μg/L血管内皮生长因子(VEGF)的L-DMEM培养基]。1周后各组上清液ELSIA法测定bFGF含量,4周后各组行细胞形态学观察,免疫细胞化学法检测细胞表面标记分子CD31、CD34及Ⅷ因子的表达及Dil—AC—LDL吞噬实验等。结果流式细胞仪显示分离、培养的第3代BMSCs表面抗原阳性表达率:CD11b/c和CD34分别为(14.16±0.72)%和(1.29±0.46)%,而CD44和CD90分别为(97.87±0.84)%和(96.85±1.49)%。实验组bFGF分泌量(5.50±0.12)ng/L明显高于空白对照组(2.65±0.40)ng/L和阴性对照组(2.76±0.25)ng/L,实验组与空白对照组以及阴性对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01);3组大部分细胞形态变化不明显,呈长梭形、杆状、多角形。实验组CD31、CD34及Ⅷ因子阳性表达率分别为(22.73±5.42)%、(26.32±3.95)%和(30.34±6.62)%,而空白对照组和阴性对照组则为[(7.85±1.83)%、(8.93±1.37)%、(10.23±1.21)%]和[(7.57±1.21)%、(8.41±0.97)%、(9.97±0.52)%],实验组与空白对照组以及阴性对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01);诱导后实验组细胞能有效地吞噬Dil-AC-LDL,表达荧光的平均吸光度值,实验组(0.52±0.23)明
张金池
蔡森林
吴佳文
吴明祥
郑国富
欧阳亮远
关键词:
碱性成纤维生长因子
骨髓间充质干细胞
基因转染
分化
异甘草酸镁对大鼠肢体缺血再灌注肝损伤时磷脂酶A2的影响
被引量:8
2012年
目的探讨异甘草酸镁(MI)对大鼠肢体缺血再灌注肝损伤时磷脂酶如(PLA2)的影响。方法选取健康、雄性、清洁级SD大鼠24只,体质量(230±30)g,随机分成3组(每组8只):对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、异甘草酸镁治疗组(MI组)。C组仅麻醉,肢体没有缺血操作;I/R组于再灌注前颈外静脉注入生理盐水1ml;MI组于再灌注前同法给异甘草酸镁30mg/kg,计1ml。以橡皮带环绕结扎大鼠左后肢根部至趾掌无血流信号达4h后放开橡皮带,再灌注6h建立大鼠后肢缺血再灌注肝损伤模型。再灌注6h后各组处死动物采集标本,分别取大鼠的血清测定ALT、AST、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK),取肝组织做10%的匀浆,采用硫代巴比妥酸法测匀浆及血清的丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)值,采用酶联免疫法测匀浆及血清PLA2、肿瘤坏死因子α(TNFα),电镜观察肝组织的超微结构改变。结果(1)C组肝匀浆PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(74.1±3.1)Hg/g、(152.4±7.9)ng/g、(2.02±0.16)nmol/g、(0.20±0.03)活力单位/g;血清PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(80.3±3.9)μg/L、(121.7±6.6)ng/L、(4.89±0.64)nmol/ml、(65.62±8.33)活力单位/ml;I/R组肝匀浆PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(94.83±21.99)μg/g、(361.3±46.6)ng/g、(3.038±0.391)nmol/g、(0.422±0.062)活力单位/g;血清PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(118.4±9.3)μg/L、(152.7±15.7)ng/L、(7.30±0.73)nmol/ml、(94.83±21.99)活力单位/ml;MI组肝匀浆PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(84.3±5.8)μg/g、(314.4±13.9)ng/g、(2.49±0.07)nmol/g、(0.31±0.05)活力单位/g;血清PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(96.0±4.4)μg/L、(137.0±5.5)ng/L、(5.61±0.3
张金池
郑国富
吴明祥
吴佳文
欧阳亮远
刘学强
关键词:
缺血
再灌注损伤
异甘草酸镁
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