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脂质体介导质粒DNA转移至视网膜的观察被引量：6: 2002年; 目的　观察脂质体是否能介导目的基因转移至视网膜及脂质体潜在的毒副作用 ,探讨脂质体在视网膜疾病基因治疗中的应用价值。方法　通过体外细胞转染实验优化阳离子脂质体与质粒DNA的比例 ,然后将脂质体 DNA混合物注射至Spregue Dawley(SD)及Royalcollegeofsurgeon(RCS)大鼠视网膜下间隙 ,荧光显微镜观察目的基因的表达 ,病理学检查及电镜观察视网膜的组织形态学变化。结果　阳离子脂质体介导转移的绿色荧光蛋白表达质粒在视网膜细胞中表达时间 >4周。但转染后 4周 ,正常SD大鼠的光感受器外节开始出现肿胀变性 ;8周时光感受器的细胞核明显减少 ,仅剩单层细胞 ,外节脱落或消失 ;双极细胞也出现凋亡 ;视网膜内可见新生血管。 5只 4周龄的RCS大鼠经阳离子脂质体介导睫状体神经营养因子 (cillaryneurotrophicfactor,CNTF)表达质粒转移至视网膜 ,3～ 5周时镜下见 3只实验眼视网膜光感受器保存情况明显比对照眼好。结论　阳离子脂质体可有效介导目的基因转移至视网膜细胞内 ;脂质体介导的CNTF基因转移对RCS大鼠视网膜光感受器有一定的保护作用 ,但对正常的视网膜神经细胞特别是光感受器有一定的毒副作用。; 王丰夏欣胡宏惠李凌田毓华陈霞芳黄倩; 关键词：脂质体转染视网膜疾病

早期移植性肿瘤生长与新生血管形成过程观察及机理研究: 黄倩王丰李川源徐萍田毓华李凌吴继红武文森胡宏惠陈霞芳谢匡成易苗英刘文文王晓莉; 该课题采用GFP表达质粒或GFP逆转录病毒介导GFP基因转移，建立了多种能持续、稳定表达GFP的肿瘤细胞株。建立了新的，以GFP基因标记的膀胱和视网膜原位肿瘤动物模型，观察到了接近自然状态下的肿瘤生长方式、转移途径和部位...; 关键词：; 关键词：肿瘤新生血管 VEGF

p-STAT3与E-cadherin在胰腺癌中的表达及其临床意义被引量：4: 2007年; 目的:观察信号传导和转录激活因子3 (STAT3)活化形式-磷酸化STAT3(p-STAT3)和上皮型-钙黏附素(E-cadherin)在胰腺癌组织及细胞中的表达及其临床意义,探讨STAT3信号通路在胰腺癌侵袭转移中的作用．方法:免疫组化检测34例胰腺癌和10例正常胰腺组织中p-STAT3和E-cad的表达,并分析其与胰腺癌临床病理特征的关系．细胞侵袭测定试剂盒检测胰腺癌细胞株SW1990和CaPan-2侵袭能力:分别采用Western blot和电泳迁移率变迁实验(EMSA)检测2种细胞中p-STAT3蛋白表达及STAT3-DNA结合活性．结果:免疫组化发现p-STAT3在胰腺癌组织中存在高表达(64．7%),与临床分期及淋巴结转移有关(P=0．017,P=0．013);E-cad在胰腺癌组织中表达明显降低,与组织学分级(P= 0．002)、临床分期(P=0．034)及淋巴结转移(P=0．019)有关．在胰腺癌组织中,p-STAT3与E-cad的表达呈负相关(r=-0．537,P=0．001)．体外侵袭实验发现SW1990细胞比CaPan-2细胞具有更高的侵袭能力(P＜0．05)．Western blot发现在胰腺癌高侵袭力细胞株SW1990中p-STAT3蛋白呈高表达,而在低侵袭力细胞株CaPan-2中呈低表达;EMSA实验亦证实SW1990细胞较CaPan-2细胞具有更高的STAT3-DNA结合活性(P＜0．05)．结论:p-STAT3与胰腺癌侵袭转移及E-cad异常表达密切相关;联合检测两种蛋白对于胰腺癌恶性潜能的判断具有一定的参考价值．; 黄陈裘正军胡宏惠江弢朱麟张放黄克俭曹俊; 关键词：胰腺癌信号传导与转录激活因子3 E-钙黏附素

表达睫状神经营养因子的人胚肺成纤维细胞视网膜下间隙移植延缓RCS大鼠光感受器变性被引量：4: 2006年; 目的以遗传性视网膜变性RCS大鼠为模型,探讨视网膜下间隙移植表达睫状神经营养因子(CNTF)的人胚肺(HFL)成纤维细胞治疗视网膜变性的可行性。方法通过脂质体将编码CNTF的表达质粒转入HFL成纤维细胞、MTX及ELISA筛选高水平表达CNTF的细胞克隆。手术显微镜直视下经角膜缘后1mm注射5μl含1×105个高水平表达CNTF的HFL成纤维细胞至4～5周龄RCS大鼠右眼视网膜下间隙,左眼不手术或注射PBS作为对照。分别于移植术后2、4、6、8、10、12及15周随机取1只鼠摘除眼球作光镜观察,随机取2只鼠摘除眼球作电镜观察。结果稳定转染CNTF的HFL成纤维细胞能高水平表达CNTF(91046.15pg/ml),7只经光镜观察的移植眼中的4只,其视网膜外颗粒层明显较对照眼厚,保存的光感受器数量明显较对照眼多(P≤0.002)。14只经电镜观察的移植眼中的10只,视网膜外颗粒层光感受器凋亡明显较对照眼少。在光感受器与视网膜色素上皮间堆积的盘膜碎片亦较少。宿主视网膜色素上皮细胞的形态保存较好,并可见吞噬小体。; 黄倩徐萍夏欣胡宏惠王丰李惠明; 关键词：视网膜变性细胞移植光感受器睫状神经营养因子

p-STAT3与MMP-2、MMP-9在胰腺癌组织中表达及其临床意义被引量：12: 2007年; 信号传导和转录激活因子3（signal transduction and activators of transcription-3,STAT3）是近年来研究异常活跃的转录因子，多项研究结果显示STAT3在多种肿瘤组织与细胞系中异常表达和活化。我们的研究发现胰腺癌组织中存在P-sTAT3的过表达，并与胰腺癌临床病理分期、淋巴结转移和微血管密度有关，; 黄陈裘正军孙晶陈钢柴小军胡宏惠曹俊; 关键词：胰腺癌组织 MMP-2 临床病理分期 STAT3 微血管密度

VEGF在小鼠膀胱癌肿瘤生长与转移中的作用被引量：1: 2003年; 探讨VEGF在膀胱肿瘤生长和转移中的作用,实验结果表明,反义VEGF121表达质粒转染能够明显降低肿瘤细胞产生VEGF.稳定转染的克隆其VEGF的表达量仅为未转染的亲代细胞的12％及19％.低水平表达VEGF的肿瘤细胞在体外的生长速度与未转染的亲代细胞间无明显差异,但在同系小鼠体内的致瘤能力、生长速度及肺、肝等实质器官的转移率等均明显低于亲代细胞.进一步比较高水平与低水平表达VEGF的肿瘤细胞对体外培养的小鼠血管内皮细胞生长的影响、体内肿瘤组织中微血管数目及通透性等,证实膀胱癌细胞产生VEGF的能力与其诱导肿瘤新生血管形成的能力一致,在肿瘤生长与转移过程中起重要作用.; 王丰吴继红田毓华陈霞芳胡宏惠武文森李川源黄倩; 关键词：肿瘤膀胱癌新生血管形成血管内皮细胞生长因子反义小鼠 VEGF

免疫抑制剂对小鼠膀胱癌进程和转移的不同效应被引量：2: 2007年; 利用稳定表达绿色荧光蛋白的高度恶性膀胱癌细胞株BTT-T739-gfp建立皮下肿瘤模型,对比分析在常规免疫抑制剂量下,环孢素、雷帕霉素在肿瘤发展和转移方面的不同效应及其可能的作用机制.24只T739小鼠随机分为对照组、环孢素组、雷帕霉素组.环孢素、雷帕霉素剂量分别为10mg/(kg·day)、1.5mg/(kg·day),腹腔注射.观察荷瘤小鼠生存情况,计算荷瘤容积变化,以及肿瘤在肺和肝脏的转移情况,分析其作用的可能机制.结果显示,常规免疫抑制剂量下,与对照组和环孢素组比较,雷帕霉素具有明显的抗肿瘤效应.雷帕霉素可显著提高荷瘤小鼠的生存,观察期末,对照组、环孢素组及雷帕霉素组小鼠荷瘤生存率分别为62.5%、50%、100%,环孢素组与雷帕霉素组差异显著,在观察期内与对照组、环孢素组比较,雷帕霉素可显著抑制负荷肿瘤的容积.雷帕霉素应用后,肿瘤内血管显著减少,肿瘤细胞分泌VEGF的能力明显降低,与肿瘤血管形成有关基因VEGF、HIF-1α的转录活化明显受到抑制.结果证实雷帕霉素具有显著的抗肿瘤效应,这一作用与其抑制肿瘤内血管形成明显相关.抑制VEGF-A、HIF-1α等促进血管形成因子的转录、表达是其主要的作用方式之一.; 刘永王丰袁琳胡宏惠唐孝达; 关键词：肿瘤免疫抑制剂雷帕霉素环孢素血管形成

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胡宏惠

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