李凌
- 作品数：10 被引量：55H指数：5
- 供职机构：上海市第一人民医院更多>>
- 发文基金：上海市卫生局“百人计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 早期移植性肿瘤生长与新生血管形成过程观察及机理研究
- 黄倩王丰李川源徐萍田毓华李凌吴继红武文森胡宏惠陈霞芳谢匡成易苗英刘文文王晓莉
- 该课题采用GFP表达质粒或GFP逆转录病毒介导GFP基因转移，建立了多种能持续、稳定表达GFP的肿瘤细胞株。建立了新的，以GFP基因标记的膀胱和视网膜原位肿瘤动物模型，观察到了接近自然状态下的肿瘤生长方式、转移途径和部位...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤新生血管VEGF
- 新型高转移膀胱癌细胞株及其建立方法
- 本发明属肿瘤生物学领域。本发明以高转移膀胱癌细胞株BTT细胞株为宿主细胞,将绿色荧光蛋白基因转导入BTT细胞株,建立新型高转移膀胱癌细胞株。宿主细胞生物学特征不变,标记物无毒、无害,在肿瘤细胞生长、增长及分裂过程中不丢失...
- 黄倩武文森李川源徐萍李凌王丰刘文文顾青
- 文献传递
- 脂质体介导质粒DNA转移至视网膜的观察被引量：6
- 2002年
- 目的 观察脂质体是否能介导目的基因转移至视网膜及脂质体潜在的毒副作用 ,探讨脂质体在视网膜疾病基因治疗中的应用价值。方法 通过体外细胞转染实验优化阳离子脂质体与质粒DNA的比例 ,然后将脂质体 DNA混合物注射至Spregue Dawley(SD)及Royalcollegeofsurgeon(RCS)大鼠视网膜下间隙 ,荧光显微镜观察目的基因的表达 ,病理学检查及电镜观察视网膜的组织形态学变化。结果 阳离子脂质体介导转移的绿色荧光蛋白表达质粒在视网膜细胞中表达时间 >4周。但转染后 4周 ,正常SD大鼠的光感受器外节开始出现肿胀变性 ;8周时光感受器的细胞核明显减少 ,仅剩单层细胞 ,外节脱落或消失 ;双极细胞也出现凋亡 ;视网膜内可见新生血管。 5只 4周龄的RCS大鼠经阳离子脂质体介导睫状体神经营养因子 (cillaryneurotrophicfactor,CNTF)表达质粒转移至视网膜 ,3～ 5周时镜下见 3只实验眼视网膜光感受器保存情况明显比对照眼好。结论 阳离子脂质体可有效介导目的基因转移至视网膜细胞内 ;脂质体介导的CNTF基因转移对RCS大鼠视网膜光感受器有一定的保护作用 ,但对正常的视网膜神经细胞特别是光感受器有一定的毒副作用。
- 王丰夏欣胡宏惠李凌田毓华陈霞芳黄倩
- 关键词：脂质体转染视网膜疾病
- 电穿孔介导质粒DNA肿瘤内转移抑制恶性肿瘤生长与转移被引量：13
- 2002年
- 利用携带绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)编码基因的表达质粒 ,测试电穿孔方法介导目的基因活体组织内转移的效率并优化电击参数 .在此基础上采用电穿孔技术直接将编码白介素 12 (IL 12 )、白介素 2 (IL 2 )、粒单细胞克隆刺激因子 (GM CSF)等免疫调节因子或反义血管内皮细胞生长因子 12 1(VEGF12 1)、可溶性血管内皮细胞膜受体 (sFlk 1及ExTek)等血管生成抑制因子表达质粒转移至肿瘤局部 .实验结果表明电穿孔介导GFP表达质粒肌肉内转移的效率较高 ,GFP可在肌细胞内持续高水平表达 3周以上 ,而在肿瘤细胞内只能表达 4～ 6d ,但高电压短脉冲电击组肿瘤内GFP阳性细胞数比低电压长脉冲组高 2 6 8倍 .多次电击介导IL 12表达质粒转移至肿瘤组织内 ,可有效地抑制小鼠膀胱癌BTT gfp、人乳腺癌MCF 7及肝癌SMMC 772 1 gfp的生长 .MCF 7对血管生成抑制因子基因转移治疗较敏感 ,单独应用反义VEGF12 1、sFlk 1或ExTek即显示明确的治疗效果 .SMMC 772 1 gfp单独应用sFlk 1有效 .小鼠膀胱癌对单独应用反义VEGF12 1、sFlk 1或ExTek治疗效果不理想 ,但联合应用sFlk 1和ExTek仍然可以有效地抑制肿瘤生长与转移 ,甚至使肿瘤缩小或消失 .提示电穿孔技术是一项高效、安全。
- 王丰陈霞芳田毓华吴继红李凌李川源黄倩
- 关键词：电穿孔质粒DNA恶性肿瘤生长免疫调节血管生成肿瘤转移
- 玻璃体内注射他克莫司对异种移植的视网膜色素上皮细胞存活的影响
- 2003年
- 目的 观察少量、多次玻璃体内注射免疫抑制剂他克莫司 (FK5 0 6 )对移植到兔眼视网膜下间隙内的人视网膜色素上皮 (retinal pigmentepithelium ,RPE)细胞存活情况的影响。 方法 采用绿色荧光蛋白 (green fluorescent protein,GFP)逆转录病毒感染人 RPE细胞。将 5 0μl(4× 10 3个 /μl)表达 GFP的人RPE细胞悬液注射到 18只白兔及 10只灰兔双眼视网膜下间隙 ,手术后所有兔左眼玻璃体内注射 5 μlFK5 0 6 (5μg/μl) ,每周 1次 ,连续 5周 ,然后间周一次至 2 0周 ;右眼不注射作为对照。眼球壁铺片倒置荧光显微镜观察移植细胞的存活状态。 结果 白兔于移植后 1、2、3、4、6、10、11、14、18、2 0、2 3、2 4、2 5、33、5 4周 ,灰兔于移植后 4、5、6、7、14、18、2 0、2 6周双眼视网膜下均可见表达的 GFP细胞 ,但移植术后 1～ 14周内玻璃体内注射了 FK5 0 6的左眼视网膜下 RPE- GFP细胞形态、细胞膜的完整程度均比未注射的右眼好。 18周后 ,7只白兔和 3只灰兔双眼视网膜下移植细胞的状态差异不明显。眼球切片苏木素 -伊红 (hema-toxylin- eosin,HE)染色观察结果显示 ,移植术后 1～ 6周 ,6只白兔和 3只灰兔右眼脉络膜小血管周围可见灶性或弥散的淋巴细胞 ,应用了 FK5 0 6的左眼淋巴细胞的浸润明显减少。
- 王丰吴继红夏欣李凌徐萍易苗英陈霞芳许迅黄倩
- 关键词：玻璃体他克莫司异种移植视网膜色素上皮RPE
- 一种新的高转移膀胱癌动物模型的建立被引量：16
- 2002年
- 目的 建立一种简便、可靠的小鼠膀胱癌模型。方法 将绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒导入小鼠膀胱癌细胞株BTT T73 9,G418筛选稳定表达GFP的克隆。然后接种于同系小鼠膀胱壁内及后腿皮下 ,荧光显微镜直接观察肿瘤细胞生长、浸润与微转移 ,流式细胞术定量分析转移的肿瘤细胞数 ,并与常规石蜡切片苏木素 伊红 (HE)染色比较。结果 经GFP标记的肿瘤细胞在荧光显微镜下发出绿色荧光 ,膀胱原位接种 (2～ 4)× 10 5后 1周即出现膀胱肿大、血尿 ,以后膀胱肿大加重、出现输尿管阻塞、肾盂积水 ,以及肾、腹腔、肺、肝、脾等远处转移。结论 GFP标记的BTT T73 9膀胱癌细胞和膀胱癌动物模型可十分简便、准确判断膀胱癌肿瘤细胞生长、浸润与微转移等。
- 李凌武文森徐萍王丰谢匡成陈霞芳易苗英顾青李川源黄倩
- 关键词：膀胱肿瘤肿瘤转移动物模型绿色荧光蛋白
- 新型高转移膀胱癌细胞株及其建立方法
- 本发明属肿瘤生物学领域。本发明以高转移膀胱癌细胞株BTT细胞株为宿主细胞，将绿色荧光蛋白基因转导入BTT细胞株，建立新型高转移膀胱癌细胞株。宿主细胞生物学特征不变，标记物无毒、无害，在肿瘤细胞生长、增长及分裂过程中不丢失...
- 黄倩武文森李川源徐萍李凌王丰刘文文顾青
- 文献传递
- 动态观测肿瘤与新生血管的方法
- 本发明属肿瘤生物学领域,具体涉及采用鼠耳作为肿瘤细胞移植与观察部位,结合GFP基因标记的肿瘤细胞和Rhodamine标记的Dextran作血管造影,非创伤性的、直观、实时、动态显示肿瘤细胞生长和新生血管形成过程的新方法,...
- 黄倩李川源李凌
- 文献传递
