田毓华
- 作品数：33 被引量：129H指数：6
- 供职机构：上海市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市卫生局“百人计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基因表达谱分析小鼠膀胱癌VEGF信号转导通路的作用被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肿瘤新生血管形成过程中的作用,与肿瘤生长、转移的关系及其作用机制。方法:通过转染反义VEGF表达质粒,建立遗传背景相同但产生VEGF能力明显不同的肿瘤细胞株,观察VEGF对细胞生长速率、体内成瘤及肿瘤生长和转移能力的影响。分别将来自高与低水平表达VEGF的肿瘤细胞和肿瘤组织的cDNA与含有16 361个人cDNA芯片杂交,分析差异表达基因及基因表达谱变化,并通过实时荧光定量PCR进行验证。结果:反义VEGF表达质粒可选择性抑制肿瘤细胞产生VEGF,VEGF产生减少并不影响肿瘤细胞在体外的生长速率和生长方式,但在小鼠体内生长明显变慢,转移减少。基因芯片杂交结果显示高与低水平表达VEGF的肿瘤细胞和肿瘤组织中存在82个共同的差异表达在2倍以上的基因。进一步从中选择出23个杂交信号强度较高(信号强度大于或等于40)的基因,根据cDNA芯片上的探针顺序,比对小鼠cDNA及EST数据库,在其中杂交信号强度较高(信号强度大于或等于40)的23个基因中,找到了17个同源基因,其中9个为功能已知基因。由于这些基因并非已知的新生血管形成有关的基因,提示可能有更多的新基因参与肿瘤新生血管形成。结论:VEGF通过调控肿瘤新生血管形成影响肿瘤的生长和转移,而VEGF的作用需要多个基因或信号通路构成的复杂网络来完成。
- 王丰田毓华陈霞芳黄倩
- 关键词：基因表达谱
- 成纤维细胞作为有效的抗原提呈细胞诱导特异性CTL反应被引量：1
- 2000年
- 目的:探讨利用癌症患者自体成纤维细胞作为抗原提呈细胞,诱导抗肿瘤的细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应的可能性。方法:制备阳离子脂质体,并包裹大肠癌相关抗原CAHb3。制备自体成纤维细胞、肿瘤细胞和外周血淋巴细胞(PBL)。借助脂质体将CAHb3抗原导入成纤维细胞浆内,采用此细胞抗原周期刺激法,体外诱导抗原特异性CTL反应。制备自体肿瘤的荷瘤鼠模型,并进行过继治疗实验。结果:成功地诱导了抗原特异性CTL反应,获得的CTL在体外对亲本肿瘤细胞有显著的细胞毒活性,而不杀伤异体的抗原靶细胞,其培养上清中IFNγ和TNFα分泌水平增高。结论:大肠癌患者自体成纤维细胞经CAHb3抗原修饰后,可以作为有效的抗原提呈细胞,诱导抗大肠癌的抗原特异性CTL反应。
- 管红兵温文倩顾青田毓华
- 关键词：成纤维细胞抗原提呈大肠肿瘤CTL
- CA-Hb3抗原触发的成纤维细胞诱导大肠癌患者的特异性CTL反应
- 1999年
- 大肠癌患者的成纤维细胞经阳离子脂质体导入ＣＡＨｂ３抗原，作为抗原刺激细胞诱导自身外周血淋巴细胞的细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）反应。实验成功地激活了抗原特异性ＣＴＬ，获得的ＣＴＬ在体外对亲本肿瘤细胞有显著的细胞毒活性，其培养上清中ＩＦＮγ和ＴＮＦα分泌水平增高。同时制备自身肿瘤的荷瘤鼠模型并进行过继治疗，ＣＴＬ一次过继能够延缓肿瘤的形成和生长，降低荷瘤鼠的死亡率，多次过继能够完全治愈肿瘤。以流式细胞仪检测细胞的免疫表型，显示ＣＴＬ主要为ＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ２８＋Ｔ细胞亚群。研究结果表明以ＣＡＨｂ３抗原触发的成纤维细胞可以诱导大肠癌患者自身的抗原特异性ＣＴＬ反应。
- 管红兵温文倩顾青田毓华
- 关键词：大肠癌脂质体成纤维细胞CTL
- 早期移植性肿瘤生长与新生血管形成过程观察及机理研究
- 黄倩王丰李川源徐萍田毓华李凌吴继红武文森胡宏惠陈霞芳谢匡成易苗英刘文文王晓莉
- 该课题采用GFP表达质粒或GFP逆转录病毒介导GFP基因转移，建立了多种能持续、稳定表达GFP的肿瘤细胞株。建立了新的，以GFP基因标记的膀胱和视网膜原位肿瘤动物模型，观察到了接近自然状态下的肿瘤生长方式、转移途径和部位...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤新生血管VEGF
- 二氯化钴对腺病毒基因表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:研究二氯化钴(CoCl2)对缺氧反应元件调控E1AE1B表达的条件复制型腺病毒载体(Ad-5HRE-E1AE1B-RFP)和缺乏缺氧反应元件的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-EGFP)在肿瘤细胞内表达和复制的影响。方法:肿瘤细胞经不同浓度的CoCl2处理后,Western印迹法检测缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达;倒置荧光显微镜、FCM法及空斑形成实验等观察经CoCl2处理后,感染条件复制型腺病毒和(或)复制缺陷型腺病毒的肿瘤细胞中外源基因的表达水平和病毒复制情况;小动物成像仪观察缺氧调控的条件复制型腺病毒在肿瘤内提高复制缺陷型腺病毒表达的效率。结果:适当浓度的CoCl2(0.4和0.08μg/mL)能使胃癌细胞株(SGC7901)中HIF-1α蛋白稳定表达并积聚,可较好地模拟缺氧状态;在0.4μg/mLCoCl2作用下,Ad-5HRE-E1AE1B-RFP对肿瘤细胞的感染效率明显提高,表现为外源基因RFP阳性表达的百分率和荧光强度均明显提高,但空斑形成实验显示Ad-5HRE-E1AE1B-RFP并没有复制。0.4μg/mLCoCl2也能提高其他非缺氧调控的复制缺陷型腺病毒如Ad-EGFP、Ad-Luc的感染效率和表达水平;Ad-5HRE-E1AE1B-RFP与复制缺陷型腺病毒Ad-Luc联合注射裸鼠肿瘤能显著提高Ad-Luc的表达。结论:CoCl2能明显提高腺病毒的基因表达水平,其作用机制不仅与CoCl2诱导缺氧有关,也可能与影响基因转录有关。
- 刘新建季迅达田毓华陈霞芳谢匡成吴继红张圣海徐萍李川源黄倩
- 关键词：胃肿瘤腺病毒感染基因表达调控肿瘤缺氧诱导因子1二氯化钴
- 基于岗位评价的医院行政管理人员绩效分配被引量：9
- 2020年
- 目的建立切实可行的医院行政管理人员绩效分配办法,以发挥管理乘数效应、增强转型发展后劲、实现医院战略目标。方法运用岗位评价技术,评价不同行政岗位价值,形成岗位间相对价值序列,与绩效分配挂钩,并且利用基尼系数对不同行政岗位薪酬系数的分配进行公平性分析。结果以医院岗位价值评价为依据,引入“岗位薪酬系数”,初步建立医院行政人员绩效分配体系,得出院领导、中层正职、中层副职、处室人员的平均岗位薪酬系数分别是94.33、89.01、77.73和68.46。行政系列各部门平均岗位薪酬系数在71.11~64.77,党务系列各部门平均岗位薪酬系数在69.63~64.11。按不同类别行政人员2015、2017、2018、2019年平均岗位绩效奖计算得到基尼系数分别为0.2841、0.3130、0.2892、0.2916,在相对合理范围内。按全部工作人员2015、2017、2018、2019年度个人绩效最高月份的收入计算得到基尼系数分别为0.3154、0.3206、0.2895、0.3189,仍在相对合理范围内。结论行政岗位绩效分配应有据可依,拉开差距并合理体现,以促进行政人员的任务执行力和工作效率以及部门重点任务完成率不断提高。
- 夏葳李文进田毓华
- 关键词：岗位价值岗位评价绩效分配绩效管理行政管理人员基尼系数
- 电穿孔介导质粒DNA肿瘤内转移抑制恶性肿瘤生长与转移被引量：13
- 2002年
- 利用携带绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)编码基因的表达质粒 ,测试电穿孔方法介导目的基因活体组织内转移的效率并优化电击参数 .在此基础上采用电穿孔技术直接将编码白介素 12 (IL 12 )、白介素 2 (IL 2 )、粒单细胞克隆刺激因子 (GM CSF)等免疫调节因子或反义血管内皮细胞生长因子 12 1(VEGF12 1)、可溶性血管内皮细胞膜受体 (sFlk 1及ExTek)等血管生成抑制因子表达质粒转移至肿瘤局部 .实验结果表明电穿孔介导GFP表达质粒肌肉内转移的效率较高 ,GFP可在肌细胞内持续高水平表达 3周以上 ,而在肿瘤细胞内只能表达 4～ 6d ,但高电压短脉冲电击组肿瘤内GFP阳性细胞数比低电压长脉冲组高 2 6 8倍 .多次电击介导IL 12表达质粒转移至肿瘤组织内 ,可有效地抑制小鼠膀胱癌BTT gfp、人乳腺癌MCF 7及肝癌SMMC 772 1 gfp的生长 .MCF 7对血管生成抑制因子基因转移治疗较敏感 ,单独应用反义VEGF12 1、sFlk 1或ExTek即显示明确的治疗效果 .SMMC 772 1 gfp单独应用sFlk 1有效 .小鼠膀胱癌对单独应用反义VEGF12 1、sFlk 1或ExTek治疗效果不理想 ,但联合应用sFlk 1和ExTek仍然可以有效地抑制肿瘤生长与转移 ,甚至使肿瘤缩小或消失 .提示电穿孔技术是一项高效、安全。
- 王丰陈霞芳田毓华吴继红李凌李川源黄倩
- 关键词：电穿孔质粒DNA恶性肿瘤生长免疫调节血管生成肿瘤转移
- 人肝癌细胞中缺氧反应元件对微环境的反应被引量：1
- 2008年
- 目的:通过观察缺氧反应元件(hypoxia-response element,HRE)调控下,绿色荧光蛋白质(green fluorescent protein,GFP)构建的肝癌细胞Bel-7402/5HRE-EGFP在缺氧条件下,缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等表达水平的变化,研究HRE对微环境的反应特性。方法:以5个串连的HRE和巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)的微小启动子为转录调控元件、GFP为报告基因构建表达载体,应用FCM和细胞免疫染色法观察缺氧、一氧化氮、过氧化物和酸性pH等微环境的变化对人肝癌细胞Bel-7402中HRE活性的影响,以及缺氧条件下HIF-1α、VEGF表达水平的变化。观察缺氧探针哌莫硝唑的染色强度和分布与HIF-1α、VEGF和GFP表达强度和分布之间的关系,探求裸鼠体内肿瘤组织缺氧对HRE活性及其相关基因表达的影响。结果:肝癌细胞中HRE对缺氧非常敏感,肿瘤细胞和组织缺氧时可上调HIF-1α和VEGF的表达,两者的分布也基本一致。结论:缺氧在调控肝癌血管生成因子表达方面可能起着重要的作用。
- 王丰陈霞芳韦芳吴继红谢匡成田毓华易苗英李川源黄倩
- 关键词：缺氧缺氧诱导因子1缺氧反应元件绿色荧光蛋白质类
- 脑梗塞髓鞘蛋白反应性IFN-γ的检测被引量：3
- 1997年
- 通过２４例脑梗塞病人和２１例正常对照外周血淋巴细胞进行体外培养，检测其ＭＢＰ和ＭＰＬＰ反应性Ｔ淋巴细胞所分泌的ＩＦＮ－γ，结果发现实验组ＭＢＰ和ＭＰＬＰ反应性ＩＦＮ－γ的产生均高于对照组，差异显著（Ｐ值分别小于０．００２５和０．０２５），提示脑梗塞发生后缺血所致的脑组织的破坏使髓鞘成分作为隐蔽抗原释放，导致相应的髓鞘蛋白反应性Ｔ淋巴细胞的增殖，这些Ｔ细胞及其所分泌的细胞因子可能是脑缺血后造成脑组织损害的第二位因素。
- 王炜管红兵顾青田毓华田毓华
- 关键词：脑梗塞干扰素-Γ
- 基于病种的绩效管理在优化医院业务结构中的探索被引量：10
- 2020年
- 目的 建立以“病种管理”为抓手和以“绩效评价”为切入点的绩效管理模式,促进医院“转方式、调结构”,进一步强化大型公立医院诊治疑难杂症和危急重症的功能定位.方法 结合文献分析和专家咨询,建立医院病种绩效管理评价体系,在探索中不断完善.结果 通过病种绩效管理实践,对病种绩效运行指标进行监测、评价、分析,结果可应用于绩效激励.结论 基于病种的绩效管理,促进了医院业务结构优化,助力了医院运行策略调整,推动了医院管理水平提升.
- 夏葳田毓华李文进殷婷
- 关键词：病种管理绩效评价
