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顾青: 作品数：136 被引量：295H指数：8; 供职机构：上海市第一人民医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局青年科研基金上海市自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学环境科学与工程电子电信更多>>

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鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC-Ag)分析及其临床应用被引量：2: 1998年; 鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC-Ag)是由Kate与Torigae于1977年首先描述的一种肿瘤相关抗原(TA-4)分子量接近48000道尔顿的特定糖蛋白。近年来广泛应用于肿瘤临床研究中,对于肿瘤诊断、疗效观察、复发监测和预后判断等均有实用价值。我院自1990年以来,对胸外科、呼吸科等住院病人疑有鳞癌患者进行检测119例201次,其中恶性肿瘤104例;良性肿瘤或其他疾病15例。现总结报道于后。; 吴亚农温文倩顾青杨明训方作平; 关键词：鳞状上皮细胞癌相关抗原呼吸道肿瘤

CA-Hb3抗原触发的成纤维细胞诱导大肠癌患者的特异性CTL反应: 1999年; 大肠癌患者的成纤维细胞经阳离子脂质体导入ＣＡＨｂ３抗原，作为抗原刺激细胞诱导自身外周血淋巴细胞的细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）反应。实验成功地激活了抗原特异性ＣＴＬ，获得的ＣＴＬ在体外对亲本肿瘤细胞有显著的细胞毒活性，其培养上清中ＩＦＮγ和ＴＮＦα分泌水平增高。同时制备自身肿瘤的荷瘤鼠模型并进行过继治疗，ＣＴＬ一次过继能够延缓肿瘤的形成和生长，降低荷瘤鼠的死亡率，多次过继能够完全治愈肿瘤。以流式细胞仪检测细胞的免疫表型，显示ＣＴＬ主要为ＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ２８＋Ｔ细胞亚群。研究结果表明以ＣＡＨｂ３抗原触发的成纤维细胞可以诱导大肠癌患者自身的抗原特异性ＣＴＬ反应。; 管红兵温文倩顾青田毓华; 关键词：大肠癌脂质体成纤维细胞 CTL

灵杞黄斑颗粒含药血清对兔视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用被引量：2: 2012年; 目的:探讨灵杞黄斑颗粒含药血清对体外培养的兔视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化损伤的保护作用。方法:运用血清药理学方法制备灵杞黄斑颗粒含药血清,用过氧化氢(500μmol/L)诱导RPE细胞建立体外氧化应激模型。实验分为正常对照组、模型组、空白血清组、低剂量药物血清组和高剂量药物血清组。分别采用原位末端转移酶标记技术(teminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)和流式细胞仪对各组RPE细胞的凋亡进行检测,并采用蛋白质印迹法检测各组细胞胱天蛋白酶3(caspase-3)及Bcl-XL蛋白表达的变化。结果:流式细胞仪检测结果显示,正常对照组、模型组、空白血清组、低剂量药物血清组、高剂量药物血清组各组凋亡率分别为(4.85±0.26)%、(20.02±1.37)%、(21.84±0.94)%、(13.56±0.55)%、(8.58±0.39)%;含药血清组的凋亡率比模型组明显减少(P<0.05)。TUNEL检测结果显示,凋亡细胞核呈现黄色着染,低剂量药物血清组中散见凋亡细胞,数量明显少于模型组,高剂量药物血清组中凋亡细胞进一步减少。Caspase-3和Bcl-XL表达检测显示,模型组caspase-3蛋白表达上调,高于高剂量药物血清组(P<0.05);而Bcl-XL蛋白表达下调,显著低于低剂量药物血清组和高剂量药物血清组(P<0.01)。结论:灵杞黄斑颗粒含药血清对兔RPE细胞氧化损伤具有一定的保护作用,该作用可能是通过清除自由基,下调caspase-3并上调Bcl-XL的表达实现的。; 李彩红邱庆华吴星伟宫媛媛解正高宋毅顾青; 关键词：年龄相关性黄斑变性视网膜色素上皮细胞血清药理学

培养的胚胎视网膜神经细胞Ca^(2+)分布与Ca^(2+)通道特征被引量：1: 2002年; 目的　检测分析培养的胚胎早期视网膜神经细胞游离钙 (Ca2 + )分布与钙 (Ca2 + )通道特征。　方法　体外培养 11～ 15周胎儿视网膜神经细胞 ,在含 Ca2 +与不含 Ca2 +的 Hepes缓冲液中与钙荧光指示剂 Fluo3孵育染色 ,同时加入或不加入异博定、佩尔地平或地塞米松 ,共聚焦显微镜观察记录游离 Ca2 +分布 ,以及受不同浓度 K+刺激后 Ca2 +通道开放与 Ca2 +转移情况。　结果　培养的 11～ 15周胎儿视网膜神经元及神经胶质细胞受 K+ 刺激后均出现明显的 Ca2 + 转移与再分布 ,在缺乏细胞外 Ca2 + 的情况下 ,细胞浆内钙库仍可迅速释放 Ca2 +并转移至细胞核内。异博定、佩尔地平及地塞米松能够抑制细胞外 Ca2 +进入视网膜神经细胞内。　结论　胚胎早期视网膜神经元及神经胶质细胞存在 L型 Ca2 + 通道。; 刘文文徐萍郭强苏刘军顾青黄倩; 关键词：胚胎视网膜神经元钙通道神经胶质细胞

曲安奈德及其赋形剂对视网膜müller细胞的毒性观察: ＜正＞目的:研究曲安奈德制剂中赋形剂对培养的muller细胞的毒性反应。方法:将培养的muller细胞分别与0．05mg／ml 的曲安奈德或去除赋形剂的曲安奈德孵育2天后用MTT法测定细胞生长抑制率、倒置显微镜下观察细胞...; 顾青; 文献传递

牛视网膜微血管内皮细胞和周细胞的体外培养被引量：16: 2004年; 目的　探讨牛视网膜微血管内皮细胞 (BREC)和周细胞 (BRP)的体外选择性培养方法。　方法　结合视网膜微血管的消化分离 ,采用含 10 %人血清、10 0 μg/ ml肝素的 Dulbecco改良 Eagle培养基(DMEM)和含 2 0 %胎牛血清的 DMEM培养基分别选择性培养 BREC和 BRP。通过荧光显微镜观察乙酰化低密度脂蛋白 (Dil- Ac- L DL )吞噬情况 ,应用 Von Willebrand因子抗体通过免疫组织化学方法鉴定BREC,并通过α-平滑肌肌动蛋白抗体免疫组织化学鉴定 BRP。结果　通过选择性培养获得的 BREC和BRP的纯度达到 98%以上 ,并能连续传代。BREC早期似小鲤鱼状聚集在微血管碎片周围 ,呈片状鹅卵石样单层生长 ,存在接触性抑制 ;BRP多散布在距血管碎片稍远处 ,形状不规则 ,呈无接触性抑制生长。BREC可吞噬 Dil- Ac- L DL,细胞浆内有荧光表达 ;消化传代后 ,BREC中 Von Willebrand因子表达阳性 ,而 α-平滑肌肌动蛋白表达阴性 ;BRP的α-平滑肌肌动蛋白表达阳性 ,而 Von Willebrand因子表达阴性。　结论　选择性培养基的应用和培养皿的处理可分别获得较高纯度的 BREC和 BRP,简单且具有良好的重复性 ,无需额外步骤来去除 BREC中混杂的 BRP。; 夏欣许迅顾青; 关键词：视网膜微血管内皮细胞周细胞 BRP 体外培养细胞形态学

EGFR反义寡核苷酸对人视网膜神经胶质细胞增生的影响被引量：3: 2002年; 目的　观察表皮生长因子受体 (epiderm al growth factor receptor,EGFR)反义寡核苷酸 (antisense oligonucleotide,ASODN)对人视网膜神经胶质 (retinal glial,RG)细胞增生的影响。方法　人视网膜神经胶质细胞的原代培养 ,用脂质体 (L ipofectin)作为载体将修饰型 EGFR ASODN转染 RG细胞后 ,MTT法测细胞增生活性 (吸光度 A值 )的变化 ,流式细胞仪观察细胞周期的变化。结果　 EGFR ASODN转染 RG细胞后 ,细胞的增生活性降低 ,对 RG细胞生长增生的抑制率约为 46 .5 % ,进入 S期的细胞减少。结论　 EGFR A-SODN能够抑制人; 富名水张皙邱庆华顾青; 关键词：视网膜神经胶质细胞表皮生长因子受体反义寡核苷酸脂质体细胞增生

复方血栓通对猴脉络膜一视网膜内皮细胞增生、移行和管腔形成的作用被引量：1: 2011年; 目的探讨复方血栓通干预猴脉络膜．视网膜内皮细胞（Rr／6A）参与血管生成的作用及机理。方法实验研究。本研究分为四部分：①取对数生长期RF／6A细胞进行培养，设立空白对照组、阳性对照组以及不同浓度的复方血栓通观察组．每组均加入终浓度为10ng／ml的血管内皮生长因子（VEGF）．阳性对照组加入终浓度0．20mg／ml的硫酸鱼精蛋白，复方血栓通观察组设立0．39～50．00mg／ml的多个不同浓度组。培养24h后采用酶联免疫检测仪测定各组吸光度4值，观察不同浓度的复方血栓通对VEGF诱导的RF／6A细胞增殖的影响。②设立空白对照组和终浓度为3．13、6．25、12．50mg／ml的复方血栓通组，培养24h后检测不同浓度复方血栓通对RF／6A细胞移行的影响。⑧设立空白对照组和终浓度为0．39、0．78、1．56mg／ml的复方血栓通组，培养12h后检测不同浓度的复方血栓通对RF／6A细胞管腔形成的影响；④设立空白对照组、终浓度为0．20mg／ml的硫酸鱼精蛋白阳性对照组和终浓度为1．56、3．13、6．25mg／ml的复方血栓通组，培养24h后，运用Western Blot和实时定量逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）的方法，分别检测不同浓度的复方血栓通对RF／6A细胞表达VEGF、基质金属蛋白酶2（MMP．2）蛋白和mRNA的影响。对多组计量资料进行单因素方差分析。结果①各组间4值差异有统计学意义（F=158．669，P〈0．01），同空白对照组比较，0．78～25．00mg／ml浓度的复方血栓通对VEGF诱导的RF／6A细胞增殖具有明显抑制作用（尸均〈0．011；②复方血栓通浓度为0、3．13、6．25和12．50mg／ml时，RF／6A细胞移行数分别为123．3±13．8、114．3±15．5、54．0±6．1和40．3±10．1，组间差异有统计学意义（B36．918，P〈0．01）；与空白对照组比较，6．25和12．50mg／ml浓度的复方血栓通对RF／6A细胞移行具有明显�; 罗旭昇吴星伟顾青张红梅施宇华仇亚婷; 关键词：复方血栓通血管生成抑制剂基质金属蛋白酶类细胞增生细胞移行

曲安奈德体外对人视网膜色素上皮细胞功能和结构的影响: 2007年; 目的:探讨曲安奈德(triamcinolone acteonide,TA)对人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞功能和活性的影响。方法:通过MTT(四甲基偶氮唑盐比色法),细胞移行实验,细胞黏附实验,RT-PCR检测不同浓度TA(包括含赋形剂的和去除赋形剂的,以及纯赋形剂)在不同时间段对RPE细胞增殖,RPE细胞移行,RPE细胞黏附和线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)损伤的影响。结果:浓度大于0.1g/L含赋形剂和不含赋形剂的TA以及单纯赋形剂对细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05)。细胞移行实验:0.1g/L浓度TA在3个时间点与含血清对照组相比,对100mL/L血清刺激的RPE细胞的移行有显著的抑制作用(P<0.05)。在24,48h与含血清对照组相比各实验组对RPE细胞的黏附有显著的抑制作用(P<0.05)。不同浓度TA(含赋形剂)与RPE细胞作用24h后,结果mtDNA缺失片段不明显,未见明显差异,长片段明显,各组无明显差异。结论:TA对RPE细胞功能(移行能力,黏附能力,增殖能力)有抑制作用,对RPE细胞mtDNA影响不明显。; 黄文礼唐敏顾青樊莹; 关键词：曲安奈德视网膜色素上皮细胞细胞移行细胞黏附线粒体DNA

视神经损伤时视网膜睫状神经营养因子受体的表达被引量：10: 2005年; 目的研究睫状神经营养因子受体于视神经损伤后不同时间在视网膜中的表达情况,探讨外源性的睫状神经营养因子在神经损伤疾病中的应用价值。方法采用钳夹视神经的方法建立神经损伤的模型,在损伤后1、7、14、28d获取视网膜,提取总RNA及总蛋白,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定视网膜中睫状神经营养因子受体(CNTFR)αmRNA的表达,用WesternBlot方法了解损伤后不同时间CNTFRα蛋白水平的表达。结果在正常大鼠视网膜内CNTFRαmRNA无表达,在损伤后的1、7、14、28d均有一定水平的CNTFRαmRNA的表达,与正常对照比较差别具有显著性意义(P<0.01);损伤后备时间均有CNTFRα蛋白的表达,但CNTFRα蛋白的表达较弱。结论神经损伤后CNTF的表达先短暂升高以后持续下调,而CNTFRα-mRNA在损伤后4周内均有一定量的表达,提示补充外源性CNTF可能改善神经再生的微环境而发挥保护效应。; 杨小丽张皙顾青张喜梅孙晓东; 关键词：视神经损伤神经保护视网膜

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