周鹏
- 作品数：30 被引量：57H指数：5
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- RAM7,一种新的核蛋白分子在小鼠中枢神经系统的表达
- 2004年
- Notch信号途径参与动物多种组织和器官尤其是神经系统的发育调节。 RBP-Jκ是 Notch信号途径中的关键分子 ,RAM7是近年通过酵母双杂交技术发现的与 RBP-Jκ相互作用的蛋白。本实验表达 RAM7C-末端 60 k D的多肽片段 ,并制备特异性的多克隆抗体 ,检测 RAM7在小鼠中枢神经系统的分布。结果显示 :RAM7主要呈细胞核染色 ,在中枢神经系统中广泛分布 ;尾壳核、丘脑室旁核、下丘脑室旁核、室周核等核团内没有 RAM7阳性神经元 ,但存在着一定数量的 RAM7阳性神经纤维 ;另有相当多 RAM7胞浆染色的细胞和神经元以及一些胶质细胞 ,局限在脑室和脑室周围的神经组织中。
- 王键孟艳玲孙强周鹏韩骅
- 关键词：小鼠中枢神经系统生理功能
- hJagged1^(ext)-Fc融合蛋白真核表达载体的构建和表达被引量：2
- 2004年
- 目的 :构建含人Jagged1胞外段 IgFc融合基因片段的质粒 ,并在真核细胞中表达。方法 :从人骨髓细胞中用RT PCR扩增hJagged1基因的胞外段。经DNA测序后 ,将hJagged1基因的胞外段插入改造过的质粒pBluescriptskⅡ中 ,获得hJagged1ext Fc融合基因。将融合基因插入真核表达载体pEF BOSneo ,构建真核表达载体pEF BOSneo hJagged1ext Fc。以其瞬时转染COS7细胞 ,应用RT PCR、细胞免疫荧光技术 ,及夹心ELISA检测融合蛋白的表达。结果 :hJagged1基因的胞外段被有效地扩增。DNA序列分析表明 ,所构建的含hJagged1ext Fc融合基因的质粒与设计相同 ,hJagged1ext Fc融合蛋白得到正确表达。结论 :成功地构建了hJagged1ext Fc融合基因的真核表达载体 ,并在真核细胞中正确表达 ,为进一步研究Jagged1在造血干 /祖细胞的体外扩增奠定了基础。
- 贾洪霞张萍周鹏李军锋韩骅梁英民
- 关键词：NOTCHJAGGED1融合蛋白
- 核糖体蛋白RpL6/Taxreb107核定位信号的确定及启动子分析
- 利用核定位信号捕捉系统确定核糖体蛋白L6(RpL6)的核定位信号(NLS)的位置，并在体外培养的细胞中加以证实.氨基端的30-41和68-84氨基酸残基具有核定位及核仁定位功能.RpL6又称Taxreb107，是HTLV...
- 王冀姝杨曦李荣孙强周鹏韩骅
- 关键词：核糖体蛋白核定位信号启动子转录因子
- 文献传递
- PTD-BCR/ABL-OD融合癌蛋白的表达和跨膜转运被引量：2
- 2005年
- 梁英民叶盛开贾洪霞林媛蒋姗姗吴绒丽周鹏杨曦张萍李军锋李军林韩骅
- 关键词：癌蛋白跨膜转运
- 计算机辅助教学与医学遗传学教学
- 2005年
- 计算机网络与多媒体的教学手段在现代教育中得到了广泛的应用,也是未来教育发展的主要方向,但计算机教学手段仍有很多可以改进的地方,而且也不能完全替代传统的教学方法.具体选择什么样的手段来实施教学,要视教学内容和目的而定.只有二者有机结合,优势互补,才能达到好的效果.
- 周鹏舒青
- 关键词：医学遗传学教学计算机辅助教学教学手段计算机网络现代教育教育发展
- 核基质MINT N端片段(365～1084aa)相互作用蛋白的筛选及鉴定
- 2004年
- 目的 :确定核蛋白MINT(Msx2 interactingnucleartargetProtein)的功能及作用机制 .方法 :利用酵母双杂交的方法 ,以MINTN端第 36 5～ 1 0 84位氨基酸 (MINT F2 )为诱饵用酵母双杂交法筛选小鼠胚胎 9日的cDNA文库 .用诱饵质粒和文库先后转化酵母宿主后 ,对 1 .0× 1 0 8个酵母克隆进行营养筛选和 β 半乳糖苷酶筛选 ,获得 1 2 8个阳性克隆 .并提取质粒进行酶切鉴定 ,将获得的 4个非重复克隆并进行序列分析 .结果 :筛选出 4个与MINT F2相互作用的蛋白 ,它们分别是 :6 7ku层黏连蛋白受体 ,,2个 1 6S核糖体RNA ,精氨酰 tRNA合成酶 .结论 :成功筛选出与MINT F2相互作用的蛋白 。
- 秦红孙强周鹏李军锋韩骅罗晓星
- 关键词：NOTCH信号途径
- BCR/ABL-OD结构域重组蛋白的表达和纯化
- 2005年
- 目的:制备BCR/ABL OD结构域-HIS的重组蛋 白.方法:用RT-PCR方法扩增BCR/ABL OD结构域的基因 片段,测序正确后将其克隆入原核表达载体pET16b中,并进 行酶切鉴定,鉴定正确后转化大肠杆菌BL21,构建表达His- OD融合蛋白的菌株.经IPTG诱导表达后,镍 次氮基三乙酸 (Ni NTA)琼脂糖进行亲和层析纯化,用SDS-PAGE对该融 合蛋白的表达产率及蛋白纯度进行了分析.结果:获得了 His-OD重组融合蛋白,纯度在95%以上,产物得率约75%. 结论:成功制备高纯度His-OD融合蛋白,为进一步研究OD 结构域的生物学功能奠定了基础.
- 叶盛开贾洪霞林媛周鹏杨曦张萍李军锋李军林董潇张兵华梁英民
- 关键词：重组蛋白质类
- 核定位信号筛选系统的构建被引量：9
- 2000年
- 建立了一酵母克隆系统用于克隆含核定位信号 (NLS)的蛋白质的基因 .用表达转录因子GAL4 DNA结合域 - p53(GAL4- DBD- p53)融合蛋白的质粒转化酵母 HF7c,使 GAL4- DBD- p53可结合于报告基因的启动子但因无转录激活域而不能激活转录 .构建一酵母穿梭载体 ,可表达无NLS的 GAL4转录激活域 -大 T抗原 (GAL4- AD- LT)融合蛋白 .融合蛋白基因的下游插入一多克隆位点 .将 c DNA文库插入多克隆位点后 ,如果 c DNA片段可编码 NLS,则 GAL4- AD- LT分子可进入细胞核 ,并通过 LT与 p53的相互作用而使 GAL4- AD结合于启动子和激活报告基因的转录 .构建了这一克隆系统的各质粒 ,并用绿色荧光蛋白 (GFP)验证了其对核内蛋白和胞浆蛋白的甄别能力 .这一系统将有助于从 c DNA文库中筛选编码带有
- 王冀姝陈萍孙强牛立国周鹏张浩韩骅苏成芝
- 关键词：核定位信号基因克隆酵母表达系统融合蛋白
- 带有蛋白转导结构域的Bcr/Abl癌蛋白片段的表达及其跨膜转运被引量：10
- 2001年
- HIV 1编码的反式激活蛋白TAT具有将细胞外蛋白转导进入细胞的基序 ,称为蛋白转导结构域 (PTD) .为研究PTD介导的PTD Bcr Abl融合蛋白的跨膜转运 ,合成了编码PTD的基因片段 ,并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr abl基因片段融合 .在大肠杆菌中表达纯化了融合蛋白 ,将纯化的融合蛋白加入培养的HL60细胞和C2C12细胞后 ,发现PTD基序可以介导Bcr Abl蛋白自由从细胞外跨膜转导进入细胞内 .研究结果可能为用外源蛋白负载 (loading)免疫活性细胞如抗原提呈细胞提供新的途径 .
- 梁英民孙强蒋姗姗陈萍王冀姝李荣周鹏王键黄红艳韩骅
- 关键词：蛋白转导结构域BCR/ABL慢性粒细胞白血病癌蛋白
- 改进教学方法,提高教学质量——生物化学大课教学改革与实践被引量：1
- 2000年
- 生物化学素以抽象、深奥、复杂、记忆量大而使学生倍感困难 ,传统的大课教学的效果并不是很好 ,随着现代化教学手段的不断应用和教学指导思想的转变 ,以讲授为主的课堂教学模式受到了冲击。我们在教学实践中采用了一系列新的方法 ,鼓励学生主动参与 ,激发学生兴趣 ,引导学生积极思考 ,以达到理解。
- 周鹏苏英刘新平衡恩良
- 关键词：生物化学教学改革大课
