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慢性肾脏病生物标志物及其检测研究进展被引量：2: 2009年; 一、生物标志物的定义生物标志物首先是在1989年作为医学主题词被提出来的，当时定义为“可测量和定量的生物学参数”。2001年，美国国立卫生研究院（NIH）对生物标志物的定义进行了规范，定义为通过客观检测和评价能够预示正常生理、病理过程或机体对药物治疗反应的所有生物学特性川。能够从患者身上检测到的任何参数都可以成为生物标志物，比如mRNA表达谱、各种蛋白质、蛋白质组、脂类、影像学检查或者电信号。; 王丽梅吕林莉刘必成; 关键词：生物标志物慢性肾脏病药物治疗反应蛋白质组生物学参数生物学特性

基于直接标记法尿微量白蛋白检测抗体微阵列的构建: 2009年; 目的探讨基于直接标记法的尿微量白蛋白检测抗体微阵列（也称抗体芯片）构建方法，并评价其技术可行性。方法通过玻片处理、活化、固定等程序构建白蛋白抗体芯片。摸索用生物素标记标准品白蛋白及尿液样本的最佳条件。经封闭后加入生物素标记的标准品白蛋白，孵育，洗涤后加入链酶亲和素-Cy3，再经过孵育、洗涤后，用共聚焦激光扫描仪获取荧光强度值。根据不同浓度标准品白蛋白的荧光信号强度值做出浓度-信号强度曲线，并评价其检测灵敏度、特异性、重复性。收集临床糖尿病患者尿液标本，对尿液样本同时行免疫比浊法和抗体芯片法检测白蛋白值。结果生物素标记标准品白蛋白和样本的最佳总蛋白／生物素质量比为2：1。根据标准品白蛋白所做出的标准曲线其R^2〉0．99；捕获抗体浓度为1g／L时，最低白蛋白检测浓度为0．0617mg／L。阵列内变异系数为3．35％～7．59％；阵列间变异系数为6．78％～9．22％。抗体芯片检测值与免疫比浊法检测值呈正相关（R^2=0．9199，P〈0．01）。结论成功构建基于直接标记法的抗体芯片，其具有简单、快速、高效、高灵敏度和重复性好等特点；具有开发应用于微量白蛋白尿大规模人群筛查的潜力。; 王丽梅刘必成吕林莉朱颖蔡珂丹郑敏; 关键词：白蛋白尿芯片分析技术抗体免疫比浊法

临床蛋白质组学研究中值得注意的问题: 2008年; 后基因组时代的到来使临床蛋白质组学成为各种疾病的研究热点。然而，由于研究过程中一些共识性规范的缺乏，研究设计缺乏合理性和科学性，尤其是在研究分组设计、样本量、样本处理、数据质量控制、统计学评价以及独立的结果验证等环节，导致研究结果难以充分解释或重复性较差。本文针对目前临床蛋白质组学研究存在的问题结合文献进行综述。; 吕林莉王丽梅刘必成; 关键词：临床蛋白质组学后基因组时代数据质量控制样本量

基于直接标记法抗体微阵列的初步构建被引量：1: 2009年; 目的:初步构建基于直接标记法的抗体微阵列,并评价其应用于临床的可能性。方法:选择白蛋白作为目标蛋白,通过琼脂糖铺片、玻片活化、机器点样、点样后固定等步骤构建抗体微阵列,经封闭非特异位点、标记抗原、加样后对白蛋白进行检测,对关键步骤——抗原标记进行最佳条件摸索,通过对临床标本的检测评价其潜在应用价值。结果:应用BCA蛋白定量试剂盒测定尿液样本总蛋白浓度做出的标准曲线,其R2均大于0.99;温度为37℃时抗原标记效果最佳;标记后抗原存放1周对信号的影响无统计学意义(P<0.01);本方法能够检测出临床检测为阴性的尿微量白蛋白浓度。结论:本研究构建了基于直接标记法的抗体微阵列,并对关键的抗原标记环节进行了最佳工作条件优化,有应用于临床检测的潜力。; 王丽梅刘必成吕林莉郑敏

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王丽梅

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