朱颖
- 作品数:7 被引量:12H指数:2
- 供职机构:东南大学学习科学研究中心儿童发展与学习科学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金高等学校科技创新工程重大项目更多>>
- 相关领域:医药卫生哲学宗教生物学更多>>
- 提高抗体芯片检测灵敏度的方法
- 2007年
- 抗体芯片作为蛋白质芯片的一种,具有高通量、高特异性及平行性分析的优点,目前已被应用到许多领域,成为蛋白质组学研究过程中不可缺少的技术。但是如何构建高敏感度、微型化及检测动力学范围广的抗体芯片以满足样品检测的需要,仍然是抗体芯片发展过程中所面临的重要挑战。就如何提高其检测灵敏度作一综述。
- 朱颖刘必成陆祖宏吕林莉
- 关键词:抗体芯片免疫检测灵敏度
- 住院患者慢性肾脏病患病情况的调查被引量:7
- 2007年
- 目的我国有关慢性肾脏病(CKD)流行情况的大样本临床调查资料报道较少,本研究拟在调查三级甲等医院住院患者 CKD 的患病情况。方法回顾性分析了2004年9月到2005年8月在南京市中大医院(三级甲等)住院的所有成人患者(≥18岁)的病历资料,共16 946份病历,剔除未检查肾功能的病历和同一患者重复住院的病历,最终有效入选病历为13 383份,男性6215例,女性7168例,观察患者的性别、年龄、高血压和糖尿病史、吸烟史、血压、肾功能、尿酸、白蛋白、血红蛋白、红细胞压积、血脂、尿蛋白等多项指标,参照 NKF-K/DOQI 指南的标准来定义 CKD,以简化的 MDRD公式求 eGFR。结果本研究中 CKD 患病率14.82%,其中 CKD1-5期患者所占比例分别为3.33%、2.49%、7.07%、1.08%和0.86%。大于65岁的老年患者占 CKD 的53.07%,其 CKD 患病率高于中青年患者(P<0.001)。9.01%的患者 eGFR 低于60 ml·min^(-1)·(1.73 m^2)^(-1),老年患者 eGFR 降低比例高于中青年患者(P<0.001)。尿蛋白阳性率8.87%,老年患者阳性率高于中青年患者(P<0.001)。高血压、糖尿病和原发性肾小球疾病是导致 CKD 的主要病因,分别占29.49%、11.64%、4.39%。有39.06%的 CKD 患者在住院期间未能做出 CKD 诊断,且都为 CKD1-3期患者。Logistic 回归提示高血压、糖尿病、年龄增长是 CKD 的重要危险因素。结论 CKD 是住院成人患者常见的一种慢性疾病,老年人是高危人群,高血压、糖尿病是最主要的病因,积极应用 K/DOQI 指南标准及时做出CKD 诊断,对早期预防和积极干预 CKD,降低终末期肾脏疾病的发生具有重要意义。
- 武晓春刘必成王艳丽王蓓高珺张庆娟朱颖张晓良尹莲芳
- 关键词:肾功能衰竭慢性患病率
- 基于琼脂糖膜为载体的抗体芯片工作条件的优化被引量:2
- 2008年
- 目的:优化以琼脂糖修饰的玻片为载体的抗体微阵列的制备方法,提高微阵列信噪比及检测灵敏度。方法:选取单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)作为待检的靶蛋白,在琼脂糖膜上首先固定MCP-1捕获抗体,经过洗涤、封闭,然后依次加入标准抗原、生物素标记的检测抗体以及亲和素标记的cy3,分别孵育、洗涤后,激光共聚焦扫描仪扫描获取图像,分析各点的荧光强度,根据荧光强度确定捕获抗体的最佳固定时间、温度以及最适宜的洗涤缓冲液。结果:与4、37℃过夜固定相比,捕获抗体室温(25℃左右)过夜固定时,蛋白质在载体上的固定效率和反应活性最高;捕获抗体过夜固定比固定2 h获得更高的检测灵敏度;另外,通过比较相同pH值不同溶质缓冲液的洗涤效应,pH 7.4的缓冲液PBST可获得更优信号强度。结论:本研究优化了以琼脂糖修饰的玻片为载体的蛋白质微阵列的反应条件,提高了微阵列的检测灵敏度。
- 朱颖吕林莉陆祖宏刘必成
- 关键词:抗体芯片琼脂糖玻片灵敏度
- 亲子依恋与父母养育方式之间的关系被引量:2
- 2015年
- 本研究采用问卷调查和多元线性回归分析方法,探讨269名儿童的早期亲子依恋对父母养育方式的预测。具体测量内容包括:儿童14个月时,母亲报告母子依恋程度,父亲报告父子依恋程度;儿童24个月时,母亲和父亲分别报告各自的保护担忧、严厉和接受等养育方式。结果发现:(1)母子依恋能正向预测母亲的接受,且负向预测母亲的保护担忧和严厉;(2)父子依恋能正向预测父亲的接受,且负向预测父亲的严厉。因此,母子依恋和父子依恋对父母各自养育方式的预测作用既存在着相同之处也存在着不同之处。
- 张印平刘亚鹏朱颖张光珍梁宗保陆祖宏邓慧华
- 关键词:亲子依恋严厉
- 基于直接标记法尿微量白蛋白检测抗体微阵列的构建
- 2009年
- 目的探讨基于直接标记法的尿微量白蛋白检测抗体微阵列(也称抗体芯片)构建方法,并评价其技术可行性。方法通过玻片处理、活化、固定等程序构建白蛋白抗体芯片。摸索用生物素标记标准品白蛋白及尿液样本的最佳条件。经封闭后加入生物素标记的标准品白蛋白,孵育,洗涤后加入链酶亲和素-Cy3,再经过孵育、洗涤后,用共聚焦激光扫描仪获取荧光强度值。根据不同浓度标准品白蛋白的荧光信号强度值做出浓度-信号强度曲线,并评价其检测灵敏度、特异性、重复性。收集临床糖尿病患者尿液标本,对尿液样本同时行免疫比浊法和抗体芯片法检测白蛋白值。结果生物素标记标准品白蛋白和样本的最佳总蛋白/生物素质量比为2:1。根据标准品白蛋白所做出的标准曲线其R^2〉0.99;捕获抗体浓度为1g/L时,最低白蛋白检测浓度为0.0617mg/L。阵列内变异系数为3.35%~7.59%;阵列间变异系数为6.78%~9.22%。抗体芯片检测值与免疫比浊法检测值呈正相关(R^2=0.9199,P〈0.01)。结论成功构建基于直接标记法的抗体芯片,其具有简单、快速、高效、高灵敏度和重复性好等特点;具有开发应用于微量白蛋白尿大规模人群筛查的潜力。
- 王丽梅刘必成吕林莉朱颖蔡珂丹郑敏
- 关键词:白蛋白尿芯片分析技术抗体免疫比浊法
- 儿童早期情绪性对学步期父母养育方式的影响被引量:1
- 2014年
- 运用追踪设计和分层回归分析,探究了281名儿童6个月和14个月时的受限后沮丧、恐惧和微笑大笑如何影响24个月时父母养育方式,以及这种影响是否随儿童年龄增长而变化。研究结果显示:(1)6个月时,仅受限后沮丧能正向预测24个月时母亲严厉的养育方式,14个月时受限后沮丧仍能正向预测母亲的严厉,恐惧也能正向预测母亲的保护担忧,而微笑大笑能正向预测母亲的接受,负向预测母亲的严厉和保护担忧;(2)6个月时,儿童的受限后沮丧能正向预测24个月时父亲的严厉和保护担忧,14个月儿童的受限后沮丧仍能正向预测24个月时父亲的严厉。
- 朱颖刘亚鹏张光珍张印平梁宗保叶明邓慧华
- 关键词:情绪性养育方式
- 基于夹心免疫分析的抗体微阵列的构建
- 2008年
- 目的:建立一种基于夹心免疫分析的抗体微阵列构建的优化方法。方法:将MCP-1的捕获抗体点样于修饰后的玻片,标准抗原加样覆盖所点阵列,生物素标记抗体和链酶亲和素-cy3依次加样孵育,激光共聚焦扫描仪获取图象并进行数据分析。对捕获抗体浓度、封闭液种类、系统可重复性和定量检测能力、两种因子平行性检测对信号分析的影响及点样后玻片稳定性进行分析和评价。结果:随着捕获抗体浓度的升高,信号强度逐渐增加;2%BSA/PBS和5%酪蛋白可作为本系统的封闭液;所构建系统具有较好的可重复性(组内变异1.3%,组间变异8.7%)和定量分析能力(所建立的抗原浓度-相对信号强度标准曲线相关系数达0.9995);并实现了两因子的平行性分析和点样后玻片的稳定性。结论:确立了基于夹心免疫分析的抗体微阵列构建的优化方法,为进一步构建多因子定量检测抗体微阵列奠定了基础。
- 吕林莉刘必成朱颖陆祖宏
- 关键词:蛋白质芯片免疫分析