梁春浩 作品数:135 被引量:586 H指数:14 供职机构: 辽宁省农业科学院 更多>> 发文基金: 公益性行业(农业)科研专项 辽宁省自然科学基金 辽宁省科技厅科技攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 文化科学 更多>>
葡萄白腐病菌对福美双抗药性的测定 被引量:8 2005年 从辽宁省不同地区采集到27株葡萄白腐病菌株。应用菌丝生长速率法测定各菌株对福美双的抗药水平。结果表明,不同地区采集的葡萄白腐病菌抗药性存在着差异,出现高抗性菌株,抗性频率为74.07%。在离体条件下,抗药性菌株表现出较高的抗药稳定性。菌丝生长速率和菌丝鲜重与病菌抗药水平有显著的相关性,而产孢量与抗药水平无相关性。 张博 刘长远 林凤 赵奎华 苗则彦 梁春浩 王瑞菊关键词:植物保护学 葡萄白腐病菌 福美双 抗药性 苍白杆菌SY286菌株纤维素酶基因的克隆与表达 被引量:1 2018年 由卵菌引起的植物病害大多难以控制,常因再侵染次数多,暴发流行而导致严重损失。卵菌细胞壁的主要成分为纤维素,因此具有产生纤维素酶能力的生防菌能够更好的用于防治卵菌门真菌引起的植物病害。SY286菌株对葡萄霜霉病菌具有较强抑制活性。纤维素酶活性检测试验结果显示,SY286菌株代谢产物中含纤维素酶,菌落周围透明带宽度达5.9mm。根据已报道的纤维素酶基因序列设计引物,经聚合酶链式反应(PCR)扩增得到了561bp纤维素酶基因相关片段,经Blast比对,该与内切β^(-1),4-葡聚糖酶基因序列相似性达99%,即为SY286基因的核心序列。根据此片段的序列设计特异性引物,通过交错式热不对称PCR(TailPCR)得到其上下游序列,经拼接获得完整的纤维素酶基因的开放阅读框(ORF)序列(命名为SY286基因)。该基因序列ORF长度为1494 bp,编码1个含497个氨基酸的蛋白质,预测其蛋白分子量为55.04k Da,理论等电点PI为8.12。经Blast比对,该序列与内切β^(-1),4-葡聚糖酶编码序列相似性达99%,确定SY286基因为内切β^(-1),4-葡聚糖酶基因。并利用SDS-PAGE电泳对该蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达结果进行了检测。经0.5mmol·L^(-1)的IPTG诱导下,重组菌在15℃、22℃、30℃和37℃条件下的表达产物均可在PAGE凝胶上出现特异性条带。经检测重组菌具有纤维素酶活性。试验结果为研究纤维素酶在植物病害生物防治中的应用,以及SY286菌株抑菌分子机理研究和菌株的遗传改良奠定了基础。 臧超群 白元俊 宋飞 谢瑾卉 林英 梁春浩关键词:苍白杆菌 纤维素酶 克隆 黄瓜细菌性角斑病的分子检测 被引量:10 2012年 探索黄瓜细菌性角斑病菌(Pseudomonas syringaepv.)的分子检测技术,为快速、准确鉴定和检测提供技术和方法。根据丁香假单胞杆菌黄瓜角斑病致病型病菌与其他黄瓜病原菌核糖体基因转录间隔区(16S-23S Ribosomal DNA Intergenic Spacer,ITS)序列间的差异,设计特异性引物PLf1/PLr2(PLf1:5'-ATA AGG GTG AGG TCG GCA GTT-3',PLr2:5'-CTC GTC TTT CAT CGC CTT TG-3')。引物PLf1/PLr2可从丁香假单胞杆菌黄瓜角斑病致病型病菌中增出1条473bp的条带,将黄瓜细菌性角斑病菌和其他菌种分开。建立的黄瓜细菌性角斑病分子检测的方法可用于该病害的快速分子检测,可直接对黄瓜叶片汁液进行病原菌检测,并且可在接种后病症发生前72h内检测到病原菌。 王平 樊金娟 刘长远 赵奎华 梁春浩关键词:分子检测 绿色木霉菌T23原生质体的制备和再生 被引量:15 2007年 试验研究了绿色木霉T23菌株原生质体制备及再生的适宜条件,并对原生质体的释放和再生过程进行了形态观察。结果表明:绿色木霉,123菌株原生质体制备的最佳条件:菌龄为24h,酶浓度为15mg/mL,酶解时间为3-4h,酶解温度为30-35℃。观察到木霉菌以菌丝断裂方式释放原生质体,以2种方式进行再生。 黄玉茜 梁春浩 陈捷关键词:木霉菌 酶解 原生质体 黄瓜细菌性白枯病遗传多样性RAPD分析 2010年 通过40条随机引物10碱基寡核苷酸链随机引物进行筛选,得到8条随机引物能够扩增出谱带清晰,带型稳定且具有多态性DNA片段,对分离的黄瓜细菌性白枯病8个菌株进行RAPD分析。结果表明:供试菌株共产生65条谱带,其中45条为多态性带,占谱带总数的69.23%;利用UPGMA法对DNA扩增图谱进行聚类分析,以遗传距离0.695为阈值,将8个供试菌株分为2种遗传类型。可见,黄瓜细菌性白枯病具有遗传多样性,遗传多样性与地理区域表现出明显的相关性。 刘震 刘长远 赵奎华 梁春浩 关天舒 王辉 李柏宏关键词:RAPD 花生褐斑病菌侵染对不同抗性花生活氧代谢及防御酶的影响 被引量:7 2018年 开展了3个不同抗性花生品种经花生褐斑病菌(Cercospora arachidicola Hori)胁迫后O2-、MDA含量和防御酶系含量变化的测定,分析其与品种抗病性的相关性。结果表明,供试花生品种接种褐斑病菌1~15 d内,O2-和MDA含量均呈现先升后降的趋势。对O2-含量而言,粤油7号9 d达到最大值,花育20号7 d达到最大值,鲁花11号5 d达到最大值;对MDA含量而言,粤油7号9 d达到最大值,花育20号9 d达到最大值,鲁花11号13 d达到最大值。接种病菌后叶片中CAT、SOD、POD、PAL和PPO的含量对比分析表明,鲁花11号最高,花育20号次之,粤油7号最低;3种花生品种受侵染后病情指数与防御酶含量均呈负相关,且SOD及PAL含量在抗病品种和感病品种间存在显著差异。表明花生褐斑病菌侵染后,叶片内氧阴离子及MDA暴发时间和含量变化与花生品种抗性密切相关,抗性越强的花生品种应答时间越迅速,叶片细胞遭受破坏越小,细胞功能丧失越少;不同花生品种对褐斑病抗性水平存在差异,褐斑病菌胁迫可引起花生叶片防御酶活性及抗氧化物质含量变化,且抗性越强的花生品种防御酶含量越高;SOD和PAL含量可作为鉴定花生对褐斑病抗性的生理生化指标。 林英 张海东 谢瑾卉 刘欣宇 臧超群 于舒怡 黄玉茜 梁春浩关键词:防御酶 辣椒根腐病化学防治田间试验 被引量:10 2008年 辣椒根腐病(Fusariumoxysporum Schlecht.)是土传病害中发生较为严重的病害之一。田间药效试验表明,40%氟硅唑乳油、25%丙环唑乳油、10%苯醚甲环唑可分散粒剂、50%噻菌灵悬浮剂、15%三唑酮可湿性粉剂均为防治辣椒根腐病的良好药剂。其中,40%氟硅唑乳油、25%丙环唑乳油两种药剂的防治效果最好,均达到80%以上。 陈彦 刘长远 王晓红 孙柏欣 纪明山 赵奎华 苗则彦 梁春浩关键词:辣椒根腐病 化学防治 葡萄霜霉病菌拮抗放线菌QH94的筛选及鉴定 被引量:2 2015年 为筛选出葡萄霜霉病菌的拮抗放线菌,对采自辽宁省沈阳、葫芦岛、锦州、鞍山、朝阳等地区葡萄园的23份土样中的放线菌进行分离,并对获得的119株放线菌进行防效评价,得到1株拮抗放线菌菌株QH94,其田间防效可达68.83%~89.80%。采用平板对峙培养法进行抑菌谱的测定,QH94菌株对9种病原菌有抑制作用,其中对稻瘟病菌的抑制作用最强,抑菌带宽度为10.57mm。根据菌株QH94的形态特征、培养特征、生理生化特性以及16S r DNA序列分析结果 ,将其初步鉴定为细黄链霉菌[Streptomyces microflavus(Krainsky)Waksman&Herici]。 蒋欣陶 赵奎华 刘长远 梁春浩 臧超群关键词:葡萄霜霉病菌 生物防治 放线菌 黄瓜内生生防菌B504在黄瓜体内的定殖 被引量:8 2009年 从黄瓜茎中分离的对黄瓜枯萎病具有生防作用的内生枯草芽孢杆菌B504,利用其基因标记菌株B504-1121,研究其在黄瓜体内的定殖情况。结果表明:施入土壤中的B504-1121菌体可以进入黄瓜根系,并向植株的茎、叶转移和定殖。菌体可在胚根中定殖,催芽时的菌体浓度对定殖数量影响很大,浓度越高,则在根、茎、叶中定殖数量越高,反之则低。在下部叶片叶柄处接种的菌体可向上移动,通过茎进入上部叶片;在叶部接种的菌,则只在接种叶内定殖,不再向其他部位转移。 苗则彦 赵奎华 刘长远 梁春浩 王辉 吕国忠关键词:黄瓜 内生细菌 生防菌 定殖 暗黑链霉菌PY-1活性产物分析及其对葡萄霜霉病田间防效评价 被引量:10 2018年 为探究暗黑链霉菌Streptomyces atratus PY-1对葡萄霜霉病菌Plasomopara viticola的抑制作用,通过扫描电镜观察PY-1发酵滤液对葡萄霜霉病菌孢子囊的影响,检测PY-1的活性物质种类,并测定其对葡萄霜霉病的田间防效。结果表明,PY-1发酵滤液能够导致葡萄霜霉病菌孢子囊和孢子囊梗出现褶皱、破裂和畸形,进而使其丧失侵染功能。PY-1菌株代谢产物中包含几丁质酶、蛋白酶、嗜铁素、1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶、氰化氢、吲哚乙酸,不含纤维素酶。PY-1菌株对葡萄霜霉病具有较好的田间防效,发酵原液对葡萄霜霉病的田间中期防效可达到89.17%以上,末期防效达86.28%以上,比52.5%噁唑菌酮·霜脲氰2 000倍液的防效略低,但显著高于58%甲霜·锰锌1 000倍液的防效;PY-1菌株发酵液稀释700倍后对葡萄霜霉病的末期防效与甲霜锰锌1 000倍液防效相当。表明PY-1菌株具有研制防治葡萄霜霉病生防制剂的潜力。 臧超群 白元俊 张海东 谢瑾卉 林英 梁春浩关键词:葡萄霜霉病菌 田间防效