杞少华
- 作品数：13 被引量：23H指数：3
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- TDAG51基因在PC12细胞中的过表达及其致凋亡作用被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨TDAG5 1基因在PC12细胞中的表达及其作用机制。方法 实验分为3组,实验组用绿色荧光蛋白质粒(p EGFP - C1 )载体把外源性TDAG5 1基因转染的PC12细胞;空载体对照组用p EGFP- C1 转染的PC12细胞;对照组未转染任何试剂的PC12细胞。在转染后2 4 h、4 8h、72 h收集细胞,用Western blotting检测过表达的TDAG5 1蛋白;转染后84 h用相差显微镜观察PC12细胞形态的变化;Hoechst332 5 8染色观察细胞核形态变化;检测凋亡执行蛋白Caspase- 3的变化。结果 TDAG5 1基因在PC12细胞中高表达;TDAG5 1基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,胞体变圆,轴突缺失;荧光显微镜下观察PC12细胞可见胞核固缩、染色质凝集,并可见核碎片;前Caspase- 3蛋白活化被切割;活化的17k Da Caspase- 3随TDAG5 1蛋白的作用时间延长而增多。结论 过表达TDAG5 1基因可诱导PC12细胞凋亡。
- 李宪奎张百芳彭芳芳杞少华沈晗吴少波武栋成
- 关键词：凋亡PC12CASPASE-3
- 骨髓间充质干细胞尾静脉注射与局部靶点注射对大鼠脊髓损伤修复效果的比较被引量：4
- 2013年
- 脊髓损伤（SCI）是一类严重的中枢神经系统疾病，年发生率高达（10．4～83．0）／100万，尚无有效的治疗方法。目前的研究表明骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植有助于脊髓损伤组织结构修复和运动功能的改善。研究结果显示，将BMSCs移植到脊髓损伤动物模型中，动物肢体运动功能显著提高；
- 杞少华王海峰熊文平武栋成
- 关键词：骨髓间充质干细胞脊髓损伤尾静脉注射中枢神经系统疾病肢体运动功能靶点
- 人胚胎干细胞系NS1的建立
- 2010年
- 目的：探讨利用长期冷冻的废弃胚胎建立人胚胎干（hES）细胞系.方法：将临床体外受精（IVF）及精子卵浆内注射（ICSI）周期中剩余冷冻5年以上的废弃胚胎复苏后继续培养至扩张囊胚,链霉蛋白酶去除透明带后采用全囊胚培养法获取原代类胚胎干细胞,再用机械法传代分离纯化hES细胞,命名为NS1.取不同代次的培养细胞,进行碱性磷酸酶染色、转录因子OCT-4、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、肿瘤排斥抗原TRA-1-60、TAR-1-81、核型及体内分化实验对NS1进行全能性鉴定.结果：12枚废弃胚胎在体外继续培养后,有4枚发育为囊胚,最终得到1个干细胞系,经鉴定,这些细胞都具有hES细胞的生物学特性.结论：长期冷冻的废弃胚胎可用来建立hES细胞系.
- 丁妍杨华刘锋李瑞明冯静波杞少华丘映李东升
- 关键词：胚胎干细胞囊胚内细胞团
- 高效hCu,Zn-SOD-PTD融合蛋白的表达及其穿膜功能的研究被引量：3
- 2016年
- 目的探讨h Cu,Zn-SOD-PTD融合蛋白的表达及其穿膜功能。方法首先,人工设计合成蛋白转导域序列(protein transduction domain,PTD),以人胚肝组织的总RNA为模板,逆转录扩增得人铜锌超氧化物歧化酶全长c DNA序列。其次,将此序列及人工合成PTD序列定向插入p ET16b载体;测序鉴定后,将构建成功的重组载体导入E.coli BL21菌株,异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,经镍柱纯化,洗脱液经SDS-PAGE检测。最后,将纯化产物与食管癌细胞(EC9706)共孵育,用激光共聚焦和流式细胞仪的方法检测蛋白穿膜能力及活性。结果测序结果与人铜锌超氧化物歧化酶全长c DNA序列相符;SDS-PAGE结果出现18.6 kd和20 kd的目的条带;激光共聚焦和流式细胞仪的方法显示蛋白可穿膜且保持活性。结论本实验成功构建了PET16b/h Cu,Zn-SOD-PTD原核表达质粒,可在大肠杆菌中稳定表达融合蛋白,融合蛋白具有穿膜且保持活性。
- 王晓勋杞少华李瑞明梁清乐
- 关键词：蛋白转导域生物膜原核表达载体
- 骨髓间充质干细胞对顺铂所致大鼠急性肾损伤的保护作用和分子机制
- 急性肾损伤是一种临床上常见的综合症,以急性肾小球滤过率下降、氮质血症、水电解质及酸碱平衡紊乱等为主要临床表现。其发病机理复杂,涉及到肾细胞凋亡或坏死、炎症反应、氧化应激反应等多种病理机制。患有糖尿病、血管疾病、慢性肾病或...
- 杞少华
- 关键词：顺铂间充质干细胞急性肾损伤
- 文献传递
- 过表达小窝蛋白-1对293T细胞生长的影响
- 杞少华
- 关键词：小窝蛋白-1
- 自体脂肪间充质干细胞移植对糖尿病大鼠肾功能的改善作用被引量：4
- 2015年
- 目的:利用动物模型研究自体脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)移植对糖尿病大鼠肾功能的改善作用。方法 :SD大鼠连续5 d腹腔注射40 mg/kg链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立1型糖尿病动物模型。造模4周后随机将18只SD大鼠分为糖尿病组(n=9)和ADMSCs移植组(n=9),另选正常大鼠作为对照组(n=9)。取自体ADMSCs经体外培养、鉴定后,尾静脉注射到ADMSCs组大鼠体内。于ADMSCs移植8周后测定各组大鼠血糖、胰岛素、血尿素氮、血肌酐和24 h尿蛋白的水平,并测量体重、肾重。结果:ADMSCs经体外培养后表达间充质干细胞表型抗原,并能够诱导分化为成骨细胞和成脂细胞。糖尿病组和ADMSCs组大鼠的血糖、尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白及肾重/体重比值均明显高于对照组(P<0.05)。ADMSCs组大鼠的血糖、尿素氮及肾重/体重比值均低于糖尿病组(P<0.05),且胰岛素水平较糖尿病组有所升高(P<0.05)。另外,ADMSCs组较糖尿病组的24 h尿蛋白和血肌酐水平下降,但差异无统计学意义。结论:自体ADMSCs移植能够在一定程度上改善和缓解1型糖尿病大鼠的肾功能紊乱。
- 闵小春伍婷婷杞少华姚维琪武栋成
- 关键词：糖尿病肾病脂肪间充质干细胞肾功能
- 过表达小窝蛋白-1对293T细胞生长的影响及机制
- 2009年
- 目的:探讨小窝蛋白-1(caveolin-1)蛋白过表达对细胞生长与增殖的影响及其机制。方法:将重组的真核表达质粒PHLCX Nflag3/小窝蛋白-1以脂质体法转染293T细胞,流式细胞仪测定细胞周期变化;Western Blotting分析P53、P21、ERK、pp-ERK蛋白表达。结果:293T细胞出现了G0/G1期阻滞;P53/P21表达增加,ERK/ppERK表达减少。结论:过表达小窝蛋白-1抑制293T细胞生长,并且这种对细胞生长抑制作用通过P53/P21与ERK信号传导通路实现的。
- 杞少华李东升李瑞明武栋成
- 关键词：小窝蛋白-1基因表达293T细胞
- p53蛋白参与NGF诱导的PC12细胞周期阻滞被引量：1
- 2004年
- 通过观察不同营养状况下NGF诱导PC12细胞发生周期阻滞过程中p53蛋白水平的变化,探讨p53在PC12细胞周期阻滞中可能的作用机制.用流式细胞术检测细胞周期;Westernblot检测p53和p21WAF1/CIP蛋白水平.结果显示1%FBS(FatalBovineSerum)和50μg/LNGF(NerveGrowthFactor)均可诱导PC12细胞发生细胞周期阻滞.在10%FBS+50μg/LNGF处理的细胞中,p53和p21WAF1/CIP1均增高,而使用MEK抑制剂U0126(10μmol/L)可以抑制这一增高.在1%FBS处理的细胞中,p53水平增高,p21WAF1/CIP1却未见明显增高;进而加入50μg/LNGF作用1h后,p53显著降低,6h后再次升高,并持续至24h.可见p53在50μg/LNGF和1%FBS诱导的细胞周期阻滞中均发挥作用,但作用机制可能不同.
- 吴少波张雯彭芳芳张百芳沈晗杞少华李宪奎武栋成
- 关键词：NGFFBSPC12细胞
- 磷酯酰肌醇3激酶抑制剂对碱性成纤维细胞生长因子诱导的平滑肌细胞增殖及迁移的影响被引量：2
- 2009年
- 目的：研究磷酯酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂Wortmannin（WT）对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖、迁移及磷酸化Akt蛋白表达的影响，为探讨bFGF诱导平滑肌细胞增殖和迁移的信号通路提供实验依据。方法：采用细胞计数、划痕损伤实验和免疫印迹法，观察Wortmannin对bFGF诱导的VSMCs增殖、迁移及磷酸化Akt表达的影响。结果：干预后24h，bFGF组VSMCs增殖、迁移较对照组明显增强，同时磷酸化Akt的表达平行增高。加用Wortmannin后，明显抑制了VSMCs的增殖、迁移和磷酸化Akt的表达。结论：bFGF诱导的VSMCs增殖和迁移可能是通过PI3K／Akt信号通路发挥作用。
- 陈龙菊蒋飞卢进昌杞少华王配军王汉琴
- 关键词：增殖迁移蛋白激酶B碱性成纤维细胞生长因子
