李明凤
- 作品数：20 被引量：64H指数：4
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- 猪细小病毒与猪伪狂犬病毒二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法
- 本发明公开了猪细小病毒与猪伪狂犬病毒二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成引物，利用引物检测猪细小病毒与猪伪狂犬病毒的二重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA...
- 魏战勇陈红英胡慧李明凤崔保安郭显坡
- 文献传递
- 猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法
- 本发明公开了猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成出引物，利用引物检测猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型的二重SYBRGreen I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品...
- 魏战勇胡慧陈红英崔保安李明凤郭显坡贾艳艳
- 文献传递
- 猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR GreenⅠ实时荧光PCR检测方法的建立被引量：4
- 2014年
- 参照GenBank登录的相关基因序列,设计了2对引物分别用于扩增伪狂犬病毒(PRV)gH基因与猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因的部分片段。将测序正确的PRV gH基因与PCV2ORF2基因片段克隆入pGEM-T Easy载体,转化大肠杆菌DH5α,经测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线,并对其灵敏性、特异性和重复性进行验证。结果显示,PCV2与PRV荧光定量PCR的标准曲线的Tm值分别为80.8℃和86.7℃,熔解曲线特异,灵敏度分别可达215拷贝/μL和180拷贝/μL,是普通PCR检测方法的100倍。结果表明,建立的PCV2与PRV荧光定量PCR检测方法实现了2种病毒的同时检测,能够对PRV、PCV2混合感染的临床病料进行快速诊断。
- 郑兰兰张君涛李明凤郭显坡陈红英崔保安魏战勇
- 关键词：猪圆环病毒2型猪伪狂犬病毒SYBRI
- 猪圆环病毒2型SYBR-Green 1实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：5
- 2009年
- 【目的】建立一种能够快速、灵敏地检测猪圆环病毒2型(PCV2)的SYBR-Green 1实时荧光定量PCR方法。【方法】根据已报道的PCV2ORF2基因组序列,设计并合成1对引物。通过常规PCR扩增PCV2ORF2基因,将鉴定正确的ORF2基因片段克隆入pTG19-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR-Green 1荧光定量PCR标准曲线和溶解曲线,并做灵敏性、特异性和重复性试验。【结果】PCV2荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线特异,相关系数为0.9988,最低检测的拷贝数为1拷贝/25μL,特异性和重复性较好。【结论】建立了检测PCV2的SYBR-Green 1荧光定量PCR方法,为该病的早期诊断及定量分析PCV2感染程度奠定了基础。
- 贾艳艳李明凤王东方崔保安陈红英魏战勇吕晓丽郭显坡
- 关键词：SYBR实时定量PCRPCR检测方法
- 不同秋眠级紫花苜蓿品种的生产性能在郑州地区的表现被引量：24
- 2008年
- 试验研究了2,3,4,5,7,8共6个秋眠级18个紫花苜蓿Medicago stiva品种的重要农艺性状表现。结果表明,秋眠级对紫花苜蓿的年鲜草产量、株高等有较大影响,其中秋眠级别为4级的紫花苜蓿品种的年鲜草产量极显著高于5级(P<0.01),显著高于7级品种(P<0.05),但与2,3,8级品种产量差异不显著(P>0.05),综合考虑,秋眠级为2,3,4的紫花苜蓿品种较适合在郑州地区种植;不同茬次对其生长性能有更大的影响,其中第1茬的产量和株高最大,其次为第2,3茬,第4,5茬最低,前3茬占全年产量的80%左右,应加强对前3茬的管理。
- 李明凤李平王成章叶芳林樊文娜张晓霞
- 关键词：紫花苜蓿秋眠性
- 猪伪狂犬病毒SYBR-GreenⅠ实时定量PCR检测方法的建立被引量：9
- 2009年
- 利用PCR技术扩增出猪伪狂犬病毒gH基因中187 bp的片段,并克隆到pGEMT载体上,纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪伪狂犬病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达1.26×102拷贝.μL-1,与猪圆环病毒,猪细小病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪瘟病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对15份疑似病料进行了检测,发现均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出6份阳性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PRV感染的检测.
- 李明凤魏战勇郭显坡贾艳艳陈红英王学兵崔保安
- 关键词：猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR
- 猪细小病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法
- 本发明公开了一种猪细小病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成引物，利用引物检测猪细小病毒与猪圆环病毒2型的二重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品...
- 崔保安魏战勇陈红英李明凤党玉丽郭显坡
- 文献传递
- PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法
- 本发明公开了一种PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法，SIV H9亚型引物的序列如下：上游引物P1：5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′；下游引物P2：...
- 魏战勇李明凤陈红英宋亚鹏韩志涛崔保安
- 文献传递
- 猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型多重实时荧光PCR检测引物及方法
- 本发明公开了一种猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型多重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计合成出引物，利用引物检测猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型的多重SYBR Green I实时荧光...
- 魏战勇李明凤陈红英党玉丽胡慧崔保安郭显坡
- 文献传递
- 河南省新农村建设保障体系研究
- 张国富李艳花孙金华李明凤张亚婕程崇路玲
- 该研究成果，无论是对推进我省社会主义新农村建设问题的研究，还是为政府有关部门制定推进我省社会主义新农村建设相关政策，都将起到重要的积极作用。该研究从理论上搞清了我省在社会主义新农村建设过程中，在政策、财政、金融、法律、政...
- 关键词：
- 关键词：新农村建设
