扬帆
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 基因工程乳腺癌特异性人单链抗体的表达与特性被引量：4
- 2002年
- 研究解决分泌人单抗的杂交瘤细胞系难于稳定持久分泌抗体的难题 ,制备单链抗体 ,使单抗分子小型化 ,为进一步研究其在肿瘤诊断和治疗中的应用作准备。从分泌抗乳腺癌人单抗的杂交瘤细胞CM 1总RNA中 ,利用RT PCR技术分别扩增出人单抗重链可变区VH 基因和轻链可变区VL 基因 ,将扩增产物纯化后克隆于pGEM T载体中 ,进行DNA测序和序列比较分析后 ,将两者共克隆于表达载体中诱导表达 ,利用斑点免疫印迹及竞争抑制法检测表达产物的抗原性。所克隆的CM 1人单抗重链可变区和轻链可变区基因片段 ,分别属于人免疫球蛋白IgMⅢ亚群 ,和鼠κ轻链V亚群 ,ⅩⅦ家族 ,用斑点免疫印迹法检测可见表达产物能与人乳腺癌细胞特异结合 ;人CM 1单克隆抗体对此单链抗体与人乳腺癌细胞的结合有竞争性抑制作用 ,抑制率为 75 7%。结论成功地制备了可特异结合乳腺癌细胞的CM
- 张云王树蕙郭彩云李文辉扬帆
- 关键词：基因工程乳腺癌单链抗体
